MemGlow™质膜染色荧光探针在膜标记领域的应用(一)
使用荧光探针的质膜染色技术 真核细胞质膜(PM)是脂质双层,组织成一个连续的屏障,将细胞环境与细胞外空间分隔开, 由质膜提供的物理屏障还用作蛋白质的生物支架,这些蛋白质介导信号转导或引发细胞响应(例如Ras 1),以响应细胞表面发生的细胞外事件。除了这些功能,PM还通过释放和接收被称为细胞外囊泡(EVs)2的封装生物分子,充当细胞间枢纽。质膜的诸多重要作用,使得通过荧光标记质膜来研究质膜功能变得越来越普遍。 今天给大家总结一下常用荧光膜探针的优缺点,并概述了最新膜探针突破,发光膜探针通过结合在质膜附近或质膜内来描绘细胞的外围。平常我们用的最多的有五类膜探针:小麦胚芽凝集素(WGA)偶联物,脂质偶联物,亲脂性染料,共价结合探针和生物物理报告探针,下面我们来对这五种常见探针做一个简要介绍: ......阅读全文
MemGlow™质膜染色荧光探针在膜标记领域的应用(一)
使用荧光探针的质膜染色技术 真核细胞质膜(PM)是脂质双层,组织成一个连续的屏障,将细胞环境与细胞外空间分隔开, 由质膜提供的物理屏障还用作蛋白质的生物支架,这些蛋白质介导信号转导或引发细胞响应(例如Ras 1),以响应细胞表面发生的细胞外事件。除了这些功能,PM
MemGlow™质膜染色荧光探针在膜标记领域的应用(二)
MemGlow™应用程序很简单,当将MemGlow™探针引入水性介质中时,两亲性探针会形成自发淬灭性的聚集体,直到与质膜的接触引发其解离并分散到脂质双层中。整合后,荧光探针即可进行生物成像。从MemGlow™488到MemGlow™700,MemGlow™探针产生的信噪比分别为20
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用
众所周知,氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品,以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害,我们把这种损害称为氧化应激,人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子,ROS是需氧细胞在代谢过程中产生
共聚焦荧光探针标记方法
(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、M
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用介绍
众所周知,氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品,以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害,我们把这种损害称为氧化应激,人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子,ROS是需氧细胞在代谢过程中
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用介绍
众所周知,氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品,以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害,我们把这种损害称为氧化应激,人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子,ROS是需氧细胞在代谢过程中
标记抗体、配体等常用的荧光探针
标记抗体、配体等常用的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜不仅可用免疫荧光分析固定的细胞或组织切片,还可用于分析活细胞,得到特异性抗体或其他荧光免疫探针识别靶分子的表达、定位、分布变化等信息。标记抗体、配体或蛋白质等较通用的有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC
细胞骨架的荧光探针标记方法
细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT),微丝(microfilament, MF),中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组
应用非标记探针法进行基因分型(一)
RET原癌基因单个碱基的突变可以引发多发性内分泌腺瘤2型。RET突变传统的基因分型方法是外显子测序。一种闭管操作的基因分型方法已经成熟,此方法用的是一种饱和DNA染料,非标记探针及高分辨率熔解扩增子分析。此方法需要两个连续的聚合酶链式反应阶段,主要的和第二次实验。主要的实验共用7个反应和8个非标记探
荧光探针标记基团fam和hex的区别
TAMRA和BHQ和引物关系不大,这个是淬灭基团。TAMRA主要淬灭FAM,HEX,VIC的荧光BHQ有3种BHQ1、BHQ2和BHQ3,其中BHQ1和TAMRA的淬灭波长相近引物设计和淬灭基团关系不大
我国学者在遗传编码荧光探针领域取得进展
在国家自然科学基金青年科学基金项目(C类)(批准号:32201235)等资助下,福建医科大学付志飞团队与合作者在遗传编码荧光探针研究方面取得进展,相关研究以“一个超稳定单体红色荧光蛋白用于前沿成像技术(A highly stable monomeric red fluorescent prote
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(一)
如何免除活细胞标记中的清洗(washout)步骤?SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化,也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞,才能将未结合的BG去除从而消
细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法
实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱(HT)是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病,
荧光标记基团的选择及其在荧光定量PCR中的应用
PCR实验室产品选择指南 荧光 基团是吸收一定波长的光子后发射特定波长的光波,可以作为抗体等分子的标记物,实时荧光定量PCR中的Taqman探针常用荧光基团FAM标记荧光基团和TAMRA标记。 荧光基团 吸收特定波长的光子后荧光染料(通常称为“荧光基团”或简称为“荧光素”)的化
荧光探针的分类及应用
受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为
色差仪在纸张染色和调色领域的应用
色差仪在纸张染色和调色领域的应用: 纸张染色的三种原色为红、黄、蓝,由这三种原色按不同的比例调配,可以获得不同色彩的间色或辐射。间色是两种原色的混合,如红与黄混合为橙色,红与蓝混合称为紫色。 而复色是由两种间色混合而成,如橙色与绿色混合便成橙黄以至嫩绿色。欲要得到所希望的色相,
色差仪在纸张染色和调色领域的应用
色差仪在纸张染色和调色领域的应用: 纸张染色的三种原色为红、黄、蓝,由这三种原色按不同的比例调配,可以获得不同色彩的间色或辐射。间色是两种原色的混合,如红与黄混合为橙色,红与蓝混合称为紫色。 而复色是由两种间色混合而成,如橙色与绿色混合便成橙黄以至嫩绿色。欲要得到所希望的色相,
徕卡TauSense技术在自发荧光领域的应用
自发荧光搞不定?染料pick不自由?徕卡TauSense技术让您选择无忧 徕卡显微系统 王浩甲荧光显微成像技术对生命科学的研究起到了巨大的推进作用,但自发荧光信号往往会对成像结果造成非常大的干扰(图1)。常规的解决方法主要是通过改进制样流程和调节成像参数来进行优化,但这些方法只能起到部分的改善作用
核酸探针标记
实验概要核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。实验原理分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因
PCR荧光标记选择探针法还是染料法?
