食品中淀粉的测定——酶水解法

一、目的与要求:1、明确与掌握各类食品中淀粉含量的原理及测定方法。2、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方法。二、原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。三,试剂:1、0.5%淀粉酶溶液:称取淀粉酶0.5克,加100毫升水溶解,数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。2、碘溶液:称取3.6克碘化钾溶于20毫升水中,加入1.3克碘,溶解后加水稀释至100毫升。3、乙醚4、85%乙醇5、6N盐酸:量取50毫升盐酸加水稀释至100毫升。6、甲基红指示液:0.1%乙醇溶液。7、20%氢氧化钠溶液。8、碱性酒石酸铜甲液:称取34.639克硫酸铜(CuS04·5H2O)。加适量水溶解,加0.5毫升硫酸,再加水稀释至500毫升,用精制石棉过滤。9、碱性酒石酸铜乙液:称取173克酒石酸钾钠与50克氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500毫升,用精制石棉过滤,贮存于橡......阅读全文

淀粉酶活性的测定实验

实验方法原理:α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测

淀粉酶活性的测定实验

  实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加

淀粉酶活性的测定实验

实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测定

酶解法测定DNA物理图谱的基本步骤

用部分酶解法测定DNA物理图谱包括二个基本步骤:⑴完全降解选择合适的限制性内切酶将待测DNA链(已经标记放射性同位素)完全降解,降解产物经凝胶电泳分离后进行自显影,获得的图谱即为组成该DNA链的酶切片段的数目和大小。⑵部分降解以末端标记使待测DNA的一条链带上示踪同位素,然后用上述相同酶部分降解该D

碘_淀粉比色法测定淀粉酶的原理

碘-淀粉比色法测定唾液淀粉酶一 实验目的1、 掌握比色法测定a-淀粉酶的原理;2、 掌握分光光度计的正确使用方法;二 实验原理1、比色法作为一种定量分析的方法,是以生成有色化合物的显色反应为基础,通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。常用的比色法有两种:目视比色法和光电比色法,

淀粉葡糖苷酶的测定

实验方法原理 4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶,葡聚糖 1,4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1,4- 和 1,6 连接的 α-1,6-葡糖苷键释放 β-D-葡萄糖。这个实验与 α-葡糖苷酶类似,只是用糖原代替麦芽糖作为底物。一段时间以后(5 min)反应停止,葡萄糖被测出与己糖激酶/6-磷酸葡糖脱氢酶偶

淀粉酶测定的意义生化检验

淀粉酶测定的意义:淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,可通过肾小球滤过。1.升高:(1)急性胰腺炎:血和尿中的AMY显著增高。发病后8~12h血清AMY开始增高,12~24h达高峰,2~5天下降至正常。尿AMY约于发病后12~24h开始升高,下降比血清AMS慢,因此,在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。

淀粉酶的测定方法有哪些

淀粉被淀粉水解,切断淀粉链的α-1,4糖苷键,对碘呈蓝紫色的反应消失,这种呈色消逝的速度可以表示水解的程度,因而能衡量酶的活力。操作方法1、取试管1支,加20毫升2%淀粉,混匀,在30℃水浴中,使管内温度达到30℃。2、将淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉液中,混匀,在30℃水浴中保温,自加入记时,经

淀粉酶(AMY)测定参考值

碘-淀粉比色法:血清80~180U/L;尿液100~1200U/L。对-硝基苯麦芽七糖苷法:血清淀粉酶:220U/L(37℃)。尿淀粉酶:1200U/L(37℃)。不同的方法血和尿淀粉酶测定值无可比性。各实验室应针对本实验室选定的方法制定参考值。

淀粉酶的测定方法有哪些

淀粉被淀粉水解,切断淀粉链的α-1,4糖苷键,对碘呈蓝紫色的反应消失,这种呈色消逝的速度可以表示水解的程度,因而能衡量酶的活力。操作方法1、取试管1支,加20毫升2%淀粉,混匀,在30℃水浴中,使管内温度达到30℃。2、将淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉液中,混匀,在30℃水浴中保温,自加入记时,经

