labonchip对PCR的一些个人体会
PCR应该是分子生物学的基本,记得刚进实验室时,大家的口头禅就是:今天你P了吗?那怎样才能做好PCR,结合个人体会,我谈谈自己的看法。论坛里高人很多,说得不对的还请多多指教和包含。当然,若能给新人朋友们带去一些帮助,那我本贴的目的就算是达到了。PCR设计的一般套路1) 目的基因或目的基因片段对象是什么?对于原核生物来说,由于不存在外显子和内含子,因此还比较简单,直接从genebank把序列调出来就可以,个人建议以FASTA格式(txt文本方式)保存,这可方便后面的primer或danman等软件调用。而对于真核生物来讲,那你就要注意了。对象如果是DNA基因(即直接从基因组中调出),那你就要从genebank中调DNA序列而不是mRNA基因序列了。如果是做RT-PCR,那就要掉mRNA序列。对于细菌来讲,由于存在种和型的分类,那这是你就要注意了,你到底是想做哪个水平的研究(是属?还是种?还是某某型),根据你的情况,调出相应基因。2......阅读全文
儿童阑尾炎的诊治体会
导读近两年来发现儿童阑尾炎正在向低龄化发展。近两年来发现最小的阑尾炎患者为17个月。小孩子患有阑尾炎,表述不清楚,容易误诊。把这两年对小儿阑尾炎的诊治体会分享给大家。希望儿童阑尾炎能得到早期的有效救治,早日给患儿解除痛苦。 在临床上经常能遇到发热、伴有腹痛、呕吐的孩子来就诊。尤其病史大于三天者,要注
胶回收的心得体会
胶回收1. 提高胶回收量的办法:1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。5) 溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有
支气管扩张病人的护理体会
支气管扩张症是由于不同病因引起的气道及其周围组织的慢性炎症,造成气道壁损伤,继之管腔扩张和变形。 临床表现为慢性咳嗽,咳痰,间断咯血和反复肺部感染。笔者认为支气管扩张症病人,除了遵照医嘱服用必需的药物之外,对病人做好护理工作,是支气管扩张症疾病康复的关键。 现总结如下: 1.
血气分析仪的使用体会
血气分析仪是抢救、监护和治疗危重病人的主要临床检验设备,还广泛运用于手术病人和亚急诊病人。血气分析结果是评价病人呼吸、氧化及酸碱平衡状态的必要指标,为临床疾病诊断、疗效观察和调整治疗药物或应急治疗措施等提供科学的依据。我科室2001年3月购进丹麦雷度ABL-5血气分析仪,该仪器的电极由PO2电极
浅谈小儿喉罩全麻的体会
小儿全麻是临床麻醉工作中比较棘手和比较重视的一个话题。由于很多小儿岁数小,无法配合医生,很多手术都是需要全麻来进行。加上小儿气道和成人有所区别,因此全麻术后拔管不当可导致气管痉挛等并发症。 小儿手术大多用时不长,以往氯胺酮麻醉已经逐渐淘汰,加上氯胺酮苏醒时间较长,气道不好管理,容易出现呼吸道抑制
检验与临床配合沟通的体会
临床检验是将病人的血液、体液、分泌物、排泄物和脱落细胞等标本,通过目测观察、物理、化学、仪器或分子生物学方法检测。在检测的全过程中(分析前、分析中、分析后)要采取严密的质量管理措施,以适应临床需要。为病人提供有价值的实验资料。临床医师根据检验结果,结合所收集的详细完整的病史,进行系统
浅谈甲状腺功能亢进的护理体会
甲状腺功能亢进症(简称甲亢)是指血液循环中甲状腺激素过多,引起以神经,循环,消化等系统兴奋性增高和代谢亢进为主要表现的一组临床综合征。由于本病治疗时间长,且病人情绪激动及感染均可诱发本病,故在治疗的同时要做好各项护理工作,对本病的康复十分关键,现总结如下: 1.基础护理1.1环境保持病室安
尿液分析仪的应用体会
尿常规检测是临床检验基本项目之一,随着先进医疗设备在医学领域的使用,尿分析仪是尿液检验形成自动化,这对临床有关疾病的诊断、治疗、疗效观察有重要意义。但尿分析仪检测与镜检法检测存在一定差异,现单就白细胞数测定对比分析如下: 1 资料与方法 1.1 临床资料 选择门诊、住院的1400例患者
对食品检测实验室仪器设备配置的一些建议
近年来,食品安全及品质问题越来越受到人们的关注。这里所说的食品是广泛意义上的食品,包括:初级农产品,如:粮谷、油料籽、蔬菜、水产品、畜禽产品、水果等,也包括加工后的食品,如:罐头、火腿肠、食用油、方便面、酱菜、调味品等。开展食品检测的实验室也越来越多。在这些实验室中由于性质不同,检测的项目不同,而对
大家对尘埃粒子计数器的一些简单参数了解吗?