特异性荧光标记——探针法: 是目前临床最常用的方法,在加入一对引物的同时再加入一对探针,特异性好,这里列举的是TaqMan水解探针:一段与靶基因特异性结合的序列,分别在5’端加入荧光报告基团,3’端加入荧光淬灭基团。其核心是利用taq酶的5’-3’外切酶活性切断探针,使得使荧光报告基团和荧
免疫金标记技术在体外诊断领域的应用
生产企业必须能够克服大量的技术难题才能制备出能应用于诊断领域的免疫金复合物。免疫金标记技术是一种将胶体金颗粒与包括抗原、抗体在内的许多蛋白质标记形成免疫金复合物的技术。虽然这种免疫金标记技术呈 现出多种多样的应用方式,但目前主要应用是以快速检测试纸盒的形 式使用于疾病的诊断和监测。1在过去的十年里,
PCR扩增标记法探针标记
PCR扩增标记法探针标记 PCR扩增标记法的原理与普通的核酸PCR相同。即Taq DNA多聚酶以DNA为模板,在特异引物引导下,在PCR仪中合成cDNA探针。由于在反应体系中加入一定量的标记dNTP,因此扩增的同时又是一个标记过程。cDNA探针PCR扩增法标记原理
锌离子荧光染料探针的应用
锌离子在许多生理和病理过程中都起到至关重要的作用,因此对锌离子进行探测和识别有重要理论和实际意义。荧光探针因其设计简单、易于操作、灵敏度高、可细胞成像等诸多优点而广泛应用于锌离子的识别研究。锌是生物中含量第二高的过渡金属(仅次于铁), 大脑中大多数Zn 2+紧密结合,因此细胞外和细胞内的游离Zn 2
同位素标记的探针和非同位素标记的探针的特点和应用
同位素标记的探针通常有很高的放射比活性,杂交的灵敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物处置困难,需要特殊的仪器和设备,不适用于普通实验室。近年来非同位素标记法得到很大发展,如酶促标记法(如生物素、地高辛标记法)和化学标记法(如荧光生物素、酶标记法)。非同位素标记的探针保存时间较长、避免了同位素
免疫荧光标记的应用
半个多世纪以来,经过许多学者不断改进和发展,使此项技术成为微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。
新型荧光蛋白探针有望在医疗健康等领域发挥作用
荧光蛋白探针因其本身属于蛋白,具有比普通化学类荧光探针更好的生物相容性,同时兼具高灵敏度、高特异性、使用方便等优势,因而在医疗健康等领域具有巨大应用潜力。近日,大连理工大学刘波教授团队基于荧光蛋白技术研发了系列新型探针,连续两篇论文发表在ACS Sensors上。 在生物医学研究中,间充质干细
荧光的应用领域
照明荧光灯常见的荧光灯就是一个例子。 灯管内部被抽成真空再注入少量的水银。灯管电极的放电使水银发出紫外波段的光。这些紫外光是不可见的,并且对人体有害。所以灯管内壁覆盖了一层称作磷(荧)光体的物质,它可以吸收那些紫外光并发出可见光。可以发出白色光的发光二极管(LED)也是基于类似的原理。由半导体发出的
核酸探针标记的简介
核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。
关于探针标记的简述
探针是能与特异靶分子反应并带有供反应后检测的合适标记物的分子。利用核苷酸碱基顺序互补的原理,用特异的基因探针即识别特异碱基序列的有标记的一段单链DNA(或RNA)分子,与被测定的靶序列互补,以检测被测靶序列的技术叫核酸探针技术。探针制备就是将目的基因进行标记。特异性探针有三种形式——cDNA、R
地高辛对探针的标记
实验概要本实验拟通过随机引物及PCR方法,将DNA探针片段用DIG标记,进一步掌握探针的标记技术。实验原理带有地高辛标记的dUTP(图1)通过缺口翻译、随机翻译或PCR等反应而使探针核酸片段带有地高辛,进一步可与带有AP、CSP等各种抗地高辛抗体复合物发生免疫反应,使探针上带有AP等分钟,进一步能催