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保留时间为何不恒定?

“液相故障与排除”是分析工作者经常遇到的问题,而这两者都与液相色谱方法中的保留时间变化有关,本文就这方面进行了一些探讨。 流动相组成的敏感度 流动相的组成对保留时间的影响是十分灵敏的,例如在使用反相液相色谱法分离两个分子量约为400Da,不含离子化基团的异构体,流动相为乙腈和水。通常这两个异构体的保留时间相隔约1min而被分开,分离度大于2。在等度洗脱的条件下,如果乙腈的比例有1%的变化,会导致保留时间2min的漂移。若采用一个较缓慢的梯度(超过10minB变化5%)时,在初始及梯度结束时1%乙腈的改变会导致保留时间会有1min的漂移。显而易见,不论以上哪种方法,流动相组成的一个小小误差就足以使保留时间发生变化,进而使只采用保留时间对色谱峰的定性鉴别得出错误判断。 相似的问题 在我的实验室中遇到过类似的问题,所以很值得回忆一下问题本身及解决方法。在分离分子量1000 Da 的多肽时,我们采用反相色谱柱2......阅读全文

高效液相色谱仪和色谱柱常见问题以及解决办法

  1 色谱柱柱压问题  色谱柱柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压

HPLC四大常见故障及解决方法

   【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。   常见问题及解决方法   一、柱压问题   柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好

液相色谱分析常见故障及解决方法

  液相色谱作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确方式操作的话,就容易导致一些棘手的小问题。其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。   【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也

液相色谱分析常见故障及解决方法

  液相色谱作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确方式操作的话,就容易导致一些棘手的小问题。其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。   【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也

色谱柱温箱使保留时间相对恒定,有哪些好处

 色谱柱温箱在现代高效液相分析中是不可或缺的部分,可以精确、稳定地控制色谱柱的工作温度,对于有效地提高柱效,改善色谱峰的分离度、峰形对称性,缩短保留时间,降低柱反压,减少泵的磨损,保证分析样品结果的准确性和重复性.    色谱柱温箱主要功能/高效液相色谱柱温箱  1、温

色谱柱温箱使保留时间相对恒定,有哪些好处

色谱柱温箱在现代高效液相分析中是不可或缺的部分,可以精确、稳定地控制色谱柱的工作温度,对于有效地提高柱效,改善色谱峰的分离度、峰形对称性,缩短保留时间,降低柱反压,减少泵的磨损,保证分析样品结果的准确性和重复性.    色谱柱温箱主要功能/高效液相色谱柱温箱  1、温度控制采用先

色谱柱温箱使保留时间相对恒定,有哪些好处

色谱柱温箱在现代高效液相分析中是不可或缺的部分,可以精确、稳定地控制色谱柱的工作温度,对于有效地提高柱效,改善色谱峰的分离度、峰形对称性,缩短保留时间,降低柱反压,减少泵的磨损,保证分析样品结果的准确性和重复性.    色谱柱温箱主要功能/高效液相色谱柱温箱  1、温度控制采用先

环保部《2018年重点地区环境空气挥发性有机物监测方案》

  近日,环保部印发了《2018年重点地区环境空气挥发性有机物监测方案》。方案对于VOCs监测的城市、监测项目、时间频次及操作规程等做了详细规定。  一、监测城市  直辖市(4个):北京、天津、上海、重庆  省会城市及计划单列市(15个):石家庄、太原、沈阳、南京、杭州、济南、郑州、武汉、广州、成都

对于大容量柱温箱的使用情况分析概述

     在大容量柱温箱中存在两相,一相是固定不动的,即固定相;另一相则不断流过固定相,即流动相。大容量柱温箱的分离就是溶于流动相中的各组分经过固定相时,由于与固定相发生作用的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出的分离过程来进行分离。更详细地说

对于大容量柱温箱的使用情况分析概述

在大容量柱温箱中存在两相,一相是固定不动的,即固定相;另一相则不断流过固定相,即流动相。大容量柱温箱的分离就是溶于流动相中的各组分经过固定相时,由于与固定相发生作用的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出的分离过程来进行分离。更详细地说就是使用外力使含有样品的流动相通过与流动

