组织培养物的继代培养
材料和设备 材料 从培养4-6周的外植体上长出的愈伤组织、丛生芽或胚状体 超净工作台培养基 N 6 +0.5 mg/L 2,4-D N 6 +2 mg/L 6-BA(也可以自已设计) 三角瓶、带有吸水纸的成套的培养皿、镊子、解剖刀 70%酒精、95%酒精及70%的酒精棉球 酒精灯、火柴、记号笔、酒精喷壶 二、方法步骤 1 取材 在无菌室的超净工作台内,每次取一瓶培养物,灼烧 培养瓶 口约20 毫米处,用灼烧冷却后的镊子和解剖刀,取出外植体或者愈伤组织放在无菌的培养皿中。每个培养皿中约放4-6个外植体或者愈伤组织。把每块愈伤组织分成两、三个不小于5 mm见方的小块。外植体下面向着中心的细胞常呈坏死状,不适宜作继代培养。这些坏死的部分应当与正常的部分分离并弃去。每次操作后要去掉用过的吸水纸并重新盖上培养皿的盖子。 2 继代转......阅读全文
组织培养物的继代培养
材料和设备 材料 从培养4-6周的外植体上长出的愈伤组织、丛生芽或胚状体 超净工作台培养基 N 6 +0.5 mg/L 2,4-D N 6 +2 mg/L 6-BA(也可以自已设计) 三角瓶、带有吸水纸的成套的培养皿、镊子、解剖刀 70%酒精、95%酒精及70
常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与...
常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与传代培养法 1)初代消化培养法: 1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液
传代培养法/组织块培养法/初代消化培养常规组织培养法
一、初代消化培养法 1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的
组织培养再生
步骤一:接种组织培养的接种是指将灭过菌的材料,在无菌的情况下,切成小块,放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作,多在无菌室或超净工作台上进行,中学可制作接种箱,在箱内进行接种。接种的方法步骤如下: ①在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、
葡萄组织培养
一、葡萄的形态特征和生物学特性葡萄(Vitis vinifera L.)属落叶木质藤本植物,葡萄地上部分的茎细长柔弱,髓部较大,组织较疏松。节上具有卷须,使新梢可以缠绕其它树木或支架上向上攀援。叶近圆形或卵形,35裂,基部心形。圆锥花序。葡萄是深根性作物,其根系在土壤中的分布状况,随气候、土壤型,地
植物组织培养的培养方法
1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。2、试管组织培养试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培瓶等器皿中在无菌
组织培养培养基配制
①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 ③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,
组织培养常用培养基
组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不同特点,适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时,应对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择使用。培养基中的激素种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料而有变化,因此各配方中均不列入。几种常用培养基如下:MS培养基 MS
植物组织培养的培养条件
(一)温度: 对大多数植物组织20~28℃即可满足生长所需,其中26~27℃最适合。 (二)光: 组织培养通常在散射光线下进行。光的影响可导致不同的结果。有些植物组织在暗处生长较好,而另一些植物组织在光亮处生长较好,但由愈伤组织分化成器官时,则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和
配制组织培养培养基
①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。 ②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 ③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,
植物组织培养的培养步骤
第一步,将采来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小,即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料,可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗,然后再用自来
植物组织培养的培养条件
植物组织培养即植物无菌培养技术,又称离体培养,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)、组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、
植物组织培养过程
一、培养材料的采集组织培养所用的材料非常广泛,可采取根、茎、叶、花、芽和种子的子叶,有时也利用花粉粒和花药,其中根尖不易灭菌,一般很少采用。对于木本花卉来说,阔叶树可在一、二年生的枝条上采集,针叶树种多采种子内的子叶或胚轴,草本植物多采集茎尖。在快速繁殖中,最常用的培养材料是茎尖,通常切块在0.5厘
花卉组织培养技术
实验概要掌握花卉组织培养的基本技术流程。实验原理花卉组织培养,就是分离花卉植物体的一部分,如茎类、茎段、叶、花、幼胚等,在无菌试管,并配合一定的营养、激素、温度、光照等条件,使其产生完整植株。由于其条件可以严格控制,生长迅速,1-2个月即为一个周期,因此在花卉植物的生产上有重要应用价值。快速大量繁殖
