常规组织培养法
一、初代消化培养法1、 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3、 处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4、 剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。5、 消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。6、 分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/min）离心消化液......阅读全文
组织培养常用术语介绍（二）
随着细胞培养日益广泛地被各学科、众多的科学工作者所采用，不可避免地会在正确理解和使用各种术语上出现混乱，因此，在系统学习细胞培养之前，有必要将有关术语含义介绍如下：1.In vitro malignant transformation（体外恶性转化）2.In vitro transformation
鸟巢蕨的组织培养
1 植物名称：鸟巢蕨（Asplenium nidus)又名山苏花、雀巢蕨、雀巢养齿。2 材料类别：孢子。3 培养条件：孢子萌发及原叶体形成的培养基 （1）MS0。丛芽分化及增殖培养基 （2）MS+6-BA 0.5MG/L（单位下同）+IBA 0.2
组织培养培养基配制
①根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量，放入同一烧杯中，并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。②将①中称好的琼脂加蒸馏水300～400毫升，加热并不断搅拌，直至煮沸溶解呈透明状，再停止加热。 ③将①中所取的各种物质（包括蔗糖），加入煮好的琼脂中，再加水至1000毫升，搅拌均匀，
如何消除组织培养的污染？
当重要的培养细胞污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使
组织培养常用术语介绍（一）
随着细胞培养日益广泛地被各学科、众多的科学工作者所采用，不可避免地会在正确理解和使用各种术语上出现混乱，因此，在系统学习细胞培养之前，有必要将有关术语含义介绍如下：1.Anchorage-dependent cells or cultures （停泊或贴壁依赖性细胞或培养物）2.Apoptosis（
植物组织培养的培养条件
植物组织培养即植物无菌培养技术，又称离体培养，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）、组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、
植物无糖组织培养技术
植物无糖组培快繁技术（Sugar-free micropropagation）又称为光自养微繁殖技术（Photoautotrophic micropropagation）是指在植物组织培养中改变碳源的种类，以CO2代替糖作为植物体的碳源，通过输入CO2气体作为碳源，并控制影响试管苗生长发育的环境因子
包被组织培养板制备实验
实验材料刀豆蛋白A试剂、试剂盒磷酸缓冲液（PBS）仪器、耗材6 孔 35 mm 组织培养板无菌塑料袋（用于保存包被板）实验步骤1. 将 12 mg 刀豆蛋白 A 加入 120 ml 无菌的 PBS 中，至终浓度为 100 μg/ml。2. 在组织培养板的每孔中加入 1 ml PBS/刀豆蛋白 A 混
植物无糖组织培养技术
植物无糖组培快繁技术（Sugar-free micropropagation）又称为光自养微繁殖技术（Photoautotrophic micropropagation）是指在植物组织培养中改变碳源的种类，以CO2代替糖作为植物体的碳源，通过输入CO2气体作为碳源，并控制影响试管苗生长发育的环境因子
植物组织培养材料与方法
从低等的藻类到苔藓、蕨类、种子植物等高等植物的各类、各部分都可采用作为组织培养的材料，一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞，被子植物采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分。由于植物在自然条件下，表面常被霉菌和细菌污染，故材料必须进行灭菌处理。一般用漂白粉溶液（
配制组织培养培养基
①根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量，放入同一烧杯中，并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。 ②将①中称好的琼脂加蒸馏水300～400毫升，加热并不断搅拌，直至煮沸溶解呈透明状，再停止加热。 ③将①中所取的各种物质（包括蔗糖），加入煮好的琼脂中，再加水至1000毫升，
植物组织培养的培养条件
（一）温度： 对大多数植物组织20～28℃即可满足生长所需，其中26～27℃最适合。 （二）光： 组织培养通常在散射光线下进行。光的影响可导致不同的结果。有些植物组织在暗处生长较好，而另一些植物组织在光亮处生长较好，但由愈伤组织分化成器官时，则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和
包被组织培养板制备实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 刀豆蛋白A
组织培养常用术语介绍（二）
随着细胞培养日益广泛地被各学科、众多的科学工作者所采用，不可避免地会在正确理解和使用各种术语上出现混乱，因此，在系统学习细胞培养之前，有必要将有关术语含义介绍如下： 1.In vitro malignant transformation（体外恶性转化） 2.In vi
组织培养常用术语介绍（一）
组织培养常用术语(一) 随着细胞培养日益广泛地被各学科、众多的科学工作者所采用，不可避免地会在正确理解和使用各种术语上出现混乱，因此，在系统学习细胞培养之前，有必要将有关术语含义介绍如下： 1.Anchorage-dependent cells or cultures （停泊或贴壁
