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如何消除组织培养的污染?

当重要的培养细胞污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。1)在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。2)分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。3)每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。4)确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。5)在无抗生素的培养......阅读全文

微生物细胞、植物细胞与动物细胞在培养上的主要区别

微生物细胞培养,简称微生物培养,包括原核细胞培养(细菌培养)和真核细胞培养(霉菌培养和酵母培养)。这些细胞小、且具有细胞壁,细胞周期非常短,如细菌每20-30min增殖1次。植物细胞培养指原生质体培养。未考虑分离出原生质体的植物细胞培养,无论是游离的单细胞或组织块,都称作植物组织培养。动物组织细胞培

植物组织培养技术知识汇总(一)

人们利用植物  组织培养技术快速获取优良植物株系、培育作物新品种等方面,那么如何利用植物组织培养技术再生植株呢?如何鉴定与避免与植物组织培养苗的污染,在此,小编总结了有关植物组织培养技术的七大方面,带你领略植物组织培养技术的方方面面。 第一部分 植物组织培养的概念 (广义)又叫

木本观赏植物组织培养研究进展

  对木本观赏植物组织培养的研究现状进行了概述,总结了外植体类型、基本培养基种类、不同植物生长调节物质、环境条件等因素对木本观赏植物组织培养的影响,并分析讨论了组织培养过程中常见污染、褐化和玻璃化问题及其解决方法。植物组织培养是指在无菌条件下,将离体的植物器官(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(

细胞培养资料

第一章 细胞培养的基本原理与技术现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。基因工程乙肝疫苗很多是以

植物无糖组织培养技术

植物无糖组培快繁技术(Sugar-free micropropagation)又称为光自养微繁殖技术(Photoautotrophic micropropagation)是指在植物组织培养中改变碳源的种类,以CO2代替糖作为植物体的碳源,通过输入CO2气体作为碳源,并控制影响试管苗生长发育的环境因子

细胞培养方法

一、准备工作   准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献

细胞培养方法

一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。 二、取材

细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行.准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献. 二、取材在无

植物无糖组织培养技术

植物无糖组培快繁技术(Sugar-free micropropagation)又称为光自养微繁殖技术(Photoautotrophic micropropagation)是指在植物组织培养中改变碳源的种类,以CO2代替糖作为植物体的碳源,通过输入CO2气体作为碳源,并控制影响试管苗生长发育的环境因子

细胞培养的一般过程

 一、准备工作    准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行.准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与

原代细胞培养之——培养技术

原代细胞的培养也叫初代培养 是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养,是建立细胞系的第一步,是一项基本技术。原代细胞因刚从组织中分离开,生物学特性未发生很大变化,仍保留原来的遗传特性,也最接近和反映体内生长特性,适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。 原代细胞往往有多种细胞组成,比较

细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

植物组织培养生产功能成分

  从低等的藻类到苔藓、蕨类、种子植物等高等植物的各类、各部分都可采用作为组织培养的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞,被子植物采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分。   由于植物在自然条件下,表面常被霉菌和细菌污染,故材料必须进行灭菌

植物光照培养箱的介绍

植物光照培养箱  植物光照培养箱是具有模拟自然光条件的多功能培养箱,适用于植物的生长组培养、种子发芽试验、植物的栽培与育种、微生物、抗生物的培养、保存及其他恒温、光照实验。光照与植物培养  植物培养中光照是重要条件,它对生长和分化有很大影响。  愈伤组织的培养分为两个阶段,一是脱分化培养阶段,二是再

平滑肌细胞培养方法-2

1 材料与方法1.1 材料 9~12d新生健康清洁级KM小鼠,雌雄不限,购自重庆医科大学实验动物中心。RPMI-1640干粉培养基,D-Hanks粉,标准胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均购自Hy-Clone公司;青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂;鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体,购自Zymed

初代细胞培养实验——消化培养法

初代培养或原代培养,可以用于:(1)从供体获取组织后的首次培养;(2)组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分、生物条件稳定的情况下(年龄、性别),在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细胞团或单个细胞,便于细

