反向引物的概念
反向引物(下游引物)是沿着正链进行延长的。体外扩增DNA,双螺旋是部分或完全打开的,不存在冈崎片段,也不会一段段延长,理论上正反引物都是不间断延长的,和体内DNA自我复制是有区别的。......阅读全文
反向引物的概念
反向引物(下游引物)是沿着正链进行延长的。体外扩增DNA,双螺旋是部分或完全打开的,不存在冈崎片段,也不会一段段延长,理论上正反引物都是不间断延长的,和体内DNA自我复制是有区别的。
PCR中正向引物和反向引物的概念和具体作用
正向引物和反向引物是相对的,通常以一个双链DNA(上面的那条链)的上游结合部位称为正向引物,是从左到右的方向,也就是5-3的方向,而下面那条互补链的下游结合部位称为反向引物。其方向是从右到左的,因为下面的链的方面从左到右是3-5,从右到左就是5-3了,PCR的扩增的确是一条引物就可以扩增了。反向引物
反向PCR引物设计的原理
可以这样来说吧,首先你应该有一条已知的序列,反向引物设计时在序列的5'方向找一段序列然后反向互补作为反向引物,在3'方向直接找一段序列作为正向引物。这样就OK了,这是引物的设计,至于其他条件可以参考相关文献.
反向透析的概念
中文名称反向透析英文名称reverse dialysis定 义将样品置于透析袋内,再将透析袋放到具有强吸水性的高分子多聚物粉末或浓溶液中,即可将袋内水分吸出的一种大分子溶液浓缩方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
反向信号传送的概念
反向信号传送即反向信号传递,反向信号传递(reverse signaling)现象正逐渐受到人们的关注。简言之,即可溶性受体或膜表面受体与表达在细胞膜表面的相应配体结合后,传递信号至配体细胞内,并引发相应的生物学效应。由于与传统的正向信号相反,故而得名。
简并引物的概念
简并引物是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基序列可能性引物的混合物。PCR为了增加特异性,可以参考密码子使用表,根据不同生物的碱基使用偏好,减少简并性。简并度越低,产物特异性越强,设计引物时应尽量选择简并性小的氨基酸,并避免引物3’末端简并。
正向引物的概念
中文名称正向引物英文名称forward primer定 义处于DNA双链上游的引物。如用于测序,则从5′向3′方向读出DNA正链的序列。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
引物修补的概念
中文名称引物修补英文名称primer repair定 义当DNA模板受损时,可根据其损伤情况,以一套或几套引物借助核酸聚合酶的作用合成新的互补核酸链,以修复损伤形成的错误序列的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
引物延伸的概念
中文名称引物延伸英文名称primer extension定 义从与模板(RNA或DNA)结合的引物3′-OH端开始,在核酸聚合酶的作用下,按照碱基配对的原则,逐个连上核苷酸,由5′→3′方向合成与模板互补链的过程。该反应可用于聚合酶链反应、单核苷酸多态性检测等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学
反向PCR引物设计需要同源臂吗
需要。用pcr扩的时候就把同源重组片段引入,vector酶切后5端选15nt,3'端选15nt分别加到正向引物和反向引物上,就做成了同源臂。同源序列是指在同一物种不同个体间或不同物种间相同或相似的DNA序列,而同源臂是指一段同源序列,类似于trna氨基酸臂的结构,所谓臂,指的是手臂样结构。引
巢式引物的概念
中文名称巢式引物英文名称nested primer定 义为巢式聚合酶链反应所设计的引物,第二组引物是在第一组引物扩增得到的产物序列范围内设计的。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
引物步移的概念
中文名称引物步移英文名称primer walking定 义一种长链DNA测序的策略。根据已测出的序列结构设计测序引物,按第一轮测序得出的新序列,再设计引物进行第二轮测序,如此重复,直至获得全序列。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
反向间接凝集反应的概念
反向间接凝集反应,利用抗体致敏颗粒检测可溶性的抗原。
反向间接凝集反应的概念
反向间接凝集反应,利用抗体致敏颗粒检测可溶性的抗原。
随机引物的概念和用途
随机引物是指当特定mRNA由于含有使逆转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时,可采用随机六聚体这一不特异的引物来拷贝全长mRNA。用此种方法时,体系中所有RNA分子全部充当了cDNA第一链模板,PCR引物在扩增过程中所需要的特异性通常用此引物合成的cDNA。
通用引物的概念和作用
通用引物是一般和载体多克隆位点两旁的序列匹配,或者是与载体里面的一些启动、终止元件匹配。这样不管载体插入什么DNA片段,都可以用通用引物扩出来。通用引物可以用来测序,但是只是“通用”,也不是万能的。
序列特异性引物的概念
中文名称序列特异性引物英文名称sequence specific primer;SSP定 义一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物(C)组成引物系统;在引物延伸时,A与B同时竞争靶序列上同一复性位点,扩增反应后,经凝胶电泳
序列特异性引物的概念
中文名称序列特异性引物英文名称sequence specific primer;SSP定 义一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物(C)组成引物系统;在引物延伸时,A与B同时竞争靶序列上同一复性位点,扩增反应后,经凝胶电泳
什么是反向-PCR?反向-PCR的特点
常规 PCR 是扩增两引物之间的 DNA 片段,反向 PCR(reverse PCR)是用引物来扩增两引物以外的 DNA 片段。一般先用限制性内切酶酶解 DNA(目的基因中不存在该酶的酶切位点,且片段应短于2~3kb),然后用连接酶使带有黏性末端的靶片段自身环化,最后用一对反向引物进行 PCR,得到
反向PCR
主要内容如下:· RT-PCR· Competitive and Quantative RT-PCR· In Situ RT-PCR· RL-PCR· DNA Contamination· RT-PCR
反向PCR
实验方法原理 标准 PCR 技术应用于定位在两个引物之间(指向内部)的一段 DNA 片段的扩增。与此相反,反向 PCR (inverse PCR) 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列,这种未知
反向PCR
标准 PCR 技术应用于定位在两个引物之间(指向内部)的一段 DNA 片段的扩增。与此相反,反向 PCR (inverse PCR) 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列,这种未知序列没有引物可以利用。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原
反向PCR
实验方法原理 标准 PCR 技术应用于定位在两个引物之间(指向内部)的一段 DNA 片段的扩增。与此相反,反向 PCR (inverse PCR) 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列,这种未知序列没有引物可以利用。该项技术由几个研究小组开发(Ochm
反向层析的原理
扩散定律 扩散速度跟分子量的平方根成反比 因为分子量不同 所以扩散速度不通 根据这个可以层析一些物质
反向透析的定义
中文名称反向透析英文名称reverse dialysis定 义将样品置于透析袋内,再将透析袋放到具有强吸水性的高分子多聚物粉末或浓溶液中,即可将袋内水分吸出的一种大分子溶液浓缩方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
反向PCR的原理
反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列,因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状DNA分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段;现
反向pcr的原理
反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列,因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状DNA分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段;现
反向PCR的原理
反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列,因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状DNA分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段;现
反向调节的定义
反向调节(Restroregulation):下游基因对上游基因活性的反馈调节作用。
反向PCR的原理
反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列,因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状DNA分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段;现