labonchip对PCR的一些个人体会

PCR应该是分子生物学的基本,记得刚进实验室时,大家的口头禅就是:今天你P了吗?那怎样才能做好PCR,结合个人体会,我谈谈自己的看法。论坛里高人很多,说得不对的还请多多指教和包含。当然,若能给新人朋友们带去一些帮助,那我本贴的目的就算是达到了。PCR设计的一般套路1) 目的基因或目的基因片段对象是什么?对于原核生物来说,由于不存在外显子和内含子,因此还比较简单,直接从genebank把序列调出来就可以,个人建议以FASTA格式(txt文本方式)保存,这可方便后面的primer或danman等软件调用。而对于真核生物来讲,那你就要注意了。对象如果是DNA基因(即直接从基因组中调出),那你就要从genebank中调DNA序列而不是mRNA基因序列了。如果是做RT-PCR,那就要掉mRNA序列。对于细菌来讲,由于存在种和型的分类,那这是你就要注意了,你到底是想做哪个水平的研究(是属?还是种?还是某某型),根据你的情况,调出相应基因。2......阅读全文

对电子天平测量造成影响的一些环境因素

    使用电子天平的人员应该要知道,电子天平放置的环境太差会影响天平的正常工作,环境因素包括:振动、气流、温度、外部磁场,必须改善上述环境,关闭称量室的防风窗,天平才能正常工作。    关于称量的样品,有些样品存在吸水性、放水性、静电、磁性等特性。使用者要克服上述影响,才能正确称量和微量天平的正确

二手热循环仪PCR仪的一些技术要点详细阐述

      在二手热循环仪PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,二手热循环仪PCR仪时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号

杨振华教授对澳大利亚测量不确定度文件的个人看法

  从我个人看澳大利亚人似乎有些保守, 在ISO 公布15189“医学实验室质量和能力认可准则”前后,仍在2000年决定引用ISO 17025作医学实验室认可的标准,并延缓对“测量不确定度”的要求。随形势发展,改为从2005年7月起,改用ISO 15189认可医学实验室,并明确要评定测量不确定度。值

如何对pcr扩增电泳条带分析

  PCR扩增后一般进行琼脂糖凝胶电泳分析,电泳后一般有以下几种条带:  1、引物带。引物浓度过高或是扩增效率不是特别高时都会有,一般不呈现为细带,为发散状;如果目的扩增产物带和引物带都很亮,可以考虑适当降低引物量。  2、引物二聚体带。比引物跑得慢一点,条带清晰,但如果扩增产物小于100bp时,产

婴儿肠套叠诊治体会

肠套叠是指肠管的一段套入相连肠管的腔内,是引起婴儿急性肠梗阻的常见原因之一。最高峰发病年龄在婴儿4~10个月期间,发病时间是春末夏初腺病毒感染的季节,病因尚不十分明确,一般认为和婴儿添加辅食、肠管蠕动紊乱及肠痉挛有关,很多学者认为肠套叠有一个“引头点”,在肠蠕动时带动肠管套入远端的肠腔中,“引头点”

对管道式德尔塔巴流量计的一些简单介绍

  JD-DTB德尔塔巴流量计是一种插入式流量测量仪表。在管道中插入一根德尔塔巴传感器 , 当流体流过传感器 时 , 在其前部 迎流方向 产生一个高压分布区 , 在其后部产生一个低压分布区。   传感器分别测量流体的全压力 包括静压力和平均速度压力 Pl和静压力 P2。将 P1 和 P2 分别引入

生物实验中PCR技术原理与PCR条件对反应的七大影响

 PCR(Polymerase Chain Reaction):又称聚合酶链式反应,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在模板DNA、因为和脱氧核糖核酸存在下,在耐热DNA聚合酶作用下,经过DNA链热变性、引物退火和引物延伸三个步骤,循环往复,使DNA片段在短时间内迅速扩增。它具有特异、敏感、高产率、

带状疱疹的治疗体会

带状疱疹是由水痘一带状疱疹病毒引起的一种常见的病毒性皮肤病,临床上表现为带状分布成簇的皮疹和神经痛,为临床常见病及多发病[1]。带状疱疹在发疹前、发疹时、疱疹消退后 均可伴有神经痛,统称为带状疱疹相关性疼痛。疼痛在疱疹消退后仍然存在并持续1个月以上,为带状疱疹神痛;疼痛持续3—6个月以上,为

对于“剖宫产”手术技巧的体会

众所周知,“剖宫产术”应该是一个很古老的手术,距今已经是有110余年历史了。随着社会的发展及医学技术、手术器械材料的进步,剖宫产的手术方式也经历了一个逐渐发展的过程,由最初的“古典式剖宫产”到后来的“子宫下段横切口剖宫产”、“腹膜外剖宫产”、“新式剖宫产”等,但不管是哪一种的剖宫产,手术的质量好坏直

