MTT实验的一些细节问题
一、细胞：1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低，太少观察不到差异。2.药物浓度的设定。一定要多看文献，参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记！否则，可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。3. 时间点的设定。在不同时间点的测定OD值，输入excel表，最后得到不同时间点的抑制率变化情况，画出变化的曲线，曲线什么时候变得平坦了（到了平台期）那个时间点应该就是最好的时间点（因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显）。4.培养时间。200 ul的培养液对于1......阅读全文
基于－MTT－的细胞毒性实验
实验方法原理 将指数生长期的细胞暴露在细胞毒性药物中，暴露的持续时间通常决定于产生最大损伤所需的时间，但是它也受药物稳定性的影响。将药物撤除后，让细胞再增殖 2~3 个群体倍增时间（PDT )，这样就可以把能够增殖的存活细胞与那些不能增殖的存活细胞区別开来。然后用 MTT 染料还原反应测定存
四唑盐（MTT）比色实验
MTT法 实验方法原理 活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色
MTT法检测细胞生长实验
MTT法也就是MTT比色法，这种方法就是用来检测检测细胞存活和生长的。 这个方法中的MTT浓度为5mg/ml，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃ 避光保存即可。您在配制和保存的过程中，容器用
四唑盐（MTT）比色实验
MTT法 实验方法原理 活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色
MTT实验两年心得
MTT实验是检测细胞活力的实验方法，由于细胞活力与细胞数呈正相关，因此也常常用来检测细胞的增殖情况。MTT的原理：活细胞有琥珀酸脱氢酶，将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多，笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。1、培养好细胞点板。养细胞没啥好说的，如果不知道细胞如何养，那就看
使用培养箱注意一些技术细节
使用培养箱注意一些技术细节：（1） 培养箱应由专人负责管理，操作盘上的任何开关和调节旋扭一旦固定后，不要随意扭动，以免影响箱内温度，CO2、湿度的波动，同时降低机器的灵敏度。（2） 所加入的水必须是蒸馏水或无离子水，防止矿物质储积在水箱内产生腐蚀作用。每年必须换一次水。经常检查箱内水是否够。（3）
细胞培养室建立的细节问题
1.甲醛薰蒸:40％甲醛溶液(药用规格、福建三明化工总厂出品),用量30 ml／m3,室内温度21～24℃,相对湿度75％～85％,加热薰蒸使蒸汽弥漫全室,关闭门窗1 h.甲醛水溶液为无色,具有强烈刺激性气味的液体,可杀灭多数微生物,价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等.市售的甲醛水溶液中
细胞培养室建立的细节问题
前段时间,经历了几个月的时间,为实验室建了一个细胞培养间.目前这个细胞培养间运转良好,培养的神经元长了10来天,长势不错,已经可以认为细胞培养室建立成功.在建立细胞培养间的过程中,碰到了许多问题,逐一解决后,觉得大家如果要建立细胞培养间,肯定也会碰到许多相同的问题,所以将我碰到的问题整理出来.首先向
细胞培养室建立的细节问题
前段时间,经历了几个月的时间,为实验室建了一个细胞培养间.目前这个细胞培养间运转良好,培养的神经元长了10来天,长势不错,已经可以认为细胞培养室建立成功.在建立细胞培养间的过程中,碰到了许多问题,逐一解决后,觉得大家如果要建立细胞培养间,肯定也会碰到许多相同的问题,所以将我碰到的问题整理出来.首先
mtt实验法注意事项
加药时间主要看你的实验目的、细胞的生长速度以及你的铺板密度。MTT最好还是吸出来，因为倒的力度太小，溶液倒不干净；力度太大又可能把结晶也倒掉了。如果用枪头吸取，可以倾斜30度慢慢地吸，一定不要把结晶吸出来，也可以用注射器吸取。总的原则就是既要把MTT溶液吸干净，又不能让结晶有所损失，否则都将影响最后
MTT实验前期细胞密度如何确定
⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MT
MTT法细胞活性检测实验步骤
MTT是一种粉末状化学试剂，全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝，是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途：
MTT实验前期细胞密度如何确定
⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MT
MTT（噻唑蓝）原理、用途、实验步骤
什么是MTT，什么是MTT法MTT，商品名称噻唑蓝全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，一种黄颜色的染料，由于应用于细胞存活率的检
在使用冷水机时应该注意的一些操作细节
冷水机，在行业中分为风冷式冷水机和水冷式冷水机两种，冷水机在温度控制上分为低温冷水机和常温冷水机，常温温度一般控制在0度-35度范围内。低温机温度控制一般在0度-零下45度左右范围。但是在使用冷水机是也要注意一些常规操作是不是正确。 冷水机应注意的事项: 首先检查电源是否正常。电源电压不应超