粒子计数器它是是气体工业名词术语,它可以分为两种类型,它们能够在各种的生产企业和科研部门运用。 尘埃粒子计数器是检测洁净室净化室无尘车间空气尘埃颗粒浓度,颗粒大小多少以及检测净化级 别(洁净等级)的专用计量仪器,它广泛应用于电子行业、制药车间、光学彩管、半导体、精密机械、塑胶、 喷漆、医院、环
关于“乙肝两对半”检验对结果解释的一些认识(一)
1.对HBsAg携带者升学、就业、结婚等有什么限制?由于人们对HBsAg携带者的认识不够全面,以至一些HBsAg携带者中的青年在升学、就业、结婚、甚至出国等都发生了各式各样的问题。其实有些问题并非那么严重。HBsAg携带者约占我国总人口的10%,他们中不乏有科学家、名演员和为国争光的优秀运动员。除了
分享一些盐基度对聚合氯化铝处理效果影响的研究文献
以下为您推荐一些相关研究文献,您可以通过学校或研究机构的图书馆数据库获取全文:李风亭, 张善发, 赵艳. 聚合氯化铝的盐基度与混凝性能关系的研究[J]. 工业水处理, 2003, 23(4): 17-19.王趁义, 毕 infancy, 韩志萍. 盐基度对聚合氯化铝形态分布和混凝性能的影响[J].
关于“乙肝两对半”检验对结果解释的一些认识(二)
5.HBsAg和HBeAg能否转阴? 急性乙型肝炎患者表面抗原和e抗原的阴转可能性很大;但慢性肝炎和携带者的HBSAg转阴是很少了,年转阴率仅为1-2%。现有的药物也没有能使它消失的。至于HBeAg,随着时间的推移,至少有50%以上的人将会阴转,并产生抗一HBe。现有的抗病毒药物,如干扰素、法昔洛韦
彩色多普勒超声对腹壁切口子宫内膜异位症超声诊断体会
子宫内膜异位症是具有生长功能的子宫内膜组织出现在子宫腔被覆粘膜以外的其他部位[1]。异位内膜可出现在身体的不同部位,绝大多数发生在盆腔脏器,发生在腹壁切口处的子宫内膜异位症较少见。但近年来随着剖宫产率的逐年增加,腹壁切口子宫内膜异位症的发病率也呈上升趋势,虽然本病不会危及患者的生命,但却给患者带
彩色多普勒超声对腹壁切口子宫内膜异位症超声诊断体会
子宫内膜异位症是具有生长功能的子宫内膜组织出现在子宫腔被覆粘膜以外的其他部位[1]。异位内膜可出现在身体的不同部位,绝大多数发生在盆腔脏器,发生在腹壁切口处的子宫内膜异位症较少见。但近年来随着剖宫产率的逐年增加,腹壁切口子宫内膜异位症的发病率也呈上升趋势,虽然本病不会危及患者的生命,但却给患者带
晚期胃癌患者的姑息治疗的体会
胃癌是起源于胃黏膜上皮部位的一种恶性肿瘤,发病率居于各种恶性肿瘤的第4位[1],其发病原因主要与生活环境、饮食习惯、遗传等方面有关,在其治疗中,则需要根据患者的病情来选择治疗措施[2]。对于晚期胃癌的患者,由于其病情特殊性,已经不具备手术指征,所以需要尽早给予姑息治疗对其症状进行预防或者控制,改善患
PCR实验-延长变性时间对反应有何影响
如果在推荐的变性时间之上再延长,这样好像不太好,在95 °C条件下变性30 Sec一般都能够使模板变性。还有你说的变性是指循环的变性还是预变性?有的热启动酶需要预变性时间比较长,一般3-5 min就够了。变性时间延长会导致酶活性的降低。如用Takara的荧光定量PCR试剂盒时,预变性时间为30sec
哪种抗凝剂对pcr反应具有抑制作用
肝素。它存在于肺、血管壁、肠粘膜等组织中,是动物体内一种天然抗凝血物质。天然存在于肥大细胞,现在主要从牛肺或猪小肠黏膜提取。作为一种抗凝剂,是由二种多糖交替连接而成的多聚体,在体内外都有抗凝血作用。肝素首先从肝脏发现而得名,由葡萄糖胺,L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替组成的黏多糖
保养对依赖自然风降温的PCR仪器非常重要
虽然PCR仪器不是一种计量仪器,但其主要作用原理与基本计量要素密切相关,要求较高,一旦失控,仪器将不能正常工作,所以PCR仪器也需要定期检测和维护,这对依赖自然风降温的PCR仪器尤为重要。 在仪器的维护保养中,需要注意以下问题: 1)PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定一般半
保养对依赖自然风降温的PCR仪器非常重要