植物组织培养技术简介

上世纪30年代white首次由番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系,验证了l902年Haberlandt提出的植物细胞全能性的理论。所谓植物细胞全能性就是每个植物细胞就像一粒种子,在适宜条件下具有发育成完整植株的潜力。20世纪50年代——诱导培养银胶菊愈伤组织得到天然橡胶从胡萝卜体 细胞培养

植物组织培养知识概要

植物组织培养(Plant Tissue Culture):是指通过无菌操作分离植物体的一部分(外植体explant),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。(主要有原生质体(Protoplast),悬浮细胞,组织(愈伤组织Callus

植物培养箱分类应用及Memmert解决方案

日前接到咨询,“您好,我想寻找一款能够培养拟南芥的植物培养箱。具体要求是100L左右,温度20~30℃阶梯控制,温度精度±1℃,湿度70%RH上下,光照条件100~120μmol/ m2 ·s,能够模拟昼夜变化,明场16小时,暗场8小时,最好有数据记录回溯系统。”植物培养箱简介拟南芥是一款典型的

妊娠产物及其他固体组织来源样本的培养及制备实验

实验材料组织样本试剂、试剂盒含标准抗生素的 HBSS 溶液仪器、耗材完全培养基培养皿解剖器械塑料组织培养瓶实验步骤基本方案1.用无菌解剖器械将组织标本放入含有5 mlHBSS及5倍浓度抗生素的35 mm 培养皿中。室温下放置>30 min。2.将组织标本转移至一个新的含有约 2 ml 完全培养

初代细胞培养实验

消化培养法 组织块培养法             实验方法原理 合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细

初代细胞培养实验

消化培养法 组织块培养法             实验方法原理 合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细

原代细胞的培养与建系-1

                      原代细胞的培养与建系   细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离

细胞培养技术-1

一.细胞培养的基本原理  细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞,用培养基制成细胞悬液,在体外适宜条件下,使细胞生长繁殖,并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液,组织培养使用的是组织块(0.5~1立方毫米)或薄片

植物组织培养与新品种复制

组织培养是克隆细胞和组织的过程。迄今,植物组织培养已取得了许多卓越的成果,并被广泛推广和利用。通过植物组织培养,我们可以从植物体的一部分体细胞快速培育出大量和母体植物相同的植株。另一方面,植物组织培养技术也为我们快速开发和培育新品种创造了条件。一、组织培养与植物快速繁殖组织培养是一种利用人工培养基(

原代细胞培养之——取材技术

细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化,经大量扩增

植物细胞组织培养

一.实验目的植物细胞和组织培养的技术性强,要求无菌操作,通过本实验可初步掌握常规的组织培养技术,加深对无菌操作的了解。二.实验原理植物的全能性:植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力,称为植物的全能性。植物组织培养就是利用植物的全能性进行离体无菌植物培养的一门技术。植物组织培养按其

植物愈伤组织培养以及再分化

实验概要了解培养基母液的配制方法和注意事项;掌握培养基的配制和灭菌方法,掌握植物组织培养的一般方法实验原理(一)植物细胞的全能性  植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,因此在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。这个概念虽然在本世纪初已经

代做实验|细胞培养技术的基本原理

细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞,用培养基制成细胞悬液,在体外适宜条件下,使细胞生长繁殖,并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液,组织培养使用的是组织块(0.5~1立方毫米)或薄片(厚0.2毫米),而器官培

玫瑰组织培养研究进展

[摘 要]玫瑰组培苗已投入大规模生产中,已取得显著经济效益。本文对玫瑰的组织培养进行了较为全面的综述。目前,玫瑰采用根、茎、叶片、叶柄、茎尖、原生质体、合子胚、花药、花萼、花托、腋芽进行组织培养取得成功;主要采用MS培养基,添加低浓度的激素BAP03~05mg/L,NAA0004~03mg/L或NA