细菌浓度的简单确定法:麦氏比浊法
麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。麦氏比浊管的配比如下: 管 号 (McFarland)0.5123450.25%BaCl 2 ( ml )0.20.40.81.21.62.01%H 2 SO 4 (ml)9.89.69.28.88.48.0细菌的近似浓度 ( × 10 8 /ml)13691215操作方法:1、轻摇标准试管。2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。使用技巧:1、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。2、找张白纸,打上平行直线,然后看(如图示,利用光在不同浓度液体折射不同)。注意事项:1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养......阅读全文
什么是麦氏重排
麦氏重排(McLafferty rearrangement)是对质谱分析中离子的重排反应提出的经验规则,于1956年由美国质谱学家麦克拉弗蒂(F.W.Mclafferty) 提出。 重排机理 当有机化合物含有不饱和基团(如C=O、C=N、C=S、C=C),且与不饱和基团相连的γ 碳上有氢原子
麦氏重排是什么
麦氏重排(McLafferty rearrangement)是对质谱分析中离子的重排反应提出的经验规则,于1956年由美国质谱学家麦克拉弗蒂(F.W.Mclafferty) 提出。 重排机理 当有机化合物含有不饱和基团(如C=O、C=N、C=S、C=C),且与不饱和基团相连的γ 碳上有氢原子
速率散射比浊法检测补体C3、C4
补体(complement,C)是由近20种不同血清蛋白组成的多分子系统,约占血清球蛋白总量的10%。补体在血清中的含量相对稳定,不因免疫应答而增加,仅在某些病理情况下才会发生波动。补体系统的基本组成包括9种血清蛋白成分,按发现的先后顺序而分别命名为C1-9。补体是一个复杂的反应系统,除了溶解细胞和
免疫比浊测定的注意事项
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。免疫比浊测定注意事项:1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。2、应维持反应管中抗体蛋白始终过
免疫透射比浊分析的原理
透射比浊法的基本原理是测定一定体积的溶液通过的光线量,当光线通过时,由于溶液中存在的抗原抗体复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透射光的减少,测定的光通量和抗原抗体复合物的量成反比。原理:抗原抗体在一定缓冲液中形成免疫复合物(IC),当光线透过反应溶液时,由于溶液内复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透
免疫比浊测定注意事项
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。免疫比浊测定注意事项:1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。2、应维持反应管中抗体蛋白始终过
免疫比浊测定注意事项
免疫比浊测定注意事项:1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。3、易受到脂血的影响。
抗原抗体结合动态测定方法—免疫比浊法的基本信息介绍
免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。 其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应
细菌内毒素中什么是定量法
目前,国内外广泛应用且检测技术比较成熟的细菌内毒素定量检查法主要有以下四种。1. 1 凝胶法 是目前最常用的细菌内毒素检查法。即在10mm×75mm的小试管内,加入待检样品和鲎试剂各0. 1ml混合, 37℃、60 min保温反应后, 180°倒转,根据凝胶形成的情况(凝胶是否坚实)作为判定指标的一
尿微量白蛋白(UALB)免疫比浊定量(QuikRead仪器法)
1. 实验原理QuikRead U-ALB是一种以微粒子包被的抗人白蛋白血清为基础的免疫比浊试验。存在于样本中的白蛋白和微粒子反应,溶液中浊度的最终变化通过QuikRead仪器被测定。尿样本被加入缓冲液中在同一比浊杯中进行分析测定。试剂被预先定标,特定批号的标准曲线被记录在试剂盒提供的磁卡当中。
土壤全氮测定法(半微量开氏法)
GB 7173-87本标准适用于测定土壤全氮含量。1 测定原理样品在加速剂的参与下,用浓硫酸消煮时,各种含氮有机化合物,经过复杂的高温分解反应,转化为铵态氮。碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收,以酸标准溶液滴定,求出土壤全氮含量(不包括全部硝态氮)。包括硝态和亚硝态氮的全氮测定,在样品消煮前,需先用高锰酸
细菌的生化鉴定法
各种微生物在代谢类型上表现了很大的差异。由于细菌特有的单细胞原核生物特性,这种差异就表现得更加明显。不同细菌具有不同的酶系统,故不同细菌分解、利用糖类、脂肪类和蛋白类物质的能力不同,它们对物质的代谢谱和分解产物也就不同,利用这种特点建立细菌生化反应,在菌株的分类鉴定中具有主要意义。【实验目的】1.
干制生化鉴定试剂盒的使用和操作方法
①从密封袋中取出试剂盒,打开盒盖,在试剂盒的长条中加入 1mL 的无菌水,用来增加试剂盒的湿度,防止培养时由于液体的挥发导致小孔干燥。②用接种环从平板上挑取新鲜的单个纯菌落到适当的无菌水中,制成0.5麦氏浊度的均一菌悬液。如果实验室配有浊度仪可以直接将菌悬液用浊度仪调至0.5麦氏浊度,如果没有配备浊
干制生化鉴定试剂盒的使用介绍
①从密封袋中取出试剂盒,打开盒盖,在试剂盒的长条中加入 1mL 的无菌水,用来增加试剂盒的湿度,防止培养时由于液体的挥发导致小孔干燥。②用接种环从平板上挑取新鲜的单个纯菌落到适当的无菌水中,制成0.5麦氏浊度的均一菌悬液。如果实验室配有浊度仪可以直接将菌悬液用浊度仪调至0.5麦氏浊度,如果没有配备浊
火焰原子吸收法检测铅含量样品空白浓度比样品浓度高
火焰原子吸收法检测铅浓度低时(10的负六次方以下)时,结果不好,不确定度很大。这也是铅这个元素原子化温度低易挥发的缘故。
细菌鉴定仪出现“不能鉴定细菌”的处理
我们对现今应用较为普遍的VITEK-AMS鉴定系统中报告“不能鉴定细菌”(UIO)菌株作了进一步分析,探讨其发生原因、处理方法,以期建立一套切实可行的仪器与手工方法相结合的细菌鉴定方法。 一、材料与方法 1. 仪器与试剂:VITEK-AMS 60型全自动细菌鉴定仪及其配套GNI、GPI、YBC试
免疫透射比浊法的仪器工作过程是怎么样的?
