反向PCR(inversePCR)实验步骤

inverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多,而Inverse-PCR一般只要有特异条带,基本上就是目的片段。基本步骤如下:1、反向PCR(Inverse PCR)原理:反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。a. 选择合适的限制性内切酶位点。并在T-DNA的边界(左边界、右边界均可)和酶切位点附近设计引物P1、P2;b. 回收DNA,T4连接酶连接,使酶切后的DNA片段环化;c. 回收连接后的DNA,用引物P1、P2做PCR,就可扩增到两端为T-DNA插入序列,中间为侧翼序列的片段。2、限制性内切酶消化:选择合适的限制性内切酶,基因组一定要切成弥散性的条带。在酶切之前,应对基因组DNA定量。根据T-DNA的左边界序列选择合适的酶切位点EcoRI,BamHI和HindIII/PstI,并在酶切位点上游附近设计引物Z1,Z2,Z3和Z4,然后用这些内切酶分......阅读全文

为什么PCR鉴定目的基因反向连接时连到一条链上

扩增一段已知序列旁侧的DNA。反向PCR的目的在于扩增一段已知序列旁侧的DNA,也就是说这一反应体系不是在一对引物之间而是在引物外侧合成DNA。

反向透析的定义

中文名称反向透析英文名称reverse dialysis定  义将样品置于透析袋内,再将透析袋放到具有强吸水性的高分子多聚物粉末或浓溶液中,即可将袋内水分吸出的一种大分子溶液浓缩方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

反向调节的定义

反向调节(Restroregulation):下游基因对上游基因活性的反馈调节作用。

反向层析的原理

扩散定律 扩散速度跟分子量的平方根成反比 因为分子量不同 所以扩散速度不通 根据这个可以层析一些物质

反向引物的概念

反向引物(下游引物)是沿着正链进行延长的。体外扩增DNA,双螺旋是部分或完全打开的,不存在冈崎片段,也不会一段段延长,理论上正反引物都是不间断延长的,和体内DNA自我复制是有区别的。

反向透析的概念

中文名称反向透析英文名称reverse dialysis定  义将样品置于透析袋内,再将透析袋放到具有强吸水性的高分子多聚物粉末或浓溶液中,即可将袋内水分吸出的一种大分子溶液浓缩方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

什么是反向透析

中文名称反向透析英文名称reverse dialysis定  义将样品置于透析袋内,再将透析袋放到具有强吸水性的高分子多聚物粉末或浓溶液中,即可将袋内水分吸出的一种大分子溶液浓缩方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

反向信号传送的定义

反向信号传送即反向信号传递,反向信号传递(reverse signaling)现象正逐渐受到人们的关注。简言之,即可溶性受体或膜表面受体与表达在细胞膜表面的相应配体结合后,传递信号至配体细胞内,并引发相应的生物学效应。

反向调节的作用特点

反向调节可以认为是一种负反馈调节。反向调节的基因位于靶基因的下游,当反向调节基因的mRNA产生时,可以与靶基因的mRNA配对结合,从而调节靶基因数量及翻译产物的数量。

反向重复[序列]的定义

存在于双链核酸分子中排列顺序方向相反的一段核苷酸序列。

反向信号传送的概念

反向信号传送即反向信号传递,反向信号传递(reverse signaling)现象正逐渐受到人们的关注。简言之,即可溶性受体或膜表面受体与表达在细胞膜表面的相应配体结合后,传递信号至配体细胞内,并引发相应的生物学效应。由于与传统的正向信号相反,故而得名。

反向平行链的定义

中文名称反向平行链英文名称antiparallel strand定  义(1)DNA和双链RNA中的两条互补链,其极性和方向性相反。(2)蛋白质的二级结构β片层的两种形式之一,其中两条相邻肽链是反向的。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)

芯片反向设计流程(一)

什么是芯片反向设计?反向设计其实就是芯片反向设计,它是通过对芯片内部电路的提取与分析、整理,实现对芯片技术原理、设计思路、工艺制造、结构机制等方面的深入洞悉,可用来验证设计框架或者分析信息流在技术上的问题,也可以助力新的芯片设计或者产品设计方案。芯片反向工程的意义:现代IC产业的市场竞争十分

什么是反向免疫印迹

中文名称反向免疫印迹英文名称reverse immunoblotting定  义一种用于分析抗体反应克隆性质的技术。即用等电聚焦法分离待测样品中各组分,再以电泳法转印至硝酸纤维素薄膜或其他材料上,加入同位素标记的抗原共温育,反应后用酶标记抗体与之结合,从而判定与之起反应的克隆性质和数量。应用学科免疫

反向聚合酶链反应

中文名称反向聚合酶链反应英文名称inverse PCR;iPCR定  义用于扩增已知序列的DNA旁侧未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上没有识别位点的限制内切酶,切出包含已知DNA、而两端带有未知序列的区段,将切出的DNA区段环化,然后再按已知的DNA序列设计一对引物进行扩增。应用学科细胞生物学

末端反向重复[序列]的定义

中文名称末端反向重复[序列]英文名称inverted terminal repeat;ITR定  义排列顺序相反的、等同的或密切相关的核苷酸序列。常出现于某些转座子的末端。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

什么是反向点杂交技术

PCR是聚合酶链式扩增的英文缩写.反向点杂交是将探针固顶在玻璃芯片或尼龙膜上,用于检测扩增产物中是否含有目标基因的技术.此技术较为成熟,在国内应用较多,如HPV分型诊断试剂、地中海贫血诊断试剂等.

