警惕化学发光检测中的“钩状效应”
作者:沙文彬,甘肃省临夏州人民医院检验科化学发光法具有高灵敏度和高特异性,可以定量检测多种激素、肿瘤标志物、感染性疾病标志物等,为很多疾病的诊治提供了极大的便利。近年来,在我国各级医院中化学发光分析仪逐渐得到普及,使其与血液分析仪、生化分析仪等一样,成为检验科的标配和主力仪器。化学发光仪及其配套试剂的生产厂商中,既有各大国外品牌,也有诸多国内后起厂商。笔者所在医院,虽地处西北小城,但也赶上了这股“春风”,除了原有的罗氏电化学发光分析仪e411和e602外,最近又新添了一台国产化学发光分析仪(以下称“A仪器”),其主要用于性激素六项和感染性疾病标志物的检测。化学发光法的普遍应用,虽然为疾病的诊治提供了强有力的支持。但是,与许多实验室检测方法一样,化学发光法在实际应用中会受到一些因素的明显干扰,检验人员和临床医师如不能对这些潜在的干扰因素存在认知,就很有可能导致误诊误治,使患者权益受损,并为医疗纠纷埋下隐患。下面就对近期笔者遇到的一......阅读全文
ELISA测定的常用模式——双抗体夹心法测抗原
对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心ELISA模式测定相当简便,现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。具体测定方法如下:1.首先以双抗体之一于碳酸盐缓冲液中4℃下过夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结
ELISA检测方法之双抗体夹心法测抗原-|-实验
对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心ELISA模式测定相当简便,现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。具体测定方法如下:1.首先以双抗体之一于碳酸盐缓冲液中4℃下过夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结
关于双位点一步法的基本介绍
在双抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反应时间,如应用高亲和力的单克隆抗体,测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的EL
双位点一步法的操作步骤
在双抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反应时间,如应用高亲和力的单克隆抗体,测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELIS
双抗体夹心法测定抗原简介
在双抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反应时间,如应用高亲和力的单克隆抗体,测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的EL
双位点一步法的原理和操作步骤
在双抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反应时间,如应用高亲和力的单克隆抗体,测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELIS
怎么衡量ELISA试剂盒SCI文章的测试结果?
ELISA试剂盒SCI文章在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同,如按常法测读,所得结果将低于实
波克尔斯效应和克尔效应的区别
波克尔斯效应和克尔效应的区别在于:波克尔斯效应是与电场大小成正比,而克尔效应则是与电场大小的平方成比例的。
波克尔斯效应和克尔效应的区别
波克尔斯效应和克尔效应的区别在于:波克尔斯效应是与电场大小成正比,而克尔效应则是与电场大小的平方成比例的。
什么是涡流的趋肤效应(集肤效应)?
涡流主要集中在被检试样的表面、亚表面,在一个渗透深度处涡流密度仅为表面的37%,且当检测频率f越大,试样的电导率和磁导率越大,涡流的渗透深度越小。 这种现象称为趋肤效应(或集肤效应)。 因此,普通涡流仪对受检试件表面、近表面缺陷的灵敏度较高,试样深处缺陷的检测灵敏度较低,为了检测试件深处的缺陷,检测
波克尔斯效应和克尔效应的区别
波克尔斯效应和克尔效应的区别在于:波克尔斯效应是与电场大小成正比,而克尔效应则是与电场大小的平方成比例的。
微波辐射之热效应和非热效应
微波辐射对人体的危害分为「热效应」和「非热效应」二大方面。热效应人体 70% 以上是水,水分子受到电磁波辐射后相互摩擦,引起机体升温,从而影响到体内器官的正常工作。体温升高引发各种症状,如心悸、头胀、失眠、心动过缓、白细胞减少,免疫功能下降、视力下降等。产生热效的电磁波功率密度在 10MW/cm²;
酶联免疫法的检测方法双抗体夹心法简介
在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的
关于双抗体夹心法的-应用介绍
在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的
病例分析:真假梅毒之惑,险些铸成大错!