工作过程:1.将待检标本和抗原参考品作适当稀释。2.将待测标本和标准抗原溶液(5个浓度抗原标准品)与适当过量的抗血清混合,在一定条件下,抗原抗体反应完成后,在340nm处测定各管吸光度。3.按方程进行曲线拟合,制备剂量-反应曲线,由计算机处理,计算出抗原浓度。
麦氏重排如何进行?
麦氏重排(McLafferty rearrangement)是对质谱分析中离子的重排反应提出的经验规则,于1956年由美国质谱学家麦克拉弗蒂(F.W.Mclafferty) 提出。 当有机化合物含有不饱和基团(如C=O、C=N、C=S、C=C),且与不饱和基团相连的γ 碳上有氢原子时,γ 氢原
麦氏真空计简介
麦氏真空表又名麦克劳真空计(也叫转动式压缩真空计),是根据理想等温压缩的波义耳--马略特定律设计而成。由于它可以通过本身的参数,直接算得压强值,所以它除了进行压强测量外,还可以作为绝对真空计用来校验一些相对真空计(如:座式压缩真空计就是其中的一种),故被广泛用于工业、国防、科研、医药、制冷等真空
VITEK32全自动微生物鉴定及药物敏感试验分析系统(2)
3.操作步骤3.1 开机与关机步骤错误!未找到引用源。 开机:错误!未找到引用源。 打开总电源开关 → UPS → 终端电源 → 电脑。错误!未找到引用源。 等待屏幕出现: ③ 在login处键入supv,按enter(回车键)或点击OK 按钮。在password处键入supv,按enter(屏幕
免疫比浊测定的影响因素有哪些?
1.抗原抗体的比例 是浊度形成的关键因素。 形成的IC分子小,而且会发生再解离,使浊度反而下降,光散射亦减少,这就是高剂量钩状效应。当抗体过量时,IC的形成随着抗原递增而增加,至抗原、抗体最适比例处达最高峰,这就是经典的海德堡曲线理论。 在反应体系中需保持抗体适当过量,如形成抗原过量则造成测
免疫比浊分析的影响因素有哪些?
1.抗原抗体比例 2.抗体的质量:R型抗体是免疫比浊法的理想试剂,而且要特异性和亲和力好,纯度和效价高。 3.增浊剂的使用 4.入射光光源和波长 5.结果报告中的计量单位 6.伪浊度:非抗原抗体特异性结合形成的浊度,称为伪浊度,可导致抗原检测结果假性升高。伪浊度形成的原因包括:①混浊标
免疫透射比浊分析的实验要求
实验要求:1.溶液中存在的抗原抗体复合物分子应足够大,分子太小则阻挡不了光线的通过。2.溶液中抗原抗体复合物的数量要足够多,如果数量太少,溶液浊度变化不大,对光通量的影响不大。3.透射比浊是依据溶液中颗粒形成或增加而使透射光减弱的原理来定量检测抗原,检测仍需抗原抗体反应的温育时问,检测时间较长。4.
几种测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法
1.1.常量肉汤稀释法 1.1.1.抗菌药物贮存液制备 抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。抗菌药物直接购自厂商或相关机构。所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。例如:需配制100 ml
几种测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法
1.1.常量肉汤稀释法1.1.1.抗菌药物贮存液制备 抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。抗菌药物直接购自厂商或相关机构。所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。例如:需配制100 ml浓度为1280μg/
几种测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法
1.1.常量肉汤稀释法1.1.1.抗菌药物贮存液制备 抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。抗菌药物直接购自厂商或相关机构。所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。例如:需配制100 ml浓度为1280μg/
微生物鉴定药敏分析仪药敏试验的测定介绍
微生物鉴定药敏分析仪药敏试验也有两种测定法: 比浊法和荧光测定法。根据药敏试验的判读标准, 每一种药物设计了多个稀释梯度,每一种抗生素测定最低抑菌浓度可用3 -8个测试孔不等,在卡中加入一定浓度的菌悬液;系统配有专用光电比浊仪, 便于测定由不同细菌配置菌悬液的浓度。 由于孔内微生物生长会形成小
简介微生物鉴定药敏分析仪药敏试验的测定法
药敏试验也有两种测定法: 比浊法和荧光测定法。根据药敏试验的判读标准, 每一种药物设计了多个稀释梯度,每一种抗生素测定最低抑菌浓度可用3 -8个测试孔不等,在卡中加入一定浓度的菌悬液;系统配有专用光电比浊仪, 便于测定由不同细菌配置菌悬液的浓度。 由于孔内微生物生长会形成小颗粒或聚集成团块将引
细菌简单染色实验
实验方法原理常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别,
细菌简单染色实验
实验方法原理 常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别