包被组织培养板制备实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 刀豆蛋白A
罗汉果的组织培养
罗汉果为我国特有的药用植物，属葫芦科苦瓜属。是我国特有的保健药材，由于它的果实、种子、叶有清热凉血、润肺止咳及润肠通便之功效，在治疗肺病、慢性气管炎、咽喉炎、便秘等多方面都有很好的疗效，深受人们的喜爱。罗汉果营养价值丰富，干果含糖30%左右，蛋白质10%左右，每100克果实中含有维生素C 100毫克
植物组织培养有哪些特点？
1、培养条件可以人为控制 组培采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。 2、生长周期短，繁殖率高 组培是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的
植物组织培养的相关介绍
1、试剂 乙醇。 吲哚乙酸（ IAA） 或 2 ，4 – D （生长素类似物）。 氯化汞（升汞）或次氯酸钠。 6 -苄基氨基腺嘌呤（ 6-BA ） MS 培养基 0.1 mol/L NaOH与 0.1 mol/L HCl 2、配制培养基 （1）愈伤组织诱导培养基： MS 培养基（
组织培养的过程和特点
植物细胞具有全能性。 根据这个理论，用植物的组织培养技术， 可以完成植物的繁殖。植物组织培养的大致过程如下：在无菌的条件下，将植物器官、组织、细胞切下，放在适当的人工培养基上培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。不过，这种组织没有发生细胞分化，在适当的光照、温度和一定的营养物质与植物激
植物组织培养技术的分类
1、胚胎培养 指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。 2、器官培养 指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖、茎节和切段，叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶，花器的花瓣、雄蕊（花药、花丝）、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。
植物组织培养需要哪些设备
1.实验室的准备：（1）化学实验室：组培时的洗涤、干燥、保存；培养基的配制和分装；高压灭菌；处理大型植物材料，以及进行生理、生化分析都在化学实验室进行。其要求与一般化学实验室的要求相同。（2）接种室（无菌室）：设有超净工作台或接种箱，用于无菌接种。要求室内光滑平整，地面平坦无缝，避免灰尘积累。室内要
植物组织培养的培养方法
1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体（一般要求带一叶一芽）放置在室内外普通沙子培养基上进行培养，利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7～15天可以生长出根系。此技术投资低，操作环节少。2、试管组织培养试管组织培养是将外植体（即离体组织、器官或细胞）放置在组培瓶等器皿中在无菌
植物组织培养的培养步骤
第一步，将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干净，如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小，即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料，可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗，然后再用自来
分生组织培养的定义
中文名称分生组织培养英文名称meristem culture定 义对具有细胞分裂活动特性的植物组织进行体外生长和繁殖的一种技术。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
植物组织培养再生的步骤
一、接种 组织培养的接种是指将灭过菌的材料，在无菌的情况下，切成小块，放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作，多在无菌室或超净工作台上进行，中学可制作接种箱，在箱内进行接种。接种的方法步骤如下： 1、在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、
植物组织培养的技术原理
植物组织培养即植物无菌培养技术，又称离体培养，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官（如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）、组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体，在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、
组织培养时各种灭菌特点
常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料
植物组织培养技术的应用
1、良种快繁 将植物组织培养技术用于新育成的、新引进的、一些短期内大量急需生产的良种快繁，可在最短时间内获得最多的植株，较普通营养生殖快成千上万倍，对新优良品种的推广应用尤为便利。 2、大批量营养繁殖 一些生产用苗量大的、需进行无性系繁殖的品种，尤其对一些繁殖系数低，特别是不能用种子进行繁殖
植物组织培养的发展概况
植物组织培养是20世纪初开始，以植物生理学为基础并在德国植物学家G.Haberland提出的“植物细胞具有全能性(1904年)”的设想指导下，经许多学者努力开拓而逐步发展起来的一项生物技术。1934年荷兰植物学家F.W.Went发现了生长素吲哚乙酸，随后不少学者又相继发现了吲哚丁酸、萘乙酸和2，4-