PolymeraseChainReaction(PCR)toAmplifyrRNAGeneFragment
Polymerase Chain Reaction (PCR) to Amplify rRNA Gene FragmentPrepare sufficient master mix for both partners (45 mL/50 mL reaction)10 mL 10x PCR buffer10 mL 2.5 mM dNTPs (0.25 mM final concentration)15 mL Primer A (5 pmole/mL)15 mL Primer B (5 pmole/mL)40 mL H2 O0.4 mL TaKaRa Ex-Taq DNA Polymerase (2 units)( Panvera )90 mLAliquot 45 mL of master mix into each of two 0.5 mL microfuge tube......阅读全文
PCR反应原理及应用
PCR技术又称聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction）技术，是一种在体外（试管、切片…）扩增核酸的技术。该技术模拟体内天然DNA的复制过程。其基本原理是在模板、引物、4种dNTP和赖热DNA聚合酶存在的条件下，特异扩增位于两段已知序列之间的DNA区段的酶促合成反应。每一循环
PCR反应过程示意图
聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外酶促合成特异 DNA片段的一种方法，为最常用的分子生物学技术之一。典型的 PCR 由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要
PCR反应过程示意图
聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）是体外酶促合成特异 DNA片段的一种方法,为最常用的分子生物学技术之一.典型的 PCR 由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增.其主要
沉淀反应技术(Precipitation－reaction－technique)
一、 概述 可溶性抗原（如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等）与其相应的抗体相遇后，在电解质参与下，抗原抗体结合形成白色絮状沉淀，出现白色沉淀线，此种现象称为沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原（precipitinogen）,与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀
A－Method－for－Structure2
CD SpectroscopyCD spectra for peptides and reference solutions were recorded at 298 K on a Jasco J-920 CD spectrometer with a 1-mm quartz cuvette. Spe
Transposonmediated－Mutagenesis
Transposon-mediated MutagenesisStep 1 - Amplify ORF from MG16551.0 ul genomic DNA (30ng/ul)5.0 ul gene specific primer mix4.0
PCR佐剂手册
A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the yield, specificity and consistency of PCR reactions. Whilst these addit
基因转型(gene－transformation)
目的带有特定基因的质体在分子生物研究上，是一个很重要的工具，将质体送入细菌的过程称为基因转形，经由基因转型可使质体在细菌中大量复制，以备进一步研究。本实验将把你在前面转殖实验中cDNA和质体DNA的连结反应送入细菌。 你将从本实验学习如何进行基因转型作用。原理早在1970年左右，有人发现细菌经由冰冷
Use－of－the－GUS－Reporter－Gene
One of the most important considerations in the expression of heterologous proteins in plants is the choice of promoter. The study of promoter act
Gene－Structure－Annotation－at－PlantGDB
The accurate identification of exons and introns that comprise a complete plant gene structure can be a time-consuming and challenging task. Novel
PCR
实验概要protocal for PCR实验步骤PCR 1) Add the following to a microfuge tube: 10 ul reaction buffer 1 ul 15 uM forward primer 1 ul 15 uM
实验室PCR扩增仪的原理和应用
PCR：PCR（聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。PCR仪实际就是一个温控设
关于实验仪器PCR板的介绍
PCR板是一种在聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中主要作为参与扩增反应的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、缓冲液等的承载物。 PCR板材质 其本身材质在当今主要以聚丙烯（PP）为主，能更好适应PCR反应过程中反复高低温设定，并
什么是pcr三个复孔
PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的缩写，它是一种用来扩增及检测DNA片段的技术。"PCR三个复孔"通常指PCR反应中一个样本所需的三个反应器，并且每个反应器都包含PCR反应所需的所有试剂。这三个反应器分别是：1. 样品反应器（Sample well）：样品
什么是pcr三个复孔
PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的缩写，它是一种用来扩增及检测DNA片段的技术。"PCR三个复孔"通常指PCR反应中一个样本所需的三个反应器，并且每个反应器都包含PCR反应所需的所有试剂。这三个反应器分别是：1. 样品反应器（Sample well）：样品
COL15A1基因突变与药物因子介绍
这个基因编码XV型胶原的α链，它是FACIT胶原家族的一员（与纤维相关的具有间断螺旋的胶原）xv型胶原具有广泛的组织分布，但最强的表达定位于基底膜区，因此它可能起到将基底膜粘附到下层结缔组织基质的作用。蛋白水解产生的xv型胶原c末端片段是restin，一种潜在的抗血管生成蛋白，与内皮抑素密切相关。小
COL15A1基因编码功能及结构描述
这个基因编码XV型胶原的α链，它是FACIT胶原家族的一员（与纤维相关的具有间断螺旋的胶原）xv型胶原具有广泛的组织分布，但最强的表达定位于基底膜区，因此它可能起到将基底膜粘附到下层结缔组织基质的作用。蛋白水解产生的xv型胶原c末端片段是restin，一种潜在的抗血管生成蛋白，与内皮抑素密切相关。小
Fluidigm公司微液流芯片在单细胞研究中的应用（二）
It was also worth it for Tannishtha Reya, who studies stem cell fate and cancer at Duke University Medical Center in Durham, North Carolina. "Im
Quantitative－PCR
实验概要Quantitative PCR involves co-amplification of two templates: a constant amount of a preparation containing the desired target sequence and var
HLA分型技术（一）
HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标，免疫遗传学研究的发展，很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。60年代建立的并不断完善的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性；80年代起建立的DNA分型方法则侧重于基因的分型。 一、血清学分型技术 （一)HLA-Ⅰ类抗原
基因诊断的方法有哪几种
基因诊断（gene diagnosis）是以探测基因的存在，分析基因的类型和缺陷及其表达功能是否正常，从而达到诊断疾病的一种方法。它是继形态学、生物化学和免疫学诊断之后的第四代诊断技术，它的诞生与发展得益于分子生物学理论和技术的迅速发展。 常用基因诊断技术： 一、Southern印迹法（Sout
RTPCR的原理是什么
原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。RT- PCR（Re
RTPCR的原理
原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。RT- PCR（Re
PCR（聚合酶链式反应）的反应原理
【原理】 PCR（polymerase chain reaction）用于在体外将微量的目标DNA大量扩增，以便进行分析。反应体系：①样品DNA；②引物（primer），是人工合成的一对寡核苷酸链（约15-20个核苷酸），用于扩增夹在双引物与模板DNA互补区之间的区域；③4种dNTP；④Tag
实时荧光定量PCR检测系统的介绍
实时荧光定量PCR检测系统也叫实时荧光定量核酸扩增检测系统（英文全名是Real-time Quantitative PCR Detection System）,简称实时荧光qPCR,qPCR的核心是实时荧光定量PCR仪及与其配套的检测分析软件系统。聚合酶链式反应（Polymerase Chain
一文了解荧光PCR通量
自从1983年K. Mullis发明聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction，PCR)以来，PCR技术很快成为科研、临床诊断的热点技术。 而实时荧光定量PCR技术，顾名思义，就是在PCR的基础上加入荧光基团，通过荧光信号的变化的实时监测PCR的反应过程，最后通过对未知
PCR－Primer－Design（二）
Terminal Nucleotides Make a Difference Both the terminals of the primer are of vital importance for a successful amplification. The 3'-end
Sitedirected－Mutagenesis－using－PCR
Site-directed Mutagenesis using PCRMichael P. Weiner, Tim Gackstetter, Gina L. Costa, John C. Bauer, and Keith A. KretzFrom: Molecular Biology: Curren
IL2－Receptor－Beta－Chain－in－T－cell－Activation
The IL-2 receptor is a key component of immune signaling and is required for the activation, proliferation, and survival of T cells. This receptor is
A－simple,－rapid－procedure－for－the－isolation－of－DNA－for－PCR
The polymerase chain reaction (PCR) is a method for amplifying specific segments of DNA defined by the small primers used to start the reaction. Using