安全输血的几点体会

    输血治疗是抢救患者生命的重要手段之一,由于输血存在着一定风险,最大程度保证输血安全是输血管理的重要内容。下面就我院输血工作的特点,谈一谈在临床输血中的几点体会。     1.健全的管理制度是安全输血的前提     首先,围绕《临床输血技术规范》等有关要求,制定了一系列具有操作性的规章制度。这

常用中药治疗肝病的体会

  肝为解毒器官,对肝病患者用药不宜太大剂量,且不宜用太多毒性药,以免加重肝负担。以下药物为本人在治疗肝病中的经验总结,且无危险性和不良后果,爱友可在用药中做以参考。    旱莲草    早年治疗一慢性肝炎病人,阴虚体质,证见乏力,肢体困重,肝区隐痛,尿黄,舌苔微黄腻,给予补气,解毒,清利湿热药

先兆子痫的护理体会

先兆子痫是孕妇在妊娠期出现的一种特发性症状,该症状发病时间比较早,并且会在较短时间内出现病情恶化。所以在对患者进行治疗的同时,重视护理,这样可以在较大程度上降低患者的并发症的发生率,全面改善母婴预后效果。1.一般护理1.1   做好心理护理,患者由于担心胎儿的健康安全,会出现失眠,焦虑,护理人员应当

直肠脱垂的诊治体会

直肠脱垂常见于儿童和老年人,发病缓慢,早期仅在排便时肿物自**脱出,便后自行还纳,随着病情的发展,肿块逐渐增大,需要用手送回,病程长、脱出严重者于咳嗽、喷嚏、大笑时皆可导致肿物脱出。儿童直肠脱垂属于自限性疾病,大多在5岁前自愈,故以保守治疗为主,成人完全性直肠脱垂不能自愈,且进行性加重,可以导致**

大柴胡汤的应用体会

    大柴胡汤    大柴胡汤芩大黄,枳芍半夏枣生姜;    少阳阳明合为病,和解功里效无双。     1、大柴胡汤是天然的胃肠动力药    大柴胡汤类似于西药中的吗丁啉、西沙必利等。我常以本方加减治胆囊炎、胆绞痛、慢性胃炎、反流性食管炎、胃肠功能紊乱等疾病。因胃肠的逆蠕动,症见呕吐。    本方

安全输血的几点体会

安全输血的几点体会:输血治疗是抢救患者生命的重要手段之一,由于输血存在着一定风险,最大程度保证输血安全是输血管理的重要内容。下面就我院输血工作的特点,谈一谈在临床输血中的几点体会。1.健全的管理制度是安全输血的前提首先,围绕《临床输血技术规范》等有关要求,制定了一系列具有操作性的规章制度。这些规章制

钟南山:奥密克戎让世界慢慢体会到中国做法是对的

  当前,由于奥密克戎变异毒株的出现,多国确诊病例数明显增加,这也让我国“外防输入”的压力持续增大。对于疫情形势,钟南山最新发声。  钟南山:奥密克戎让世界慢慢体会到中国做法是对的  由“一带一路”国际科学组织联盟发起的首届大湾区科学论坛11日在广州开幕。中国工程院院士钟南山在论坛上表示,针对奥密克

彩色多普勒超声对诊断流行性腮腺炎的临床应用体会

  资料与方法    2009年7月~2011年7月收治流行性腮腺炎患者100例,女58例,男42例;年龄3~15岁,平均9岁;病程7~15天。100例临床确诊的流行性腮腺炎中,80例有当地流行情况及接触史,90例有轻-重度颈前肿痛及压痛,65例伴发热,75例白细胞计数正常或稍低,淋巴细胞相对增多,

揭秘!为何第三方检测机构对个人检测说“不”?

  关于第三方检测机构为什么不接个人检测的问题,相信很多的个人消费者都遇到了这个问题且有很多疑惑,很多的第三方检测机构在明确告诉个人客户不接的同时也并未给出很明确的理由,所以很多的个人送检客户很困惑“为什么个人检测实验室做不了”?第三方检测机构为什么不接个人检测?  个人检测争议维权居多  一直以来

qRTPCR检测对样品有何要求?

