还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的测定
GSH和GSSG 参照 Anderson等 (1992)。取0.5 g样品,加入3 mL冰冷的6%的偏磷酸(含1 mmol•L-1 EDTA , pH 2.8),冰浴研磨,匀浆液以20,000 g,4 ℃离心15 min,取上清液来马上测定GSH和GSSG的含量或储存在-20 ℃下等待测定。总的GSH和GSSG含量测定如下:200 μL提取液加 1.2 mL反应液包含400 μL反应液1(110 mmol•L-1 Na2HPO4•7H20, 40 mmol•L-1 NaH2PO4•H2O, 15 mmol•L-1EDTA, 0.3 mmol•L-1 5,5‘-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid) DTNB, 0.04% BSA)、320 μL反应液2 (1 mmol•L-1 EDTA, 50 mmol•L-1 imidazole 咪唑solution and 0.02% BSA)、 ......阅读全文
试剂盒相关报道:人(GSSG)酶联免疫分析
“人氧化型谷胱甘肽(GSSG)” 特点:1. 准确度高,灵敏度高,特异性强2. 检测时间短3. 操作简便4 安全可靠;含税含运费,提供免费代测及技术指导,欢迎咨询。本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T1.5 nmol/mL - 50 nmol/mL人氧化型谷胱甘肽试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液
人谷胱甘肽(GSH)酶联免疫说明
本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T3ng/L - 95ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中谷胱甘肽(GSH)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本
人谷胱甘肽-(GSH)ELISA试剂盒
人谷胱甘肽 (GSH)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 GSH 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GSH与单抗结合,加入生物素化的抗人GSH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid
包涵体(inclusion-body)表达的蛋白的复性2(一)
还原剂:由于蛋白间二硫键的存在,在增溶时一般使用还原剂。还原剂的使用浓度一般是50-100mM2-BME或DTT,也有文献使用5mM浓度。在较粗放的条件下,可以使用5ml/l的浓度。还原剂的使用浓度与蛋白二硫键的数目无关,而有些没有二硫键的蛋白加不加还原剂无影响,如牛生长激素包涵体的增溶。对于目标蛋
包涵体的实验方法
1、机械破碎2、超声破碎3、化学方法破碎 可以破坏蛋白的次级键从而增溶蛋白。如有人在pH>9.0溶解牛生长激素和牛凝乳蛋白酶包涵体。有些蛋白可以溶解在60mMHCl中。这些方法只适合于少部分蛋白的增溶。变性剂的使用浓度和作用时间:一般在偏碱性性的环境中如pH8.0-9.0,尿素在碱性环境中不稳定,一
GSHPx酶系的主要种类
主要包括4种不同的GSH-Px,分别为胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。胞浆GSH-Px由4个相同的分子量大小为22kDa的亚基构成四聚体,每个亚基含有1个分子硒半胱氨酸,广泛存在于机体内各个组织,以肝脏红细胞为最多。它的生理功能主要是催化GS
人谷胱甘肽(GSH)试剂盒技术原理
检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本谷胱甘肽(GSH)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷胱甘肽(GSH)水平。用纯化的人谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
人谷胱甘肽(GSH)试剂盒技术原理
人谷胱甘肽(GSH)试剂盒技术原理 本文由:樊克生物专业技术人员提供!本试剂盒仅供研究使用。 检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本谷胱甘肽(GSH)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹
简述中毒性高铁血红蛋白血症的发病机制
红细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)有保护红细胞膜上巯基和血红蛋白免受氧化剂的损害。当红细胞受氧化剂影响,产生多量的过氧化氢(H2O2)时,GSH则在谷胱甘肽过氧化物酶催化作用下使H2O2分解为H2O,而其本身转化为氧化型谷胱甘肽(图20-10)。磷酸戊糖旁路在葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)和6-
高铁血红蛋白血症的发病机制介绍
红细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)有保护红细胞膜上巯基和血红蛋白免受氧化剂的损害。当红细胞受氧化剂影响,产生多量的过氧化氢(H2O2)时,GSH则在谷胱甘肽过氧化物酶催化作用下使H2O2分解为H2O,而其本身转化为氧化型谷胱甘肽(图20-10)。磷酸戊糖旁路在葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)和6-
包涵体的纯化5
还原剂: 由于蛋白间二硫键的存在,在增溶时一般使用还原剂。还原剂的使用浓度一般是50-100mM2-BME或DTT,也有文献使用5mM浓度。在较粗放的条件下,可以使用5ml/l的浓度。还原剂的使用浓度与蛋白二硫键的数目无关,而有些没有二硫键的蛋白加不加还原剂无影响,如牛生长激素包涵体的增溶。对于目标
包涵体的纯化和复性总结2
8、包涵体复性液配方 对于包涵体复性,一般在尿素浓度4M左右时复性过程开始,到2M 左右时结束。对于盐酸胍而言,可以从4M开始,到1.5M 时复性过程已经结束。TRIS系统和PBS系统都没有明确的规定,这些需要你在实验过程中不断试验,确定合适的缓冲系统;不过复性过程主要是注意以下几个问题: 1)最适
黄青课题组:表面增强拉曼光谱技术引入到辐射生物学分析
电离辐射作用于生物可产生丰富的生物学效应。研究生物分子在电离辐射条件下结构和功能变化是理解辐射生物学效应及其早期生物过程的关键。目前,辐射生物光谱检测存在两个亟待解决的问题:一是在生物体内,对少量生物分子实现高灵敏光谱检测,二是在生物分子化学反应过程中,对含混合物的复杂体系进行光谱定性和定量分析
表面增强拉曼光谱技术引入到辐射生物学分析
电离辐射作用于生物可产生丰富的生物学效应。研究生物分子在电离辐射条件下结构和功能变化是理解辐射生物学效应及其早期生物过程的关键。目前,辐射生物光谱检测存在两个亟待解决的问题:一是在生物体内,对少量生物分子实现高灵敏光谱检测,二是在生物分子化学反应过程中,对含混合物的复杂体系进行光谱定性和定量分析。中
