微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验
实验步骤 目前制备全血细胞样品的方法很多,且很成熟,常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,然后进行特异性荧光染色,其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP(免疫学样品处理器)进行快速制备微量全血样品的方法。1. 取肝素或EDTA抗凝全血(100μl/份),置12×75mm专用塑料试管中。2. 每份加入20μl特异性荧光单抗,另一份加入荧光标记的无关单抗作同型对照,室温下避光染色15min。3. 置 Q-PREP 仪上溶解红细胞、稳定和固定白细胞,静置5min。4. 上流式细胞仪检测。 展开......阅读全文
MemGlow™质膜染色荧光探针在膜标记领域的应用(一)
使用荧光探针的质膜染色技术 真核细胞质膜(PM)是脂质双层,组织成一个连续的屏障,将细胞环境与细胞外空间分隔开, 由质膜提供的物理屏障还用作蛋白质的生物支架,这些蛋白质介导信号转导或引发细胞响应(例如Ras 1),以响应细胞表面发生的细胞外事件。除了这些功能,PM
角膜荧光素染色的临床意义及注意事项
临床意义 异常结果:角膜、结膜破损处有嫩绿色着色,上皮完整处不染色。如有角膜瘘,点荧光素后作轻压眼球,可见角膜表面布满黄绿色荧光素,而在瘘管处则有液体流出,状如清泉外流。 需要检查的人群:角膜、结膜上皮损伤或有溃疡患者。 注意事项 不合宜人群:角膜上皮没有损伤或有溃疡者。 检查前禁忌:
免疫荧光染色的详细步骤及应注意的细节
免疫荧光染色方法快捷,灵敏.标本是冰冻切片,还是石蜡切片?切片的厚薄?影响到一抗孵育的时间.选用较佳的一抗的工作浓度.二抗需A液B液在室温混合15分钟后再用.标本需保存在-20度.
免疫荧光染色的详细步骤及应注意的细节
免疫荧光染色方法快捷,灵敏.标本是冰冻切片,还是石蜡切片?切片的厚薄?影响到一抗孵育的时间.选用较佳的一抗的工作浓度.二抗需A液B液在室温混合15分钟后再用.标本需保存在-20度.
免疫荧光非特异性染色的消除方法
一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。 (3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗
核酸荧光染色技术在血液分析仪的最新应用
一概述 目前,五分类血液分析仪已经为许多大中型医院实验室所使用。五分类仪器不同于三分类仪器的主要区别在于:为了精确定量地检测白细胞的五种成份,各种五分类血液分析仪开始采用多种物理学原理(电阻抗、光散射、高频波技术),甚至设置专用检测通道和化学染色方法检测数目最少的嗜酸、嗜碱性粒细胞。 而高档次的
关于检测染色体和染色体组畸变—荧光原位杂交(FISH)技术的基本介绍
荧光原位杂交最早由Bauman(1980)建立,后由Lucas(1989)首先应用于染色体畸变分析。其原理是按检测目标准备恰当的DNA序列作为探针,并用生物素标记,对载玻片上待测标本中的DNA杂交,最后通过杂交位点的荧光观察染色体结构或数目的改变。应用特殊染色体和染色体某区域的荧光探针可在体内检
蓝色荧光染色体核型分析试剂盒使用说明
主要用途YIJI蓝色荧光(DAPI)染色体核型分析试剂是一种旨在通过使用荧光染料DAPI与染色体DNA的结合并发出荧光检测信号来显示染色体带型特征而构成细胞染色体核型的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。该荧光分析是细胞遗传学中的最新研究技术。适用于各种生长中的动物或人体细胞。
免疫荧光非特异性染色的消除方法(一)
一、非特异性染色的主要因素组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点:(1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。(2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。(3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forss
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:补体法原理和操...
