DNA扩增标准化操作规范
1 目的:DNA 扩增标准化操作规范适用于HLA试验中的DNA 扩增操作。2 适用范围:DNA 基因分型实验室。3 依据:DNA 扩增标准化操作规范4 引用文件:德国BAG公司(以下简称BAG)《Instructions for use Instructions for use HISTO TYPE/DNA -ABDR 384》5 程序5.1 试剂准备5.1.1 BAG® 384 试剂包,包括扩增板、Buffer、读板纸、说明书5.1.2 灭菌蒸馏水5.1.3 Taq酶5.2 仪器及用具准备5.2.1 移液器规格:1-10μl ,20-200μl ,200-1000μl5.2.2 电动连续加样器5.2.3 移液器配套吸头,要求灭菌5.2.4 离心管:1.5ml,要求灭菌5.2.5 水平式离心机5.2.6 配套384板的DNA 扩增仪5.2.7 石腊油、平皿5.2.8 中性记号笔5......阅读全文
临床基因扩增检验实验室工作规范(三)
(七)污染 在实际工作中,常见有以下几种污染类型:扩增片段的污染(产物污染);天然基因组DNA的污染、试剂污染(贮存液或工作液)以及标本间交叉污染(如气溶胶从一个阳性标本扩散到原本阴性的标本)。临床基因扩增检验实验室中污染的最主要来源是扩增产物的污染。由于一旦发生污染后,再围绕实验室来寻找污染源不仅
临床基因扩增检验实验室工作规范(二)
(四)扩增产物分析区下述操作在本区内进行:扩增片段的测定。核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法,即PC
临床基因扩增检验实验室工作规范(一)
为使基因扩增检验技术有效地应用于临床,更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务,保证检验质量,特制定本规范。一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。为
临床基因扩增检验实验室工作规范(三)
(七)污染 在实际工作中,常见有以下几种污染类型:扩增片段的污染(产物污染);天然基因组DNA的污染、试剂污染(贮存液或工作液)以及标本间交叉污染(如气溶胶从一个阳性标本扩散到原本阴性的标本)。临床基因扩增检验实验室中污染的最主要来源是扩增产物的污染。由于一旦发生污染后,再围绕实验室来寻找污染源不仅
PCR扩增样本DNA的HLA基因片段
一、PCR扩增体系1. 1.0uM 引物2. 300ng待测样本基因组DNA3. 2.0U Taq多聚酶4. 200uM 各种dNTP5. 用1 X PCR缓冲液(10mM Tris-HCl,pH8.3,50mM KCl,1.5mM MgCl2,0.01%明胶)调至总体积100ul,并用50ul矿物
DNA扩增多态性的功能
中文名称DNA扩增多态性英文名称DNA amplification polymorphism定 义不同种属或个体间的DNA序列不完全相同,设计恰当的探针,以聚合酶链反应(PCR)扩增样品中的DNA,会得出不同长度的PCR产物,进一步用限制性内切酶消化PCR产物,经电泳分离可得出具有不同长短DNA片
DNA的PCR扩增及Southem-blot分析
DNA存在于细胞核和线粒体内.携带遗传信息,决定着细胞和个体的遗传性状。细胞DNA的检测有助于了解DNA的特征,如复制、表达以及变异情况等,从而在分子水平研究细胞的生物学特征,细胞的DNA检测主要包括DNA的提取及检测。检测方法有多种,如PCR、限制性片段长度多态性(restriction
关于阿米巴菌的DNA扩增的介绍
这是近十年来发展很快而且十分有效、敏感、特异的方法。主要提取脓液穿刺液或粪便培养物、活检的肠组织、皮肤溃疡分泌物、脓血便甚至成形便的DNA,而后以适当的引物,进行扩增反应。对反应产物进行电泳分析,可以区别溶组织内阿米巴和其他阿米巴原虫。引物种类很多,各有所长,但原则上是选择具有高丰度的基因,可以
