原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观察原代细胞均可。吖啶橙对活原代细胞毒性小,配成1×10-4—2×10-4可用于直接染色活原代细胞和进行荧光显微镜观察,但不持久,用固定染色观察法效果更好。 材料:1. 盖片单层培养原代细胞;2. 固定剂:95%乙醇或乙酸/甲醇(现配);3. 吖啶橙:用生理盐水配成1%的干液。使用时再用PBS稀释成1×10-4—2......阅读全文

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法

基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观

流式细胞仪技术

测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光,经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器,光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数字化后而成整数,以调出显示和进行分析。一、样品的制备细

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5.

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5.

原代细胞甲基绿哌咯宁法显示DNA和RNA

基本原理:甲基绿(methyl green)和哌咯宁(pyronin)均为碱性染料,因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷,易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷,易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理

原代细胞甲基绿哌咯宁法显示DNA和RNA

基本原理:甲基绿(methyl green)和哌咯宁(pyronin)均为碱性染料,因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷,易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷,易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理

原代贴壁细胞吉姆萨染色法

原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备:1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;5. 取9份pH6.80—7.38的Sorense

原代贴壁细胞吉姆萨染色法

原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备:1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;5. 取9份pH6.80—7.38的Soreen缓

细胞支原体污染的荧光检测方法:DNA萤光染色法

DNA萤光染色法 ·原理︰利用萤光染剂(bisbenzimide, Hoechst 33258)侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染

吖啶橙荧光染色

【临床意义】  红细胞系统细胞核发深绿色荧光。原始红细胞有时可看到粉红色核仁。粒细胞系统细胞核发黄绿色荧光。原始粒细胞有时也可看到粉红色的核仁。但嗜酸性粒细胞的细胞核发深绿色荧光,比红细胞系统还要深一些。  淋巴细胞核的荧光稍带灰绿色。  各系统细胞的胞浆内因含有核糖核酸(RNA),所以均发红色荧光

关于吖啶橙的基本信息介绍

  吖啶橙,化学名称为3,6-二(二甲基胺)吖啶、溶剂橙15,是一种有机化合物,化学式为C17H19N3,是一种荧光色素,主要用作荧光指示剂,与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA结合量少发绿色荧光,与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光,该染料具有膜通透性,能透过细胞膜

关于吖啶橙的基本介绍

  吖啶橙(Acridine Orange)3,6-(二甲胺基)吖啶盐酸盐,分子式C17H19N3 · HCl · ZnCl₂, 分子量438.12g/mol,是一种荧光色素,其检测激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与D

吖啶橙的主要用途

主要用作荧光指示剂,与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA结合量少发绿色荧光,与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光,该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此,在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中

关于吖啶橙的基本用途介绍

  主要用作荧光指示剂,与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA结合量少发绿色荧光,与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光,该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此,在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细

关于吖啶橙的主要用途介绍

  用作荧光指示剂,肿瘤细胞及细菌、核酸染色剂及移码突变的诱变剂。  吖啶橙是一种荧光色素,吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光(即着色特异性),这是由于DNA是个高度聚合物,吸收荧光物质的位置较少,发绿色荧光,而

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

  流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进

原代细胞免疫荧光鉴定步骤

为了更好的帮助客户提供真实的原代细胞,使用免疫荧光鉴定出提取的细胞类型,免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。 一下是赛百慷技术人员提供的免疫荧光细胞鉴定的步骤,仅做

细胞凋亡检测:形态学特征的检测方法2

二、透射电子显微镜观察方法培养细胞的取材和固定1、常规收集帖壁和悬浮细胞,置离心管中离心, 800 ~ 1000r/min , 10min 。2、用 0.01mol/L PBS 5ml 重悬细胞。3、将细胞悬液吸入有琼脂空槽的离心管中。4、离心, 2000r/min , 15 ~ 20min ,使细

目前细胞计数的常用方法

Countstar自动细胞计数仪技术特点:1.宽泛的样本检测范围:测量浓度范围:1×104—3×107/ml;直径范围:5-180µm,可检测各种传代细胞及原代细胞,干细胞,藻类,浮游生物,酵母细胞,白细胞等。2.经济节约的配套耗材成本:每个样品测量盘可检测5个样品,提供实验结果的平行性及可重复性检

原代细胞分离与培养

对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实是个

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色

AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染色

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

实验方法原理苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。实验材料细胞样品试剂

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。 配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

            实验方法原理 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或

培养细胞的染色实验——吖啶橙染色荧光观察法

实验方法原理吖啶橙(Acridine Oringe:AO)是一种常用荧光染料,用于直接染色观察活细胞或固定染色观察细胞均可。吖啶橙对DNA和RNA都能染色,快速、简便和有一定的特异性。吖啶橙对活细胞毒性小,配成2×10-4~1×10-4 可用于直接染色观察法更好。实验材料细胞试剂、试剂盒酒精PBSC

阴道加德纳菌四种临床检测方法的比较

 一、材料和方法  1.临床标本:50份宫颈分泌物,取自西京医院门诊妇产科就诊的非特异性阴道炎(NSV)患者,常规消毒用无菌棉签自宫颈口取分泌物于无菌生理盐水管中。  2.革兰染色法:取无菌生理盐水中的宫颈或阴道分泌物直接涂片,常规革兰染色,找到线索细胞者为阳性。  3.吖啶橙染色荧光法[1]:取无