反向色谱法的原理

反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样,RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。因此,必须用极性有机溶剂(如

反向色谱有哪些应用方面

现在,反相色谱的应用占到了所有液相应用的80%以上。为什么反相色谱会获得如此普遍的使用呢?一来是,反相色谱的使用更加简单和安全。流动相不再需要烃类等这些更危险的有机溶剂。二来是,液相和气相是互相补充的技术。有极性的,沸点高的化合物不适合用气相色谱仪GC分析,却很适合用反相液相色谱分析。极性的强弱是相

反向免疫印迹的方法介绍

中文名称反向免疫印迹英文名称reverse immunoblotting定  义一种用于分析抗体反应克隆性质的技术。即用等电聚焦法分离待测样品中各组分,再以电泳法转印至硝酸纤维素薄膜或其他材料上,加入同位素标记的抗原共温育,反应后用酶标记抗体与之结合,从而判定与之起反应的克隆性质和数量。应用学科免疫

反向间接凝集反应的概念

反向间接凝集反应,利用抗体致敏颗粒检测可溶性的抗原。

如何使用正向反向高粘度移液器?

 活塞移动的体积必须比所希望吸取的体积要大约百分之2-4,温度、气压和空气湿度的影响必须通过对空气垫加样器进行结构上的改良而降低,使得在正常情况下不至于影响加样的准确度。一次性吸头是本加样系统的一个重要组成部分,其形状、材料特性及与加样器的吻合程度均对加样的准确度有很大的影响。 具有准确性和重复性,

钢筋正反向弯曲试验装置

钢筋正反向弯曲试验装置、钢筋正反向弯曲试验夹具属于钢筋反复弯曲领域,旨在提供一种钢筋反复弯曲试验的驱动装置,其技术方案要点是:包括设在转动臂上的转轴、固定在转动臂的转轴远离转动臂一端上的齿轮,所述转轴伸出转动臂基座,所述齿轮连接有驱动齿轮转动的自动驱动部;优点是:包括设在转动臂上的转轴、固定在转动臂

国内规模最大反向充电试验完成

  国内规模最大反向充电试验完成,50台新能源车30分钟反向放电近1000度。  在江苏无锡,国内规模最大的反向充电试验近日完成,50台新能源车的反向充电功率达到了近2000千瓦,试验历时30分钟。这次试验向电网反向放电近1000度,可满足133户居民一天的正常用电。参与此次反向充电响应的车主,可获

反向间接凝集反应的概念

反向间接凝集反应,利用抗体致敏颗粒检测可溶性的抗原。

反向间接凝集反应的特点

利用抗体致敏颗粒检测可溶性的抗原,即为反向间接凝集反应。就是抗体附在一与免疫无关的颗粒上,再与可溶性的抗原发生凝集的现象。

反向性扁平苔藓病例分析

患者女,49 岁。主诉:全身多处皱褶部位暗红斑半年。现病史:患者半年前无意中发现双侧腋窝出现黄豆大暗红斑,无自觉症状,未予重视。 此后皮损逐渐增多,逐 渐累及双侧肘窝、乳房下褶、脐窝、腹股沟等多个皱褶部位,自行外用多种药物(具体成分不详)治疗,皮损未见明 显好转。 为进一步诊治于 2019 年 6

如何反向冲洗液相色谱柱

主要针对的反向色谱柱而讲!1.色谱柱简介最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性添充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基硅烷键合相和氨基硅烷键合相等)也有使用,正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换填充剂用于离子交

反向转运体的定义

由同一种膜蛋白将两种不同的离子或分子分别向膜的相反方向转运过程。如通过Na+/H+反向转运蛋白将H+泌出细胞而使Na+流入、ADP/ATP转运、Ca2+/H+转运、氯霉素/H+转运和硫胺素/H+转运等。Antiporter反向转运体/逆向协同转运蛋白:在协同转运蛋白中,若某种蛋白协同转运的两种物质的

如何反向冲洗液相色谱柱

主要针对的反向色谱柱而讲!1.色谱柱简介最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性添充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基硅烷键合相和氨基硅烷键合相等)也有使用,正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换填充剂用于离子交