氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶(SOD)活力
一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物 体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除O2,从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。 二、材料、仪器设备 及试剂 (一)材料;水稻或小麦叶片 (二)仪器设备:1.高速台式离心机;2.分光光度计 ;3.微量进样器;4.荧光灯(反应试管处照度为4000Lx);5.试管或指形管数支。 (三)试剂 1. 0.05mol/L 磷酸缓冲液(pH7.8);2. 130mmol/L 甲硫氨酸......阅读全文
氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶(SOD)活力
一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物 体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2,可
氮蓝四唑(NBT)法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力
一、原理 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶,它催化下列反应: 2O +2H →H O +O 本反应产物H O 可由过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。 本实验依据超氧化物歧化酶抑制
根系活力的测定[TTC法]
植物 根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。 一、 原理 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液,但还原后通过下列反应,生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下: 生成的甲臜呈稳定的红色,不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、
植物根系活力的测定(TTC法)
实验概要植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水平。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。实验原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲瓒,生
α-萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色也
玉米种子活力鉴别法
外观目测法。用肉眼观察玉米种胚形状和色泽。凡种胚凸出或皱缩、显黑暗无光泽的,则种子新鲜,生活力强,可作生产用种。浸种催芽法。先将100粒种子用水浸约两小时吸胀,放于湿润草纸上,盖以湿润草纸,置于氧气充足,室温10——20℃环境中,让种子充分发芽;再以发芽的种子粒数除以100,乘以100%,求得发芽率
植物根系活力测定(α萘胺氧化法)
实验概要掌握用α-萘胺氧化法测定植物根系活力。实验原理植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和代谢水平即根系活力直接影响植物地上部的生长和营养状况以及产量,是植物生长的重要生理指标之一。植物根系能氧化α-萘胺,生成红色的α-羟基-1-萘胺,并沉淀于有氧化能力的根表面,使这部分跟染成红色。根
α-萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色也
α-萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理 吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色
种子生活力的剥皮法快速测定实验
实验方法原理此法适于测定休眠状态的种子的生活力。种子深休眠的原因很多,有些是因为果皮或种皮的束缚(如不透水、不透气)造成的,也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂,这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后,胚就很快萌发。实验材料苹果柑桔玉
种子生活力的剥皮法快速测定实验
实验方法原理 此法适于测定休眠状态的种子的生活力。种子深休眠的原因很多,有些是因为果皮或种皮的束缚(如不透水、不透气)造成的,也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂,这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后,胚就很快萌发。实验材料 苹果柑
种子生活力的剥皮法快速测定实验
实验方法原理:此法适于测定休眠状态的种子的生活力。种子深休眠的原因很多,有些是因为果皮或种皮的束缚(如不透水、不透气)造成的,也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂,这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后,胚就很快萌发。实验材料:苹果
荧光法测种子活力的优缺点
荧光法测种子活力的优缺点:1、优点:在白菜、萝卜等十字花科植物种子上,效果很好。2、缺点:对于衰老死亡后会减弱荧光或失去荧光的种子不适用,对于后一种情况应采用直接观察法。荧光分析法的特点:荧光分析是一种先进的分析方法,它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及,这同荧光分析具有很多
3D细胞活力检测ATP裂解检测法
3D Cell Viability Assay 是基于ATP检测的快速细胞活力检测法,是国内外公认的高灵敏度发光检测法,细胞活力检测的金标准,被广泛应用。试剂盒基于经典CellTiter-Glo® 检测原理,专门为检测3D微组织球的细胞活力而优化。该检测提供的试剂可以高效的渗透至大的细胞球,相比常规
细胞活力测定技术(荧光法和染色法)
用途 在荧光显微镜下可观察到产生荧光的细胞。表明是有活力的;相反,不产生荧光的细胞,表明是无力的。本法利用活原生质体有选择吸收外界的特性,用染料处理时,活原生质体不吸收染料,细胞未染上颜色,而死细胞立即吸附大量染料而染上颜色。(一)荧光法操作步骤荧光法1、制备细胞和原生质体材料。取花药挤压花粉,取幼
细胞活力测定技术(荧光法和染色法)
用 途 在荧光显微镜下可观察到产生荧光的细胞。表明是有活力的;相反,不产生荧光的细胞,表明是无力的。本法利用活原生质体有选择吸收外界的特性,用染料处理时,活原生质体不吸收染料,细胞未染上颜色,而死细胞立即吸附大量染料而染上颜色。操作步骤 (一)荧光法 1. 制备细胞和原生质体材料。取花药挤
琥珀酸脱氢酶活力测定方法MTT法
MTT法MTT是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formazana),经异丙醇作用颗粒溶解显色。在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比,因此可根据光密度570nm处OD值推测出活细胞的数目。
活力染色
实验方法原理各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料排斥实验是一种粗糙的估计细胞活力的方法,无法区别 10%~20%
活力染色
经验交流(0)实验方法原理各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料排斥实验是一种粗糙的估计细胞活力的方法,无法区
活力染色
实验方法原理 各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料
3D细胞活力检测细胞还原电位实时检测法
RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay 是一种非裂解性、均质生物发光法细胞活力检测系统,可检测细胞还原电位继而反应出细胞的代谢情况,实时监测培养基中的活细胞数量。试剂最长可在72小时内保持性能稳定,对活细胞无毒性,无需洗涤细胞,去除培养基,或加入其它试剂,即可完
紫外分光光度法测蛋白酶活力
1、原理 蛋白酶在一定的温度与pH条件下,水解酪素底物,然后加入三氯乙酸终止酶反应,并使未水解的酪素沉淀除去,滤液对紫外光有吸收,可用紫外分光光度法测定。根据吸光度计算其酶活力。酶活单位的定义:每1mL粗酶液,在一定温度和pH值条件下,1min水解酪素产生1ug酪氨酸为一个酶活力单位,以(u/mL)
种子生活力溴麝香草酚兰(BTB)法鉴定实验
实验方法原理:凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用,吸收空气中的O2,同时放出CO2,CO2溶于水生成H2CO3,H2CO3不稳定解离成H+和HCO3-。由于H2CO3不断解离,就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图: 它的变色范围为pH6.0-7.6之间,它
种子生活力溴麝香草酚兰(BTB)法鉴定实验
实验方法原理 凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用,吸收空气中的O2,同时放出CO2,CO2溶于水生成H2CO3,H2CO3不稳定解离成H+和HCO3-。由于H2CO3不断解离,就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图: 它的变色范围为pH6.0-7.6之间,它在酸
种子生活力溴麝香草酚兰(BTB)法鉴定实验
实验方法原理凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用,吸收空气中的O2,同时放出CO2,CO2溶于水生成H2CO3,H2CO3不稳定解离成H+和HCO3-。由于H2CO3不断解离,就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图: 它的变色范围为pH6.0-7.6之间,它在酸性
血清ALP活力测定
在临床上,血清ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。尤其是黄疸的鉴别诊断。1.血清ALP活性升高:见于骨paget病、胆道梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。2.血清ALP活性降低:比较少见,主要见于呆小病,磷酸酶过少症,维生素
细胞活力检测方法
细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标,如药物处理、放射性或紫外线照射、培养条件变化等。细胞活性检测方法有很多种,如台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、、ATP含量测定法、荧光染色法、比色法(MTT法)等。 一、ATP含量测定法---生物发光检测 有