淀粉酶测定的意义生化检验

淀粉酶测定的意义: 淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,可通过肾小球滤过。 1.升高: (1)急性胰腺炎:血和尿中的AMY显著增高。发病后8~12h血清AMY开始增高,12~24h达高峰,2~5天下降至正常。尿AMY约于发病后12~24h开始升高,下降比血清AMS慢,因此,在急性胰腺炎后期测定尿AMY更

淀粉酶(AMY)测定临床意义

淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,可通过肾小球滤过。升高:(1)急性胰腺炎:血和尿中的AMY显著增高。发病后8-12h血清AMY开始增高,12~24h达高峰,2~5天下降至正常。尿AMY约于发病后12~24h开始升高,下降比血清AMY慢,在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。碘-淀粉比色法结果如超过50

淀粉酶测定的方法是什么

淀粉被淀粉水解,切断淀粉链的α-1,4糖苷键,对碘呈蓝紫色的反应消失,这种呈色消逝的速度可以表示水解的程度,因而能衡量酶的活力。操作方法1、取试管1支,加20毫升2%淀粉,混匀,在30℃水浴中,使管内温度达到30℃。2、将淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉液中,混匀,在30℃水浴中保温,自加入记时,经

固定化α淀粉酶及活性测定

一、实验目的和原理目的:学会交联法制备固定化酶的操作技术内容:制备固定化酶的方法很多,利用双功能试剂或多功能试剂在酶分子间,酶分子与惰性蛋白间,或酶分子与载体间进行交联反应,以共价键制备固定化酶的方法称为交联法,本实验即采用这种方法。交联剂为戊二醛,载体为甲壳素。 二、实验器材 1.恒

酶水解法的原理

  酶水解法又称酶消化法,它是在-记pH值及常温条 件下,用不同的酶使生物检材如组织、血液中呈结合状态的毒物解离和释放出来的过 程。由于一些毒物进入体内后与血液或组织 中的蛋白质等结合成为紧密的结合态,无法用有机溶剂直接提取到游离态的毒物,只有先采用一定方式促使结合态的毒物解离出来 后再用有机溶剂提

果胶的制备酶解法

由于果胶分子与钙镁及铁离子结合、纤维素和半纤维素等细胞壁多糖与果胶分子形成共价键、果胶分子中的羟基与细胞壁的组分形成离子键、果胶分子彼此间与其他成分间的物理缠绕等等,而使果胶以原果胶的形式存在,用酶适当处理后,由于细胞壁降解,可提高果胶得率、简化工艺。酶法提取果胶基本分两个阶段,如果用酸法提取少量果

细胞破碎方法酶解法

  利用酶反应,分解破坏细胞壁上特殊的键,从而达到破壁的目的。优点:专一性强,发生酶解的条件温和,缺点:酶水解费用较贵,一般只适用于小规模的实验室研究。溶菌酶是应用最多的酶,它能专一地分解细胞壁上糖蛋白分子的α-1,4糖苷键,使脂多糖解离,经溶菌酶处理后的细胞移至低渗溶液中使细胞破裂。

β淀粉酶与α淀粉酶的区别

β-淀粉酶与α-淀粉酶的不同点在于从非还原性末端逐次以麦芽糖为单位切断α-1,4-葡聚糖链。主要见于高等植物中(大麦、小麦、甘薯、大豆等),但也有报告在细菌、牛乳、霉菌中存在。对于象直链淀粉那样没有分支的底物能完全分解得到麦芽糖和少量的葡萄糖。作用于支链淀粉或葡聚糖的时候,切断至α-1,6-键的前面

血清淀粉酶测定的临床意义

  (1)高淀粉酶血症:  ①胰腺型淀粉酶增加:  A、胰腺疾病:急性胰腺炎、慢性胰腺炎急性发作、胰腺囊肿、胰腺癌、胃十二指肠等疾病。  B、药物:促胰腺激素、 肠促胰腺肽、缩胆囊素、 药物性胰腺炎、噻嗪类、类固醇等、  C、胰液从消化道漏出、吸收,消化道穿孔、肠管坏死、腹膜炎、穿通性溃疡等。  D