对待实验室仪器摇床使用一些小问题的解决
实验中常会发生在设备上发生一些故障，让实验人员在工作中遇见一些难题。首先，实验中人员在使用恒温摇床时。第一要熟悉下摇床的基本使用工具，和外观结构。第二要学习摇床的性能和基本操作。第三要知道实验要求，和设备使用容量。解决恒温摇床设备在实验工作学习中最常见发生的问题，多掌握解决实验现象小问题。一、托盘不
对待实验室仪器摇床使用一些小问题的解决
实验中常会发生在设备上发生一些故障，让实验人员在工作中遇见一些难题。首先，实验中人员在使用恒温摇床时。第一要熟悉下摇床的基本使用工具，和外观结构。第二要学习摇床的性能和基本操作。第三要知道实验要求，和设备使用容量。解决恒温摇床设备在实验工作学习中最常见发生的问题，多掌握解决实验现象小问题。一、托盘不
对待实验室仪器摇床使用的一些小问题的解决
实验中常会发生在设备上发生一些故障，让实验人员在工作中遇见一些难题。首先，实验中人员在使用恒温摇床时。*要熟悉下摇床的基本使用工具，和外观结构。第二要学习摇床的性能和基本操作。第三要知道实验要求，和设备使用容量。解决恒温摇床设备在实验工作学习中zui常见发生的问题，多掌握解决实验现象小问题。一、托盘
浅谈实验中一些常见问题及解决办法
实验室中常见的一些工作小问题和仪器设备出现的小状况，多学习以下的方式解决实验中常出现的麻烦 1、 被胶塞粘结的温度计要如何取出? 当温度计或玻璃管与胶塞或胶管粘结在一起而难以取出时，可用小改锥或刀锉的尖端插入温度计(或玻璃管)与胶塞(或胶管)之间，使之形成空隙，再滴上几滴水，如此操作并沿
细胞增殖检测：MTT实验经验总结
MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-（4，5）-dimethylthiahiazo （-z-y1）-3，5-di- phenytetrazoliumromide， MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用
使用生化培养箱不可不知的一些细节
生化培养箱是遗传工程、医学、农业、林业、环境科学、畜牧、水产等生产和科研部门的理想的实验设备。适用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培育与保存；植物栽培、育种试验；酶学、酶工程研究；生物制品、药品、疫苗、血液和各种标本的保存与试验，为了确保设备的正常使用、保持其性能、延长其使用寿命，使用该设备时要注意
单晶衍射仪在使用中的一些细节要重视起来
单晶衍射仪在使用中的一些细节要重视起来 单晶衍射仪操作规程及注意事项 一、准备与开机 1、打开仪器的总电源开关，然后启动循环冷却系统。 2、开启CCD冷却系统，等待温度稳定至-40℃。 3、开启仪器的开关，仪器稳定后，开动X-RAYON开关，X-RAY指示灯亮，X
气相色谱柱的使用离不开一些微小细节
气相色谱柱使用的材料通常有玻璃、石英玻璃、不锈钢和聚四氟乙烯等，根据所使用的材质分别称之为玻璃柱、石英玻璃柱、不锈钢柱和聚四氟乙烯管柱等。气相色谱柱在气相色谱仪分析中是一个核心部分，正确使用气相色谱柱对气相色谱仪分析结果的准确性和延长气相色谱柱的使用寿命至关重要 1. 在没有载气通过时，柱的固定
实验室摇床使用时一些小问题的解决方法
实验中常会发生在设备上发生一些故障，让实验人员在工作中遇见一些难题。首先，实验中人员在使用恒温摇床时。第一要熟悉下摇床的基本使用工具，和外观结构。第二要学习摇床的性能和基本操作。第三要知道实验要求，和设备使用容量。解决恒温摇床设备在实验工作学习中最常见发生的问题，多掌握解决实验现象小问题。一、托盘不
MTT－Assay
This procedure is for cells in 96 well plates, if larger plates are used then adjust volumes accordingly.1 Make a solution of 5mg/ml MTT dissolved in
质粒提取的一些问题（二）
6．加核糖核酸酶降解核糖核酸后，为什么再要用SDS与KAc来处理？ 加进去的RNase本身是一种蛋白质，为了纯化DNA，又必须去除之，加SDS可使它们成为SDS-蛋白复合物沉淀，再加KAc使这些复合物转变为溶解度更小的钾盐形式的SDS-蛋白质复合物，使沉淀更加完全。也可用饱和酚、
细胞培养的一些问题
细胞培养常见问题1. 液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？要冷藏！！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。2. 液体培养基中谷氨酰胺的作用
质粒提取的一些问题（一）
1．溶液I—溶菌液： 溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。 葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。 EDTA：（1）螯合Mg
能谱（EDS）的一些问题
无论扫描电镜还是透射电镜，现在购置的时候能谱几乎成了标配，因为价格相对电镜来说只有五分之一甚至六分之一，而且分析速度快，可以在线分析微区内样品组分，给出半定量或者定量结果，如果透射电镜有扫描附件，也和扫描电镜一样能给出漂亮的元素分布map，这对于实验结果来说，是一个很有益而且很直观的支持。 但
能谱（EDS）的一些问题
无论扫描电镜还是透射电镜，现在购置的时候能谱几乎成了标配，因为价格相对电镜来说只有五分之一甚至六分之一，而且分析速度快，可以在线分析微区内样品组分，给出半定量或者定量结果，如果透射电镜有扫描附件，也和扫描电镜一样能给出漂亮的元素分布map，这对于实验结果来说，是一个很有益而且很直观的