RAPD(randomly-amplifiled-polymorphic-DNA,随机扩增的多态性DNA
一、 原理运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体
酸碱滴定规范操作
酸管碱管莫混用,视线刻度要齐平。 尖嘴充液无气泡,液面不要高于零。 莫忘添加指示剂,开始读数要记清。 左手轻轻旋开关,右手摇动锥形瓶。 眼睛紧盯待测液,颜色一变立即停。 数据记录要及时,重复滴定求平均。 误差判断看V(标),规范操作靠多练。
外科技能操作规范
代住院医师及低年资住院医师——外科技能操作规范刷手操作规范刷手的目的是去除手和手臂皮肤上的暂存菌及部分常存菌,防止术后感染。最基本的方法为肥皂刷洗酒精浸泡法。1、刷手步骤: 第一步主要是刷洗,先用肥皂做一般清洗手臂,可初步除去油垢皮脂,继用无菌毛刷蘸上消毒肥皂液,刷洗手及前臂、流水冲净,如
内科医疗技术操作规范
胸腔穿刺术 一、物品准备 治疗车及相关物品: 1.胸腔积液:治疗盘盛无菌手套、胸腔穿刺包一个(包括:12或16号胸腔穿刺针1个、消毒盘1个、小镊子、血管钳1个、10ml注射器1个,50ml注射器一个、纱布、孔巾和换药碗、无菌试管数只)。1%普鲁卡因 4——6ml. 2
土壤收缩仪操作规范
土壤收缩仪操作规范1、参照水电部土工试验规程SD128-012-84,制备样,或参照JTJ051--93《公路土工试验规程》T013-932、把渗水石,密封圈放入底座中,将套筒内壁涂一层凡士林,放入土样环刀,刮净多余凡士林置于底座上。3、放上密封圈,透水石,上盖,旋紧螺杆,不得漏水漏气。4、把进水管
微量移液器规范操作流程
1. 微量移液器的选择:根据需求选择相应的微量移液器。通常情况下选择35%~100%范围进行操作,选择这个量程对操作者的操作技巧依赖较少,同时可保证移液的准确性和精度 。2. 量程的调节:遵循由大到小原则,当由大量程调至小量程时,通过调节按钮迅速调至需要量程,在接近理想值时,将微量移液器横放调至预
色差仪的规范操作
只有正确规范的操作才能保证色差仪的使用寿命,同时得到更为可靠的色彩数据,所以工业上色彩测量师们也总结出一些色差仪的使用的规范和操作流程,这可以帮助很多刚刚开始使用颜色检测仪器的用户提早预防一些不必要的错误和失误,增加色差仪的使用效率降低损失。 在色差仪的使用和维护方面我们要注意,仪器测量时一定是
振动台操作规范
振动台操作规范 80型混凝土振动台安装使用与维修1、振动台安装前,应先打好基础,打基础时上平面要按水平找并按底梁螺栓孔埋好固定螺栓,然后安装,安装时固定螺栓必须拧紧。2、振动台安装完毕试车前,先开车3—5分钟后停车,对所有紧固螺栓进行检查,若松动须拧紧后方可使用。3、振动台布振实过程中,混凝土制品应
微量移液器规范操作流程
1. 微量移液器的选择:根据需求选择相应的微量移液器。通常情况下选择35%~100%范围进行操作,选择这个量程对操作者的操作技巧依赖较少,同时可保证移液的准确性和精度 。2. 量程的调节:遵循由大到小原则,当由大量程调至小量程时,通过调节按钮迅速调至需要量程,在接近理想值时,将微量移液器横放调至
尿培养的操作规范
尿路感染是指尿道内有大显微生物繁殖而引起的尿路炎症。感染并非是一种单一的疾病,而是一种临床综合症。根据感染可分为上尿路感染(如肾孟肾炎)及下尿路感染,男性还可出现前列腺感染,不同部位同及时感染也很常见。尿路感染是人类最常见的感染之一,可发生于各个年龄段的人群,好发于女性,男:女之比为1:10。典型的
POCT仪器操作中移液器的操作规范
吸液的操作:1、连接恰当的吸嘴;2、按下控制钮至第一档;3、将移液器吸嘴垂直进入液面下1-6mm(视移液器容量大小而定); 0.1-10ul容量的移液器进入液面下1-2mm 2-200ul容量的移液器进入液面下 2-3mm 1-5ml容量的移液器进入液面下 3-6mm 注