  取材后新鲜组织须于-80℃保存,干冰运输。动物组织>100mg,细胞数>106,植物组织>0.5g、幼嫩组织为宜,预计可以检测4个指标,避免反复冻融。当检测基因数较多时样品量须随之增加。

旦鼎说PCR仪维修对仪器性能的影响

  1、制冷半导体故障   2、温度传感器故障   3、控制板故障   4、电源板故障   5、热盖故障   6、软件故障   7、其他故障   下面针对这些故障的维修对仪器性能的影响做简单介绍   1、制冷半导体故障   由于制冷半导体是半手工生产的,每一片制冷半导体的性能都不一

荧光定量PCR对肠道乳酸杆菌的定量问题

我个人理解是重组质粒应该是将16s rDNA的序列重组到某质粒上,然后根据质粒的量来计算质粒的拷贝数作为标准品,这种标准品有些是有商业化的,并不是你所谓的在基因组中是否是单拷贝,我们实验室的标准品都是这么来的,没有用细菌的基因组DNA做过标准品。

实时荧光定量pcr仪对血友病的检测

  血友病是一组最为常见的遗传性凝血障碍,根据因子缺陷的不同分为甲、乙两型,(Ⅷ、Ⅸ因子缺陷),也有复合型血友病,但不常见。甲型血友病发病率为1/10000,Ⅷ因子基因位于G6PD基因附近,全长186Kb,大范围的基因重排(缺失、插入、重复)导致甲型血友病的病例很少,仅为Ⅷ因子缺陷的5%,大部分病人

甲状腺癌诊治体会

甲状腺癌占全身恶性肿瘤的0.2%~1%,随着生活水平的提高,有逐渐增多的趋势,约80%的甲状腺癌是分化较好的腺癌,早期手术治疗,5年生存率可高达75%以上,这说明甲状腺癌的早期诊断十分重要。 甲状腺癌的诊断主要根据病史、临床表现、针吸细胞学检查和血清中甲状腺球蛋白的测定。如果多年存在的结节迅速增大

染色体制备体会

1、 培养基PH浓度、小牛血清量及培养箱温度的恒定是培养成功关键;  2、秋水仙素适量、适宜的处理时机和时间,是获得良好、足够分裂相的条件。分裂相的多少和染色体形态及带型处理良好与否均受其影响。  3、低渗处理是获得分散良好的分裂相关键步骤,低渗过度或不足都会造成染色体形态不良的结果。在低渗处理时期

绿衣治疗肝病用药体会

  绿衣先生是位不错的中医,学验俱丰,用药独具匠心,笔者拜读其经验论作,受益匪浅,现就个人学习体会与同道共享:    一、肝炎阴虚体质必用旱莲草    早年治疗一慢性肝炎病人,阴虚体质,证见乏力,肢体困重,肝区隐痛,尿黄,舌苔微黄腻,给予补气,解毒,清利湿热药,效果不甚明显,10日后,又出现咽干

李醒民:学术创新是个人主导的个人行为

  在我的记忆和经验里,我们中国人总是迷信群众和群体的力量,搞政治要靠群众运动,搞经济要用人海战术,甚至干什么事情都是一窝蜂上阵。在上世纪50年代,一度男女老少齐动员,倾巢而出打麻雀。在大跃进时期,先是工农商学兵大炼钢铁,后又全民大办农业。到“文化大革命”,更是伟大领袖一挥手,群众运

浅谈小儿喉罩全麻的体会

小儿全麻是临床麻醉工作中比较棘手和比较重视的一个话题。由于很多小儿岁数小,无法配合医生,很多手术都是需要全麻来进行。加上小儿气道和成人有所区别,因此全麻术后拔管不当可导致气管痉挛等并发症。 小儿手术大多用时不长,以往氯胺酮麻醉已经逐渐淘汰,加上氯胺酮苏醒时间较长,气道不好管理,容易出现呼吸道抑制

检验与临床配合沟通的体会

      临床检验是将病人的血液、体液、分泌物、排泄物和脱落细胞等标本,通过目测观察、物理、化学、仪器或分子生物学方法检测。在检测的全过程中(分析前、分析中、分析后)要采取严密的质量管理措施,以适应临床需要。为病人提供有价值的实验资料。临床医师根据检验结果,结合所收集的详细完整的病史,进行系统

浅谈甲状腺功能亢进的护理体会

甲状腺功能亢进症(简称甲亢)是指血液循环中甲状腺激素过多,引起以神经,循环,消化等系统兴奋性增高和代谢亢进为主要表现的一组临床综合征。由于本病治疗时间长,且病人情绪激动及感染均可诱发本病,故在治疗的同时要做好各项护理工作,对本病的康复十分关键,现总结如下: 1.基础护理1.1环境保持病室安

尿液分析仪的应用体会

  尿常规检测是临床检验基本项目之一,随着先进医疗设备在医学领域的使用,尿分析仪是尿液检验形成自动化,这对临床有关疾病的诊断、治疗、疗效观察有重要意义。但尿分析仪检测与镜检法检测存在一定差异,现单就白细胞数测定对比分析如下:   1 资料与方法    1.1 临床资料 选择门诊、住院的1400例患者