淀粉葡糖苷酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶,葡聚糖 1,4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1,4- 和 1,6 连接的 α-1,6-葡糖苷键释放 β-

淀粉酶(AMY)测定的临床意义

淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,可通过肾小球滤过。升高:(1)急性胰腺炎:血和尿中的AMY显著增高。发病后8-12h血清AMY开始增高,12~24h达高峰,2~5天下降至正常。尿AMY约于发病后12~24h开始升高,下降比血清AMY慢,在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。碘-淀粉比色法结果如超过50

淀粉酶(AMY)测定的临床意义

  淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,可通过肾小球滤过。  升高:  (1)急性胰腺炎:血和尿中的AMY显著增高。发病后8-12h血清AMY开始增高,12~24h达高峰,2~5天下降至正常。  尿AMY约于发病后12~24h开始升高,下降比血清AMY慢,在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。  碘-淀粉

淀粉葡糖苷酶的测定实验

实验方法原理4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶,葡聚糖 1,4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1,4- 和 1,6 连接的 α-1,6-葡糖苷键释放 β-D-葡萄糖。这个实验与 α-葡糖苷酶类似,只是用糖原代替麦芽糖作为底物。一段时间以后(5 min)反应停止,葡萄糖被测出与己糖激酶/6-磷酸葡糖脱氢酶偶联

α淀粉酶和β淀粉酶之间的异同

 α-淀粉酶:  ✤ 是一种内切葡糖苷酶,随机作用于淀粉链内部的α-1,4糖苷键。  ✤ 降解直链淀粉产物是葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖。  ✤ 降解支链淀粉产物是葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖和α-极限糊精。 β-淀粉酶:  ✤ 是一种外切葡糖苷酶,从淀粉的非还原端切开α-1,4糖苷键,逐个除去二糖单位,原

α淀粉酶和β淀粉酶之间的差异

α-淀粉酶和β-淀粉酶的异同点对比:相同点:都作用于α-1,4糖苷键,产物都是麦芽糖不同点:α-淀粉酶 β-淀粉酶1 可跨越分枝点 不能跨越分枝点2 内切酶(随机切) 端解酶(非还原端两两相切)3 产物糊精分子量小 糊精分子量大(极限糊精)4 耐高温、不耐酸 耐酸、不耐高温5 存在于萌发种子中 广乏

降落值测定仪对淀粉酶活性的测定

  淀粉酶存在在大部分的植物中,几乎是所有的植物都含有α-淀粉酶及β-淀粉酶,这些淀粉酶能够将淀粉水解成麦芽糖。活性因植物生长发育时期的不同而有变化。同时在贮藏过程中随着贮藏的时间增加,面粉发生变化的时候,里面的酶的活性也会发生变化。通常会通过检验里面酶的活力而来得出在贮藏过程中发生的变化。在实验室

血、尿淀粉酶测定的临床意义

  临床意义  淀粉酶(AMS)活性增高见于以下几种情况:  (1)急性胰腺炎  发病后6~12小时血清AMS开始增高,12~24小时达高峰,3~5天后恢复正常。如达3500U/L应怀疑此病,超过5000U/L即有诊断价值。尿AMS于发病后12~24小时开始增高,此时由于肾脏对AMS的清除率大为增强

淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验

实验方法原理大麦(或小麦)种子萌发时,种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞(被称为GA3反应的“靶细胞”),刺激其合成或激活α-淀粉酶,然后进入胚乳,使贮藏的淀粉被水解为还原酶,因此,无胚种子不能释放GA3,也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用,从而诱导α-淀粉酶的合成。在一

淀粉酶(AMY)测定方法与参考值

淀粉酶作用于淀粉的α-1,4糖苷键,Cl-是该酶的激活剂。1.方法(1)碘-淀粉比色法测定。(2)对-硝基苯麦芽七糖苷法。PNP(对硝基苯酚)的生成引起405nm处吸光度的上升,上升速率与AMY的活力成正比。(3)2-氯-4-硝基苯麦芽三糖苷法。2.生理变异成年人血中AMY与性别、年龄、进食关系不大

可溶性淀粉合成酶的测定原理!

可溶性淀粉合成酶的测定原理!SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。检测原理:SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化N