四唑盐(MTT)比色实验
MTT法 实验方法原理 活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色结晶物,用酶联免疫检测仪在490 nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。 实验材料 细胞 试剂、试剂盒 D-Hanks液 牛血清 RPMI1640 ......阅读全文
四唑盐(MTT)比色实验
MTT法 实验方法原理 活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色
四唑盐(MTT)比色实验
MTT法 实验方法原理 活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色
MTT(四唑盐)比色法
MTT比色法 实验方法原理 活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。二甲亚砜(DMSO)能溶解沉积在细胞中蓝
MTT(四唑盐)比色法
四唑盐(MTT)比色法可应用于:(1)检测细胞存活和生长;(2)大规模的抗肿瘤药物筛选;(3)细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定;(4)生物活性因子的活性检测。 实验方法原理活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。二甲亚砜(DM
四唑盐(MTT)比色法
四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝操作步骤一、接种细胞1、用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中。 2、离心细胞悬液,使细胞沉积下来。用培养基重悬细胞,计数。 3、将细胞稀释至2.5×103-50×103 个/ml,每个微滴定板可容纳20ml细胞重悬液。 4、用加样器在平底96
MTT(四唑盐)比色法
实验方法原理 MTT法是Mosmann 1983年报道的,以后此方法得到了迅速发展并广泛应用于临床与科研研究。其原理是活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。二甲亚砜(DMSO)能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅
四唑盐(MTT)比色法
四唑盐(MTT)比色法仅供参考 MTT常用浓度为5mg/ml;向大家推荐一本书《动物细胞培养--基本技术指南》注:此书中MTT浓度为50mg/ml1、药物的细胞毒性四唑盐(MTT)比色法操作步骤接种细胞(1)用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中。(2)离心细胞悬液,使细胞沉积下
四唑盐(MTT)比色实验——MTT法
实验方法原理活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色结晶物,用酶联免疫检测仪在490 nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。 实验材料细胞
培养细胞的活力测定(四唑盐比色法)
培养细胞活力测定是肿瘤体外研究中应用最广的技术手段之一。任何培养瓶内生长的细胞都由死细胞和活细胞组成,从形态上区别死、活细胞是困难的。方法:四唑盐(MTT)比色法四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝四唑盐比色法的原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶干水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,
什么是“四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)”
“四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)”,即四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法。MTT是一种噻唑盐,化学名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,水溶液为黄橙色。小鼠脾细胞受到ConA作用后发生增殖活化,其胞内线粒体琥珀酸脱氢酶活性相应升高,MTT作为其底物参与反应,形成蓝色的甲臜(For
免疫组化技术专题:MTT(四唑盐比色实验)大汇总(一)
一、实验前应明确的问题 1. 选择适当的细胞接种浓度。 一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终
免疫组化技术专题:MTT(四唑盐比色实验)大汇总(二)
二、实验步骤 (一)贴壁细胞 1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100 ul,铺板使待测细胞调密度至1 000-10 000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。2. 5%CO2,37 ℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,
单层贴壁细胞细胞毒性试验四唑盐(MTT)比色法实战篇
单层贴壁细胞四唑盐(MTT)比色法仅供参考 MTT常用浓度为5mg/ml;向大家推荐一本书《动物细胞培养--基本技术指南》注:此书中MTT浓度为50mg/ml1、药物的细胞毒性四唑盐(MTT)比色法操作步骤接种细胞(1)用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中。(2)离心细胞悬液,