分析体内DNA复制和体外PCR扩增DNA有何异同点
一、相同点1、体内DNA复制和体外PCR扩增DNA都是DNA的复制过程。2、体内DNA复制和体外PCR扩增DNA都需要酶促合合成过程。二、不同点1、条件不同体内DNA复制:以DNA双链、细胞分裂环境为条件。体外PCR扩增DNA:以模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件。2、过程不同体内DNA复制
分析体内DNA复制和体外PCR扩增DNA有何异同点
相同点: 都是半保留复制,都会经历DNA双链的解开(变性),寡聚核酸与单链DNA的结合(退火),以及DNA聚合酶开始合成DNA(延伸)的三个过程。不同点:1、连续性不同体内DNA复制半不连续复制,体外PCR连续复制,不会产生冈崎片断。2、酶不同PCR技术形成DNA时用耐热DNA聚合酶,而DNA复制用
PCR扩增仪操作过程
PCR用于扩增一小段已知的DNA片断,可能是单个基因,或者仅仅是某个基因的一部分。与活体生物不同的是,PCR只能复制很短的DNA片断,通常不超过10kbp。DNA是双链分子,因此用互补DNA双链的构造单位(核苷酸)来度量其大小,单位为碱基对(base pair, bp)。某些特定的方法可以扩
pcr技术扩增dna需要的条件是什么
Pcr 技术扩增DNA 需要的条件是:DNA模板链,脱氧核苷酸原料, TaqDNA的聚合酶,引物等。
如何分析DNA经PCR扩增后的图谱
首先得需要确定你的目的扩增片段的大小,然后根据marker指示位置确认
基因组DNA提取与PCR扩增技术
一、基因组DNA提取实验目的基因组DNA的制备是基因分析的前提。 本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方法。实验原理 DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子键、氢键、范德华力等,破坏或降低这些结合力就可把核酸与蛋白分开。 DNA、RNA所含有的嘌呤环和嘧啶
pcr技术扩增dna需要的条件是什么
Pcr 技术扩增DNA 需要的条件是:DNA模板链,脱氧核苷酸原料, TaqDNA的聚合酶,引物等。
随机扩增多态性DNA的简介
随机扩增多态 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美国学者Williams和Welsh于1990年首先提出的该技术是通过分析DNA的PCR产物的多态性来推测生物体内基因排布与外在性状表现的规律的技术。RAPD技术是以8-lObp的随机寡
随机扩增多态性DNA技术特点
(1)不需要了解研究对象基因组的任何序列,只需很少纯度不高的模板,就可以检测出大量的信息。(2)无需专门设计RAW)反应引物,随机设计长度为8-10个碱基的核苷酸序列就可应用。(3)操作简便,不涉及分子杂交、放射自显影等技术。(4)需要很少的DNA样本。 (5)不受环境、发育、数量性状遗传等的影
随机扩增多态性DNA技术简介
随机扩增多态 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美国学者Williams和Welsh于1990年首先提出的该技术是通过分析DNA的PCR产物的多态性来推测生物体内基因排布与外在性状表现的规律的技术。RAPD技术是以8-lObp的随机寡核苷
淋雨试验箱操作规范
首先接通电源,再打开电源开关,电源灯亮;则表示控制器会自动进入定值停止界面;1、打开电源后当机台设定的控制程序运行完毕时,机台会停止运行;2、当设定的控制程序运行完毕时,机台会停止运行;3、打开箱门把手,把测试试样放到样品架上;然后关上箱门;注意:摆放试样的容量不可超过测试区容量之2/3;4、按照“