大鼠谷胱甘肽-(GSH)ELISA试剂盒使用说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 GSH 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GSH与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GSH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值
Nano-Today:亚铁与多硫协同诱发细菌铁死亡及抗菌应用
近日,中国科学院生物物理研究所/中科院纳米酶工程实验室高利增课题组等以Nano-decocted ferrous polysulfide coordinates ferroptosis-like death in bacteria for anti-infection therapy为题在Nan
包涵体的纯化2
1.2.7重组融合蛋白的纯化 PrP-pET-32a(+)转化表达菌E.coli BL21(DE3),TB培养基中,25℃,AMP 200 ug/ml,摇床(250 r/min)培养至OD600约为1.5,更换等体积新鲜TB培养基,加入IPTG至终浓度1 mM,AMP 200 ug/ml,25℃,4
临床化学检查方法介绍红细胞谷胱甘肽(GSH)及稳定试验
红细胞还原型谷胱甘肽(GSH)及稳定试验介绍: 葡萄糖-6-磷酸葡萄糖脱氧酶(G-6-PD)缺乏时,作为谷胱甘肽还原酶的辅酶NADPH生成不足,因而红细胞的GSH生成减少,稳定性下降,测谷胱甘肽的量,能间接反映出G-6-PD的量。红细胞还原型谷胱甘肽(GSH)及稳定试验正常值:
生化检测项目红细胞还原型谷胱甘肽(GSH)及稳定试验
红细胞还原型谷胱甘肽(GSH)及稳定试验介绍: 葡萄糖-6-磷酸葡萄糖脱氧酶(G-6-PD)缺乏时,作为谷胱甘肽还原酶的辅酶NADPH生成不足,因而红细胞的GSH生成减少,稳定性下降,测谷胱甘肽的量,能间接反映出G-6-PD的量。红细胞还原型谷胱甘肽(GSH)及稳定试验正常值:
关于还原型谷胱甘肽的药理作用介绍
谷胱甘谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸及甘氨酸组成的一种三肽,它是甘油醛酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及磷酸丙糖脱氢酶的辅酶,参与体内三羧酸循环及糖代谢,使人体获得高能量。谷胱甘肽能激活多种酶,如体内的巯基(-SH)酶、辅酶等,从而促进糖类、脂肪及蛋白质代谢,也能影响细胞的代谢过程,是一种细胞内重要的调
包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性
蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体:包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。包涵体的组成与特性:一般含有50%以
小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)elisa试剂盒使用说明书
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)水平。用纯化的小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入还原型谷胱甘肽(GSH),再与HRP标记的还原型谷胱甘肽(GSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TM
-慢性阻塞性肺病:运动不一定有益
慢性阻塞性肺病(COPD)情况复杂,表现为慢性咳嗽,患者的痰可以反映出其气道炎症,更重要的表现为多处肺泡受损,气流受限,之后还会确诊出全身性炎症和肌肉萎缩等肺外位反应。COPD的炎症涉及了众多不同的细胞和分子,其程度和严重性可以通过测量氧化应激和炎症介质、急性期蛋白的浓度进行估计。 举例来说,
大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)ELISA检测法
(用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 GSH-Px 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GSH-Px与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GSH-Px,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,
拟南芥转基因植株PCs含量的测定
实验概要本实验测定了转基因拟南芥总谷胱甘肽(GSH)含量、非蛋白巯基(NPT)含量。主要试剂200 uM CdSO4,5% sulfosalicylic acid(含6. 3 mM diethylenetriaminepentaacetic acid ),Co-enzyme working
红细胞还原型谷胱甘肽及稳定试验检查作用
红细胞还原型谷胱甘肽(GSH)及稳定试验测定对红细胞G-6-PD缺乏的诊断有参考意义。异常结果:正常人红细胞加入氧化药物乙酰苯肼,保温后,并不影响其GSH含量,但G-6-PD缺乏者,GSH含量明显下降。红细胞G-6-PD缺乏者显著减少,一般女性杂合子可下降50%左右;男性患者明显减少,可达90%
人谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)酶联免疫分析
人谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)水平。用纯化的谷胱甘
人谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)ELISA试剂盒
人谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 GSH-Px 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GSH-Px与单抗结合,加入生物素化的抗人GSH-Px,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧
体外肝细胞损伤模型建立(CCl4和H2O2)
1 大鼠肝细胞的分离和培养 大鼠4%戊巴比妥麻醉,门静脉插管,先以无钙灌流液灌流,继以37℃通入O2的Ⅳ型胶原酶灌流液继续循环灌流15 min。将肝脏移至一平皿内,轻轻撕去肝包膜后,加入含5%小牛血清的清洗液,用吸管吹打成单个肝细胞悬液,200目尼龙网过滤,低速离心(500 r·min-1,1 mi
谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的分类和生理功能
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶 GSH-Px酶系主要包括4种不同的GSH-Px,分别为:胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。 第一种:胞浆GSH