兰花的组织培养
法国人莫瑞尔(G.M. Morel)首先将组织培养的技术应用在兰花上,采取茎顶组织进行培养,经由类原球体而获得植株。利用组织培养进行芽体增殖是另一个获取种苗的方法,例如,蝴蝶兰便利用花梗芽进行繁殖,这种方法的缺点是繁殖的效率较差,而且成本较高。由于芽体是经由多细胞发育而成,并不适合做为基因转殖的材料
花卉组织培养技术
一、实验原理 花卉组织培养,就是分离花卉植物体的一部分,如茎类、茎段、叶、花、幼胚等,在无菌试管,并配合一定的营养、激素、温度、光照等条件,使其产生完整植株。由于其条件可以严格控制,生长迅速,1-2个月即为一个周期,因此在花卉植物的生产上有重要应用价值。快速大量繁殖方面:对一些难繁殖的名贵品种花卉
植物组织培养简介
植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论,近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其
马铃薯的组织培养
1、繁殖瓶苗 将待繁脱毒苗在无菌条件下每叶节切一段,接种在仅含大量元素、微量元素和铁盐的无激素MS固体或液体(可用纸桥)培养基的组培瓶中,置培养室内培养。培养条件为:光照1000-3000lx,光周期13-16h/d,培养温度(25±2)℃,空气相对湿度50%-60%,自然通风。叶节段接种30-50
常规组织培养法
一、初代消化培养法1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3、 处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分
植物组织培养的培养步骤介绍
第一步,将采来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小,即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料,可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗,然后再用
植物组织培养的培养优点介绍
占用空间小,不受地区、季节限制。 培养脱毒作物 培养周期短 可用组培中的愈伤组织制取特殊的生化制品 可短时间大量繁殖,用于拯救濒危植物 可诱导之分化成需要的器官,如根和芽 解决有些植物产种子少或无的难题, 不存在变异,可保持原母本的一切遗传特征 投资少,经济效益高 繁殖方式多,
植物组织培养培养方法的特点
1、培养条件可以人为控制组培采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长,摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响,且条件均一,对植物生长极为有利,便于稳定地进行周年培养生产。2、生长周期短,繁殖率高组培是由于人为控制培养条件,根据不同植物不同部位的不同要求而提供不
植物组织培养的培养分类
1、胚胎培养指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。2、器官培养指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养,如根的根尖和切段,茎的茎尖、茎节和切段,叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶,花器的花瓣、雄蕊(花药、花丝)、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。3、组织培养指以
简介植物组织培养的培养方法
1、非试管微组织快繁 非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。 2、试管组织培养 试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培
悬浮细胞应如何继代处理?
一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养瓶中,稀释细胞浓度即可。若培养液太多时可分瓶取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养瓶中,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。
植物组织培养应用介绍
植物组织培养指的是在特定条件下用人工手段是植物细胞分裂增殖的生物学技术。
植物组织培养技术简介
上世纪30年代white首次由番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系,验证了l902年Haberlandt提出的植物细胞全能性的理论。所谓植物细胞全能性就是每个植物细胞就像一粒种子,在适宜条件下具有发育成完整植株的潜力。20世纪50年代——诱导培养银胶菊愈伤组织得到天然橡胶从胡萝卜体 细胞培养
植物的组织培养技术
一. 实验目的: 1. 学习固体培养基的配制; 2. 掌握胡萝卜愈伤组织的诱导方法。 二. 实验原理: 植物组织培养理论依据是植物细胞具有全能性。 植物组织培养是指用无菌培养的方法,在人工制备的培养基上培养植物体的一个离体器官、离体的一种组织,或单个细胞
白鹤芋的组织培养
1、取材与处理取白鹤芋小苗,流水冲洗后,剥掉中下部叶片,剪除根系。在超净工作台上用75%乙醇浸泡30-60秒,再用0.1%升汞溶液消毒3-8分,无菌水冲洗3次,剥取茎尖0.5-1.0CM长,作为外植体,接种在诱芽培养基上(MS+6BA 2-3mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L)。接种后置培养室
植物组织培养的流程
植物组织培养的流程:第一步,将采来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小,即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料,可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