OverlapPCR（重叠PCR）的基本原理
Overlap PCR（重叠PCR）重叠PCR的应用是非常广泛的，他的原理其实很简单：比如说有两个基因或者说一个启动子和一个基因，你要将他们连接到一 起，我们首先想到的方法当然是借助于酶切的方法，但有时我们并不一定能构找到合适的酶切位点，或者说我们找到了酶切位点，但这种酶非常特殊或者又很贵，我 们可能只用一次，这样购买酶就变成了一种浪费，难道没有别的办法了吗？当然有，那就是重组PCR技术。举个例子可能更容易说明。比如两个基因，一个命名 为A，一个命名为B。A的序列为5- atgcatgctagctagaacgctacgctgactaccccctgatc-3B的序列为5- atgctagtagctagccccccccaggggataattttttaaaacg-3首先我们要设计引物，假设引物的序列为：A1:5-ATGCATGCTAGCTAGAACGCT-3A2:5-ggggggctagctactagcatgatcagggg......阅读全文
Realtime－PCR
实验概要The exponential amplification via reverse transcription polymerase chain reaction provides for a highly sensitive technique in which a very low
重叠延伸PCR
基本方案 实验方法原理 重叠延伸PCR技术（gene splicing by overlap extension PCR，简称SOE PCR）由于采用具有
揭示COVID19影像学特征与SARS和MERS存在显著重叠
冠状病毒可引起多种动物的多系统感染。迄今为止，已有三种冠状病毒可在人类中引起严重的呼吸道感染：严重急性呼吸道综合征（SARS）冠状病毒（SARS-CoV）、中东呼吸综合征（MERS）冠状病毒（MERS-CoV）和新型冠状病毒SARS-CoV-2（之前称为2019-nCoV）。SARS-CoV-2
研究揭示人类创造力遗传基础新进展
创造力是人类特有的一项重要特质，一般被描述为“发现新问题，产生新想法、视角，以及发明创造，从而传达或解决问题的能力”，是人类文明进步的重要推动因素。虽然创造力被认为与智力等特质有关，但研究表明，与智力相比，创造力在人类进化史中的形成时期更晚，大约在60000到30000年前的旧石器时代晚期，可能
北京生科院提出环形RNA全长转录本重建和定量新方法
国际学术期刊Genome Medicine 在线发表了中国科学院北京生命科学研究院计算基因组学实验室赵方庆团队题为Reconstruction of full-length circular RNAs enables isoform-level quantification 的最新研究成果。该研
昆明植物所醉鱼草属植物的自然杂交与渐渗研究取得进展
醉鱼草属植物在全世界约有104种，是观赏价值极高的一个属。我国有23个种，5个变种，主要分布于东喜马拉雅-横断山区域，该区域被认为是醉鱼草属植物的分布和多样性中心。自然杂交一直被认为是东喜马拉雅-横断山区物种多样性形成的一个重要途径，该属同样如此。尽管分类学家基于形态，推测了自然杂交在醉鱼草属植
ICPMS各部分功能和原理——质量分析器
质量分析器是不同种类的质谱仪的主要区别之处，四极杆分析器是一种成熟的质量分析仪器，利用了四极杆对不同核质比的元素离子的筛选作用，达到顺序分析离子质量的目的。 四极杆的主要原理如下图所示： 四极杆的两对电极，分别加上了正负直流电压和相位差为180度的射频信号，离子在四极杆中旋转、振荡，当合理设置直流电
PNAS：果蝇体内一关键蛋白，或可延长20％的寿命
图片来源：网络 在最新一期的《PNAS》期刊上，来自于布朗大学的科学家们最新发现，果蝇体内Sirt4蛋白的表达受到抑制时，会导致其寿命缩短。相反，一旦上调Sirt4蛋白，则可以延长果蝇的寿命。 更重要的是，缺乏Sirt4蛋白会增加果蝇对饥饿的敏感性、降低其生育和活动能力，以及无法调用身体内存储的
Combined－Flow－Cytometric－Measurement－of－Two－CellSurface－Antigens
INTRODUCTIONFlow cytometry is frequently used to assess nucleic acid content in individual cells. Based on DNA content alone, however, cells in the qu
重叠延伸PCR
重叠延伸PCR技术主要用于获得其它依靠限制性内切酶消化方法难以得到的产物。可用于：（1）基因的定点突变；（2）融合基因的构建；（3）长片段基因的合成；（4）基因敲除以及目的基因的扩增实验方法原理重叠延伸PCR技术（gene splicing by overlap extension PCR，简称SO
DAPI染DNA的原理及使用方法
DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式为C16 H15 N5 ·2C3 H6 O3 ，分子量457.48。DAPI 是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处，一个DAPI分子
Application－Note:－Qdot®－Nanocrystal－Conjugates－in－Flow－Cytometry
实验概要Researchers today are trying to maximize the information that they get out of flow cytometry experiments by looking at more parameters in a sing
心理所研究揭示不同认知控制过程的时程和频谱特性
认知控制(执行控制)是指个体在目标导向的行为(goal-oriented behavior)中，目的性地对其他认知过程(如知觉、注意、工作记忆等)进行自上而下调控的过程。具体而言，认知控制涉及到对信息加工流程的计划、控制和调节。一方面认知控制涉及到对多种基础认知过程的调控，另一方面它又指向与
DAPI染DNA的原理及使用方法
DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式为C16 H15 N5 ·2C3 H6 O3 ，分子量457.48。DAPI 是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处，一个DAPI分子可
载体多克隆位点（MCS）改造
加、减、换一个载体 的MCS的位点 （给一个表达 载体加、减、换小表达标签，如His6， His10，strep II等，和MCS改造是一样的），其实技术 不是问题，问题在于位点的选择 ，因为载体设计 时应该设计者也考虑过mcs的问题，应该给使用者越多的选择越好，但为什么有的载体只给有
PCR实验指导与常见问题分析7
11. All products in my multiplex reaction are weak. How can I improve the yield?Decrease annealing time in small steps (2º C)Decrease extension temper
三代基因测序组装算法和软件研发获突破
DNA基因测序技术从上世纪70年代起，历经三代技术后，目前已发展成为一项相对成熟的生物产业。测序技术的应用也扩展到了生物、医学、制药、健康、农林、园艺、花卉、环保、法医等许多领域，并成为一项与我们衣食住行密切相关的高技术产业。据最新统计，2012年全球基因测序市场的产值已超过百亿，按最近几年增长
Methods－for－the－Measurement－of－a－Bacterial－Enzyme－Activity－in－Cell－Lysates3
Different enzyme assays for ACTase study in H. pyloriACTase properties were studied in situ in cell-free extracts to obtain information on enzyme func
概述老年人肺气肿的并发症
1.下呼吸道感染 肺气肿患者由于年老体弱，营养不良，机体免疫力下降，气道狭窄和分泌物潴留而易发生下呼吸道感染。患者多因此由稳定期转入加重期。值得注意的是，老年患者合并感染时往往没有发热，白细胞总数也不高。咳嗽、气促加剧，痰量增加，痰变脓性是下呼吸道感染最早和最重要的征象。 2.自发性气胸 多因
心理所揭示不同认知控制过程的特异性
认知控制是指产生、维持和调整一系列目标导向行为的加工过程。它的一个核心问题是各种冲突的解决到底是领域特异性的还是领域一般性的。冲突监测模型（the conflict-monitoring model）认为，认知控制是领域一般化的，存在一个由一个冲突监测模块和一个冲突执行模块组成的冲突控制环路，这
高通量筛选：化合物库在药物研发过程中的应用MedChe...2
二、化合物库使用方法及使用注意事项 化合物库筛选过程主要包括化合物库选择、实验方案设计、实验进行、实验结果检测、实验方案优化等步骤。进行化合物库筛选，要根据自己的实验目的选择合适的化合物库，设计适合的实验方案，并设计好化合物作用结果的检测指标及检测方法。化合物库筛选的实验方案设计至少需要包括以下
PCR技术盘点
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：模板DNA的变性，模板DNA与引物的退火(复性)，引物的延伸。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能
数据非依赖采集DIA－解决方案（二）
二、特点与优势 数据非依赖采集（DIA）：• 采集所有离子及碎片谱图，不丢失任何信息，重现性好；• 数据易于追溯，即使目前的水平无法发现某些蛋白/ 化合物，未来可以回溯；• 无需优化方法，对于易降解样品可以即刻采集，获得数据后再深入挖掘；• 基于碎片离子（即母子离子对）定量，选择性好，与 SRM/M
PCR技术盘点
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：模板DNA的变性，模板DNA与引物的退火(复性)，引物的延伸。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟， 2～3小
不得不看的载体构建的心得与体会
这两年在美帝净做克隆实验了，以前读PHD时候还觉得自己分子克隆挺牛X的，来这边之后做了各种各样的构建才知道以前是坐井观天，刚才粗粗统计了一下，在美帝一年零八个月，我构建的质粒的超过四百个，其中有很简单从PCR构建到拿WB结果的一共不到一周，也有巨难的花了四个月时间换了几次strategy才弄好激动得
不得不看的载体构建的心得与体会
这两年在美帝净做克隆实验了，以前读PHD时候还觉得自己分子克隆挺牛X的，来这边之后做了各种各样的构建才知道以前是坐井观天，刚才粗粗统计了一下，在美帝一年零八个月，我构建的质粒的超过四百个，其中有很简单从PCR构建到拿WB结果的一共不到一周，也有巨难的花了四个月时间换了几次strategy才弄好激动得
IJMS：科学家揭示人类阿尔兹海默病和心脏病之间的遗传学关联
目前有研究证据支持异常脂质代谢与阿尔兹海默病风险之间的关联，同样地，观察性研究结果表明，阿尔兹海默病与冠状动脉疾病之间也存在共病关联，然而，目前研究人员并不清楚阿尔兹海默病发生背后的复杂生物学机制，其与脂质和冠状动脉疾病特征之间的关联，他们也不是很清楚，相互矛盾的证据进一步强调了对这一研究领域正
ProcartaPlex－免疫检测常见问题及解决方案
eBioscience公司Luminex液相蛋白芯片检测试剂——ProcartaPlex可以为您的生物学研究提供各种多因子检测方案，包括细胞因子、生长因子、趋化因子和其他蛋白。在选择试剂盒及操作时会遇到很多问题，现将常见问题及答复汇总如下，供您参考： 如果不小心将整个试剂盒保存在-20°C. 这个试
赵方庆团队提出环形RNA转录本重建和定量新方法
在以往的研究中，环形RNA的识别方法主要是利用环形RNA特有结构——反向剪接序列特征进行识别。然而，由于二代测序的读长普遍较短，研究者们虽然可以获得大量的反向剪接位点，却无法高通量获得环形RNA的完整内部结构信息，也无法对不同可变剪接产物进行精确定量。 2018年1月19日，Genome Me
IJMS：科学家揭示人类阿尔兹海默病和心脏病之间的遗传学关联
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