Analyst:数字PCR数据的准确、可靠、非监督自动分类新方法
清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室在《分析学家》(Analyst)在线以封底(back cover)发表题为《一种双荧光四分类微液滴数字PCR数据的准确、可靠和自动分类方法——密度分水岭算法》(A density-watershed algorithm (DWA) method for robust, accurate and automatic classification of dual-fluorescence and four-cluster droplet digital PCR data)的研究论文,该研究将微液滴数字PCR的数据密度分布与分水岭算法(一种图像分割方法)有机结合,建立了一种微液滴数字PCR数据非监督分类的新方法。 微液滴数字PCR是一种单分子水平的核酸定量分析技术。通过将PCR反应体系分割为大量的微液滴,绝大多数微液滴内仅含有0个或1个模板分子,含有模板分子的微液滴在PCR扩增后呈现出较强的......阅读全文
高效抗癌新方法问世
细胞核靶向介孔二氧化硅纳米载药体系成功实现高效抗癌 面对全球严峻的抗癌形势,如何在提高癌症治疗效果的同时,降低药物的毒副作用以减轻病人痛苦并延长生存期已成为重大的社会问题。 中科院上海硅酸盐研究所研究员施剑林带领的介孔与低维纳米材料课题组,致力于开发高效抗肿瘤的新方法和新技术,在
抗体定向偶联新方法
IVD前沿!这所名校揭示了抗体定向偶联新方法! 在《抗体偶联技术从哪里创新?》一文中,曾提及过东南大学与南京东纳生物公司联合开发了一种简单的亲和偶联与化学偶联结合的方法,实现抗体定向包被在聚苯乙烯微球表面。近日,东南大学再度发表文章,揭示了一种更为简单的抗体定向偶联方法和机制。在免疫学实验中,我们常
知晓PCR,定量PCR与数字PCR的实验方法与选择
从1985年至今的30多年时间里,PCR分析经历了三代技术的发展。一代传统PCR技术,采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术,通过在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监控PCR进程,最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术,通过将PC
PCR新手指南:快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素:1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析,以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度,但标的大多是zui大变温
普通-PCR、实时荧光定量-PCR-和数字-PCR-对比分析(一)
提起 PCR,在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳,无人不知无人不晓,其影响之深,应用之广可见一斑。1985 年,美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应(PCR),实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而,采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR,由于该酶不
PCR新手指南:快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素:1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析,以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度,但标的大多是最大变温速度
PCR新手指南:快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素:1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析,以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度,但标的大多是zui大变
免疫PCR(ImmunoPCR)概念、组成和免疫PCR产物的检测
(一) 免疫PCR技术的概念免疫PCR是一种抗原检测系统,将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上,再用PCR方法将这段DNA扩增,然后用常规方法检测PCR产物。免疫PCR集PCR的高灵敏度与抗体和抗原反应的特异性于一体。其突出的特点是指数级的扩增效率带来了极高的敏感度,能检出浓度低至2ng
普通PCR、实时荧光定量PCR和数字PCR对比分析(二)
模板 DNA 量越多,荧光达到域值的循环数越少,即 Ct 值越小。Log 起始模板浓度与 Ct 呈线性关系,通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,根据样品 Ct 值,就可以计算出样品中所含的模板量。目前常用荧光标记方法 方法 优点
闲聊PCR
虽然长了些, 但耐心看完,应该对你的问题有所帮助 各位战友 我们来聊聊PCR :) PCR可以说是目前分子生物学实验中应用最为广泛的一种技术。从最初的在几个水浴锅里把试管放来放去,到现在各种先进的PCR仪, 到REAL TIME PCR。 设备是越来越先进,方法是越来越多,但基本的原理还是那套
Inverse-PCR
Genomic DNA Prep from 5 ml culture, resuspend in 50 µl TE Digestions Use either AciI, AluI, HaeIII, HpaII, RsaI or TaqI for Leu trans
原位PCR
About in situ PCR (Applied Biosystems) Basic information about in situ PCR and its applications. The In Situ PCR: Amplification and Detection in
实时-PCR
一旦 RNA 收集纯化完成,可以采用对不同的细胞质或核糖体 RNA 专一的商业化的实时 PCR 试剂盒,以组成型的 rRNA 为标准对所有资料进行标定。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒cDNA 样品rRNA 引物和探针目的基因的引物和探针Tag Man Un
PCR佐剂
Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) o
标准PCR
What's PCR? (Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not only for thos
Long-PCR
Two long PCR steps:First round of the nested PCR step of the end point dilution procedure to quantitate the cDNA.First round of the nested PCR step of
PCR佐剂
Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) of
PCR引物
PCR Primer Design and Reaction Optimization (Molecular Biology Techniques Manual) PCR Primer Design (Newman Lab) PCR Primer Design (Eppendorf)Detail
Basic-PCR
实验概要The following basic protocol serves as a general guideline and a starting point for any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubati
Colony-PCR
Colony PCR is useful in determining whether or not a specific colony on a plate has a sequence you desire. Primers for the specific sequence should be
Degenerate-PCR
Degenerate PCR is in most respects identical to ordinary PCR, but with one major difference. Instead of using specific PCR primers with a given sequen
实时-PCR
试剂、试剂盒 cDNA 样品rRNA 引物和探针目的基因的引物和探针Tag Man Universal PCR Master Mix 超纯水仪器、耗材 序列监测仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂来自方案 5 的 cDNA 样品20X18SrRNA 引物和探针(AppliedBiosyste
PCR技术
实验方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依赖于DNA聚合酶的酶促反应。PCR技术的特异性取决于引物和模板结合的特异性。反应分为变性、退火、延伸三步,经过一定的循环,介于两个引物之间的特异DNA片段得到大量扩增。
PCR仪
简单的说,PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定
Quantitative-PCR
实验概要Quantitative PCR involves co-amplification of two templates: a constant amount of a preparation containing the desired target sequence and var
PCR-protocol
PCR reactionProtocol for 50µl reaction - adjust amounts if necessary, for a 20µl reaction use the same volumes of primer and dNTP-mix, but adjust the
Long-PCR
Two long PCR steps:First round of the nested PCR step of the end point dilution procedure to quantitate the cDNA.First round of the nested PCR step of
PCR引物
PCR Primer Design and Reaction Optimization (Molecular Biology Techniques Manual) PCR Primer Design (Newman Lab) PCR Primer Design (Eppendorf)Detail
定量PCR
定量PCR可以用于:(1)以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量;(2)用外标法(荧光杂交探针保证特异性)通过监测PCR过程(监测扩增效率)达到精确定量起始模板数的目的,同时以内对照有效排除假阴性结果(扩增效率为零)。实验方法原理定量PCR(即时聚
闲聊PCR
各位先生,各位女士,各位来宾,各位领导,各位海外侨胞,港澳同胞,欢迎参加两位新人的结婚晚会哦 啊 拿错了, 这是我明天参加婚礼的发言这个才是各位战友 我们来聊聊PCR :)PCR可以说是目前分子生物学实验中应用最为广泛的一种技术。从最初的在几个水浴锅里把试管放来放去,到现在各种先进的PCR仪, 到R