四唑氮法的定义
中文名称四唑氮法英文名称tetrazolium method定 义以四唑盐作为氧化酶活性的定性标志,在组织切片中显示酶活性定位的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
盐雾试验箱四种盐雾试验原理完全解析
盐雾试验箱四种盐雾试验原理完全解析 盐雾试验箱可以做的试验有四种:中性盐雾试验(NSS)、铜加速乙酸盐雾试验(CASS)、交变盐雾试验、醋酸盐雾试验(ASS试验)。当然,不同的试验不光是试验所需溶液不一样,就连箱体的设计与结构可能也有所不同。 一、中性盐雾试验(NSS)试验箱
关于头孢塞肟四唑的简介
头孢塞肟四唑为半合成的第三代头孢霉素。抗菌谱与其它第三代头孢菌素类似,对革兰阴性菌有高效,对各种阴性菌产生的β内酰胺酶特别稳定,具有杀菌作用。对大肠杆菌、克雷白杆菌属、沙雷菌属、流感杆菌、肠杆菌属及枸橼酸杆菌属等均有效。
硝基蓝四氮唑还原试验的简介
硝基蓝四氮唑还原试验是对中性粒细胞吞噬力测定。静脉血4ml,肝素抗凝。NBT实验主要用于检测中性粒细胞的胞内杀伤功能。
简述四唑硝基蓝的临床意义
(1)升高:全身细菌性感染、真菌感染。 (2)≤30%:慢性肉芽肿、先天性丙种球蛋白缺乏症、系统性红斑狼疮(SLE)、应用免疫抑制剂。 (3)
关于头孢塞肟四唑的药物概述
头孢塞肟四唑主要用于各种敏感菌所致的呼吸系、肝胆系统、泌尿生殖系、腹膜等部位的感染,并可用于败血症和烧伤、手术后感染。对绿脓杆菌的抗菌活性比头孢哌酮及头孢唑肟强,但对链球菌属的抗菌效力不如第一、二代。 临床上主要用于各种敏感菌所致的败血症、烧伤感染、上呼吸道感染、肺炎、胆囊炎、胆管炎、腹膜
四唑氮法方法的特点及应用
中文名称四唑氮法英文名称tetrazolium method定 义以四唑盐作为氧化酶活性的定性标志,在组织切片中显示酶活性定位的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
氯化三苯四氮唑的基本介绍
氯化三苯四氮唑又称2,3,5-氯化三苯基四氮唑、四唑红,简称TTC,TTZ,或TPTZ,一种脂溶性光敏感复合物,即可用来检测种子的生存能力,也可用来检测哺乳动物组织的缺血梗塞。检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂,活细胞内的脱氢酶(尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶)可以将TTC还原。对于种
硝基蓝四氮唑还原试验的方法
硝基蓝四氮唑还原试验将终浓度2和5μmol/L青蒿素处理的U937细胞培养1~5d.收集细胞,以不含血清的RPMI1460洗涤离心,弃上清,每管加入0.5mL的1g/LNBT溶液和0.1mLTPA溶液,摇匀,37℃反应30~60min.吸取少量细胞悬液,涂片,空气干燥,常规WrightGiems
简述头孢塞肟四唑的药理作用
头孢塞肟四唑对需氧的革兰阳性菌以至厌氧的革兰阴性菌都有广谱抗菌作用。由于头孢塞肟四唑抑制头孢结合蛋白,对革兰阳性菌有杀菌作用,对革兰阴性菌可抑制其细胞壁的合成而产生抗菌作用。头孢塞肟四唑代谢物的抗菌力只为本品的1/16~1/128,非常弱。
关于头孢羟苄四唑甲酸酯的简介
头孢羟苄四唑甲酸酯是一种药品。 本品为一种半合成第二代头孢菌素。对金葡菌、链球菌、脑膜炎球菌、流感杆菌、克雷白杆菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、沙门菌、志贺菌等有高度抗菌作用。本品可对抗β-内酰胺酶,对耐青霉素的金葡菌有效。临床主要用于敏感菌所致的呼吸道感染、肾盂肾炎、尿路感染及骨、关节、耳鼻咽喉
关于四唑硝基蓝的基本信息介绍
又称为硝基蓝四唑, 氯化硝基四氮唑蓝· 英文名:Tetranitroblue tetrazolium chloride(NBT).别名 3,3'-(3,3'-Dimethoxy[1,1'-biphenyl]-4,4'-diyl)bis[2,5-bis(p-nitr
氯化三苯四氮唑的生产方法介绍
1、合成苯腙:苯肼溶于95%乙醇中,加入苯甲醛水浴回流1h即得苯腙。 2、偶合:将苯腙溶于吡啶中,与苯胺重氮盐偶合。 3、合成2 -3-5 -三苯基氯化四氮唑:将上述偶合物溶于甲醇中加入亚硝酸异戊酯,然后慢慢加入通过盐酸气的甲醇溶液,加完放置3~4h,再通盐酸气20min状,水浴加热片刻,加
关于硝基蓝四氮唑还原试验的简介
硝基蓝四氮唑还原试验是对中性粒细胞吞噬力测定。静脉血4ml,肝素抗凝。NBT实验主要用于检测中性粒细胞的胞内杀伤功能。 正常参考值: 白细胞吞噬细菌百分率62~76% 吞噬指数132~172%
氯化三苯基四氮唑法测定根系活力
一、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80mV的氧化还原物质,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲 (TTF),如下式: 生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸
硝基四唑氮蓝试验的临床意义
NBT低值见于慢性肉芽肿、先天性丙球缺乏症、红斑狼疮以及使用免疫抑制剂等。此法还可用于区别细菌与病毒感染。如为病毒感染时,虽有发热,但NBT仍正常;只有细菌、真菌感染时,NBT阳性细胞增加。NBT试验还可用于器官移植后发热反应的鉴别诊断。如因细菌感染而发热,NBT值升高;但如因体内非特异性反应而
硝基蓝四氮唑还原试验的异常结果分析
升高:常见于细菌性感染,如败血症,化脓性关节炎,骨髓炎,细菌性脑膜炎等。而病毒性感染、器官移植后排斥反应引起的发热则不升高。 降低:主要用于诊断中性粒细胞缺陷病,如儿童慢性肉芽肿,髓性过氧化物酶缺乏症等。