案例经过 7月9日上班后,大家和往常一样各自忙碌着自己的工作。今天是我们免疫组的蒋老师负责TRUST和TPPA试验,在做到皮肤科一个患者的TRUST试验结果时,蒋老师叫我们大家看一下结果怎么报比较合适(平时在报TRUST试验结果时,都是要至少两人对结果统一意见后再进行报告),大家都觉得这个结果是弱阳
警惕!长江经济带发展与碳排放陷入“脱钩陷阱”
长江经济带是中国除沿海开放地区外经济密度最大的经济地带,产业园区密集,工业显著聚集,二氧化碳排放占全国排放总量的37.5%,并逐渐呈现刚性增长趋势,从2003年的8.01亿吨快速升至2019年的16.66亿吨,年平均增长率高达6.94%,是高碳排放的集聚地带。 推动经济发展和碳排放脱钩,是从根本上
Caspase效应机制
凋亡细胞的特征性表现,包括DNA裂解为200bp左右的片段,染色质浓缩,细胞膜活化,细胞皱缩,最后形成由细胞膜包裹的凋亡小体,然后,这些凋亡小体被其他细胞所吞噬,这一过程大约经历30-60分钟,Caspase引起上述细胞凋亡相关变化的全过程尚不完全清楚,但至少包括以下三种机制:凋亡抑制物正常活细胞因
克尔效应简介
在外电场作用下,液体就成为光学上的单轴晶体,其光轴同电场方向平行。通常的作法是:把液体装在玻璃容器中,外加电场通过平行板电极作用在液体上,光垂直于电场方向通过玻璃容器,以观察克尔电光效应。这种装置称为克尔盒。这时两个主要折射率n0与ne,分别称为正常与反常折射率。容器中的液体称为正或负双折射物质,取
猝灭效应
荧光的猝灭(熄灭)一词,从广义上说,指的是任何可使某给定荧光物质的荧光强度降低的作用,或者任何可使荧光强度不与荧光物质的浓度呈线性关系的作用。从狭义上说,指的是荧光物质分子与溶剂分子或其它溶质分子之间的相互作用,导致荧光强度降低的现象。
磁光效应简介
磁光效应克尔磁光效应的最重要应用就是观察铁磁材料中难以捉摸的磁畴。因不同磁畴区的磁化强度的不同取向使入射偏振光产生方向、大小不同的偏振面旋转,再经过检偏器后就出现了与磁畴相应的明暗不同的区域。利用现代技术,不但可进行静态观察,还可进行动态研究。这些都导致一些重要发现和关于磁畴、磁学参数的有效测量。
磁光效应简介
磁光效应当左、右旋圆偏振光在置于磁场中的媒质内传播而有不同的吸收系数时,入射的线偏振光传播一段距离后会变为椭圆偏振光,这个效应叫法拉第椭圆度效应或磁圆二向色性效应,简记为MCD。法拉第椭圆度和法拉第旋转均由媒质的介电张量非对角组元的实部和虚部决定。
克尔效应介绍
也称为二次电光(QEO)效应的克尔效应是材料响应于所施加的电场的折射率的变化。 克尔效应与普克尔效应不同,因为诱导的指数变化与电场的平方成正比,而不是线性变化。 所有材料显示克尔效应,但某些液体比其他液体显示更强烈。 克尔效应于1875年被苏格兰物理学家约翰·克尔(John Kerr)发现。通常考虑
塞曼效应简介
塞曼效应是荷兰物理学家塞曼在 1896 年发现的。他发现,发光体放在磁场中时,光谱线发生分裂的现象。是由于外磁场对电子的轨道磁矩和自旋磁矩的作用,或使能级分裂才产生的。其中谱线分裂为2条(顺磁场方向观察)或3条(垂直于磁场方向观察)的叫正常塞曼效应;3条以上的叫反常塞曼效应(见塞曼效应)。塞曼效应证
谈谈HOOK效应
1、HOOK效应钩状效应即HOOK效应,是指由于抗原抗体比例不合适而导至假阴性的现象,其中抗体过量叫做前带效应;抗原过量叫做后带效应。2、产生的原因抗原抗体特异性反应时,生成结合物的量与反应物的浓度有关。无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体, 均可发现只有在两者分子
伯乐酶标仪的双抗体夹心法
但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。 现将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。生物素与亲和素的结合具有很强的特异性,其亲和力较抗原抗体反应大得多,两者一经结合就极为稳定。由于一个亲和素可与4
基质效应的评估及如何避免基质效应的发生
临床生物化学分析中基质效应,已日益受到重视。最早是在酶活力测定中用人工制备的参考物质时发现。在酶法分析与免疫化学分析中,普遍存在的基质效应影响了定量测定的准确性。按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件的定义,“基质效应”(matrixeffect)是指:①标本中除分析物以外的其它成分对分析物
基质效应的评估及如何避免基质效应的发生
临床生物化学分析中基质效应,已日益受到重视。最早是在酶活力测定中用人工制备的参考物质时发现。在酶法分析与免疫化学分析中,普遍存在的基质效应影响了定量测定的准确性。按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件的定义,“基质效应”(matrixeffect)是指:①标本中除分析物以外的其它成分对分析物
基质效应的评估及如何避免基质效应的发生
临床生物化学分析中基质效应,已日益受到重视。最早是在酶活力测定中用人工制备的参考物质时发现。在酶法分析与免疫化学分析中,普遍存在的基质效应影响了定量测定的准确性。按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件的定义,“基质效应”(matrixeffect)是指:①标本中除分析物以外的其它成分对分析物
基质效应的评估及如何避免基质效应的发生
临床生物化学分析中基质效应,已日益受到重视。最早是在酶活力测定中用人工制备的参考物质时发现。在酶法分析与免疫化学分析中,普遍存在的基质效应影响了定量测定的准确性。 按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件的定义,“基质效应”(matrixeffect)是指:①标本中除分析物以外的其它成分对分
HCG检测结果不一致,无外乎这6大原因!
人绒毛膜促性腺激素(humanchorionicgonadotropin,HCG)是由滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,由α和β两个亚基组成,α亚基负责与相应受体结合,β亚基发挥生活学活性。由于α亚基与垂体分泌的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的α亚基相似,而β亚基则是