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:补体法原理和操作指南一、原理与意义免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——补体法,是一种荧光抗体染色法。本法之荧光抗体不受免疫血清的动物种属的限制,因而一种荧光抗体可作更广泛的应用,敏感性亦较间接法高,效价低的免疫血清亦可应用,节省免疫血清,尤其是对检查形态小的如立克氏
细胞支原体污染的荧光检测方法:DNA萤光染色法
DNA萤光染色法 ·原理︰利用萤光染剂(bisbenzimide, Hoechst 33258)侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染
免疫细胞化学染色和免疫荧光有什么区别
同志这不是化学范畴的immunofluorescence technic又名免疫荧光种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称
血小板的活化、荧光染色与流式细胞仪分析
前言血小板活化试验,对于血小板功能、心血管疾病的研究,有重要意义。使用流式细胞仪进行多参数分析,可以特异灵敏地检测血小板表面标记,了解血小板的活化状态和反应性,并同时获得更多关于血小板的信息。在疾病监测、抗血小板治疗病人的筛选及治疗监测、预测并发症等方面有良好的应用前景。使用推荐的三色流式分析方法检
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法原理和操...
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法原理和操作流程一、原理与意义免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——直接法,是一种荧光抗体染色法。该方法比较简单,适合做细菌、螺旋体、原虫、真菌及浓度较高的蛋白质抗原如肾、皮肤的检查和研究。此法每种荧光抗体只能检查一种相应的抗原,特异性高而敏感性较低。二、操作流程
免疫细胞化学染色和免疫荧光有什么区别
同志这不是化学范畴的immunofluorescence technic又名免疫荧光种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称
免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果
免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果
蓝色荧光染色体核型分析试剂盒使用说明
YIJI蓝色荧光染色体核型分析试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 YIJI蓝色荧光(DAPI)染色体核型分析试剂是一种旨在通过使用荧光染料DAPI与染色体DNA的结合并发出荧光检测信号来显示染色体带型特征而构成细胞染色体核型的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
蓝色荧光细胞核染色分析试剂盒使用说明
主要用途YIJI蓝色荧光细胞核染色分析试剂是一种旨在通过使用荧光染料DAPI与细胞核DNA特异性结合,并发出荧光检测信号,用于分析和观察细胞核形态或DNA含量以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞核(动物、人体、植物、昆虫等)的观察。产
免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果
免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果
免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果
血小板的活化、荧光染色与流式细胞仪分析
前言血小板活化试验,对于血小板功能、心血管疾病的研究,有重要意义。使用流式细胞仪进行多参数分析,可以特异、灵敏地检测血小板表面标记,了解血小板的活化状态和反应性,并同时获得更多关于血小板的信息。在疾病监测、血小板疾病患者的筛选、预测并发症等方面有良好的应用前景。使用推荐的三色流式分析方法检测血小板活
免疫荧光非特异性染色的消除方法(二)
(二)透析法荧光素如FITC 分子可以通过半透膜,而蛋白质大分子不能透过,可将未与蛋白结合的荧光素透析除去。(1)将标记完毕的荧光蛋白液装入一透析袋或玻璃纸袋内,液面稍留空隙,紧扎。(2)浸入0.02mol/L PH 7.1~7.4的PBS中(悬于大于标记物体积约50~100倍的PBS内),在4℃中
微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备
实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血(100μl/份),置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体(一抗),室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞,稳定和固定白细胞。4. 离心(800~1000rpm,5min)弃上清液,用PBS洗涤细胞2次。5. 加入
光镜下双/多重免疫标记实验——双重免疫荧光染色
实验步骤1. 古兹菲德-雅各氏病(CJD)病人的尸解脑组织,4% 中性甲醛固定,石蜡包埋,连续切片,厚 5 μm(贴片前的载玻片应预涂不含有荧光色素的黏合剂)。2. 常规脱蜡,水化。3. 抗原修复(柠槺酸盐缓冲液 pH 6.0 中,高压灭菌器加热 100℃,20 min)及 96% 甲酸孵育 2 m
糖类染色实验——糖原染色
实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水