虽然PCR仪器不是一种计量仪器,但其主要作用原理与基本计量要素密切相关,要求较高,一旦失控,仪器将不能正常工作,所以PCR仪器也需要定期检测和维护,这对依赖自然风降温的PCR仪器尤为重要。 在仪器的维护保养中,需要注意以下问题: 1)PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定一般半年至少
实时定量PCR法对mRNA的检测、分析及定量的方法
方法:实时定量PCR目标RNA的类型:mRNA同时定量的目标RNA的数量:通常为一个,但也可检测多个目标RNA,参见Stanley和Szewczuk(2005)等的研究结果,他们在单个多重反应中同时分析过72个mRNA。用途:是检测目标RNA的一种高灵敏及高精度的方法。即使目标RNA在细胞中拷贝数极
3’RACE-实验心得
引子:从06年12月份开始,断断续续做了一个多月的3’RACE,有了一些心得和体会。期间看了很多前辈们分享的经验,受益匪浅。在这里,我就自己的经历略作总结,希望能给像我一样的新人们有点启示,少走些弯路,不当之处欢迎指正。一、试剂盒的选择:3’RACE从原理上就能明白,它比5’RACE 要容易得多,所
SLAS协会个人会员
会员费: 注意:SLAS会费每个月按比例减少,所有会籍于12月31日到期,表格中为全年费用,点击在线填写注册表格,查看当月会费。如有疑问,敬请联系我们的客服人员,发电邮至 asia@slas.org 或致电 +86 21 51081513 会员类型生物分子科学分部
Pittcon-2013-个人奖项揭晓
2013年3月17日~21日,匹兹堡分析化学和光谱应用会议暨展览会 (Pittcon 2013),将在美国宾夕法尼亚州费城会展中心隆重召开。近期,Pittcon 2013计划委员会外公布了12个杰出贡献个人荣誉奖项名单,这些奖项主要是奖励那些在分析化学和应用光谱学领域
首个人工毛囊问世
通过改造小鼠的胚胎皮肤细胞,日本横滨国立大学研究人员培育出1个月可长到3毫米的毛囊。这是首次在实验室中培育出成熟的毛囊,并有望用于治疗脱发。相关研究10月21日发表于《科学进展》。 未参与该研究的英国伦敦玛丽女王大学的Kairban Hodivala-Dilke表示,从历史上看,人工制造毛囊是非
乙肝表面抗体会消失吗?
当乙肝病毒入侵人体后,就会刺激人的免疫系统产生免疫反应,身体内免疫系统中的B细胞就会分泌出一种特意的人体免疫球蛋白,即表面抗体,它能够和乙肝表面抗原特异性结合,然后在身体内与人体的其他免疫能力一同的作用下,将乙肝病毒清理,并且能够同时保护人体再也不受乙肝病毒的感染。有了表面抗体,证明人已经产生了
非晶体会不会融化?
当晶体从外界吸收热量时,其内部分子、原子的平均动能增大,温度也开始升高,但并不破坏其空间点阵,仍保持有规则排列。继续吸热达到一定的温度——熔点时,其分子、原子运动的剧烈程度可以破坏其有规则的排列,空间点阵也开始解体,于是晶体开始变成液体。在晶体从固体向液体的转化过程中,吸收的热量用来一部分一部分地破
胸腹贯通伤患者麻醉体会
1.病例介绍 患者,男,51岁。因“胸腹部贯通伤10+h”于2014年12月21日入院。10+h前,患者不慎从2楼摔下,落在直立的钢管上,钢管自会阴贯通至左肩,被紧急送至当地医院。受伤后患者意识清楚,在当地医院建立静脉通道并简单包扎止血后入我院急诊科。患者既往有高血压病史,服药不规律,曾服用利血
乳腺癌外科治疗体会
摘要目的:探讨乳腺癌不同方法外科治疗的得失总结不同外科治疗方法优缺点。方法:回顾性分析乳腺癌患者不同的临床特点、生存情况及疗效分析,探讨术前新辅助化疗对预后的影响。结果:术前新辅助化疗无助于提高Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌患者术后生存率,但能延长Ⅲ期患者术后生存时间及改变原有手术方式;正确的选择保乳手术术式在正规
人工智能体会走捷径
图片来源:DeepMind本报讯 称,一种最新研发的计算机程序具有类似哺乳动物一样的寻路能力。该研究同时也为理解人脑的运作提供了更多见解。 神经网络——以人脑为模型的计算机系统——能够执行大量令人惊叹的任务,如物体识别,但是在寻路方面的表现却不尽如人意。人脑的寻路功能依赖于一种名为网格细