液相色谱分析中保留时间改变的原因

  色谱分析是以假定给定组分的保留值在分离条件不变时保留值恒定为基础的。对标准的液相色谱程序而言,每个峰都对应于一个组分,以标准品与样品中组分的保留时间相对应进行鉴别。恒定的保留时间对分析设计排列的样品很重要。   在液相色谱仪分析中常涉及到组分的保留值。保留值发生改变可使已建立的方法不能继续进行

液相色谱分析中保留时间改变的原因

  色谱分析是以假定给定组分的保留值在分离条件不变时保留值恒定为基础的。对标准的液相色谱程序而言,每个峰都对应于一个组分,以标准品与样品中组分的保留时间相对应进行鉴别。恒定的保留时间对分析设计排列的样品很重要。   在液相色谱仪分析中常涉及到组分的保留值。保留值发生改变可使已建立的方法不能继续进行

大容量柱温箱采用的技术资料详情

在高效液相色谱分析系统中,对液相色谱柱温度控制的要求越来越高。正确的控制液相色谱柱的温度对于保护色谱柱、提高柱效、降低流动粘度、改善峰分离度、保证重现性、以达到更精确的分析结果,大容量柱温箱具有不容忽视的作用。所以柱温箱已成为高效液相色谱法系统中的重要配套装置,尤其对于示差折光检测器,因为折光率随温

大容量柱温箱采用的技术资料详情

   在高效液相色谱分析系统中,对液相色谱柱温度控制的要求越来越高。正确的控制液相色谱柱的温度对于保护色谱柱、提高柱效、降低流动粘度、改善峰分离度、保证重现性、以达到更精确的分析结果,大容量柱温箱具有不容忽视的作用。所以柱温箱已成为高效液相色谱法系统中的重要配套装置,尤其对于示差折光检测器

大容量柱温箱的使用性技巧分享

     大容量柱温箱内可放进样阀,外形美观大方,全开模具注成型,全出口产品。使用仪表全为自动双控制,大容量柱温箱使用时不用任何转换只要设定工作温度就可以自动识别现温度,智能调节智能控制,使用德国微型温度传感器,控温精度可达到0.1度,LED显示测定温度和实际温度保护,

柱温箱在液相色谱中的作用

柱温箱在液相色谱中的作用色谱法的分离原理是溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出的分离过程,其实质是一个吸附与解吸附的平衡

液相色谱分析中保留时间改变的原因

  色谱分析是以假定给定组分的保留值在分离条件不变时保留值恒定为基础的。对标准的液相色谱程序而言,每个峰都对应于一个组分,以标准品与样品中组分的保留时间相对应进行鉴别。恒定的保留时间对分析设计排列的样品很重要。   在液相色谱仪分析中常涉及到组分的保留值。保留值发生改变可使已建立的方法不能继续进行下

什么原因引起液相色谱仪分析中保留时间改变

  色谱分析是以假设给定组分的保留值在分离条件不变时保留值恒定为基础的。对标准的液相色谱程序而言,每个峰都对应于一个组分,以标准品与样品中组分的保留时间相对应进行鉴别。恒定的保留时间对分析设计排列的样品很重要。   在液相色谱仪分析中常涉及到组分的保留值。保留值发生改变可使已建立的方法不能继续进

液相色谱分析中保留时间改变的原因

色谱分析是以假定给定组分的保留值在分离条件不变时保留值恒定为基础的。对标准的液相色谱程序而言,每个峰都对应于一个组分,以标准品与样品中组分的保留时间相对应进行鉴别。恒定的保留时间对分析设计排列的样品很重要。在液相色谱仪分析中常涉及到组分的保留值。保留值发生改变可使已建立的方法不能继续进行下去,或引起

色谱柱相关的100个问题

  89、我用的是C18柱,后面黑色的是我以前跑的图,前面是我现在跑的图形,完全一样的东西,只是流动相不是一批配的(流动相的成分没变),中间柱子别人用过了,峰型怎么发生了这么大的变化啊?可能的原因是什么啊?是不是柱子出了问题啊?  答:从两个图对比很明显可以看出是柱效严重下降,且伴有肩峰。不同时间配

与色谱柱相关的问题汇总(十)

  91.流动相中加入四氢呋喃对柱子有损害吗?我现在分析一样品流动相中用到20%的四氢呋喃才能把峰分到基线.但柱子只能用一个星期分离效果就不好了.请问是四氢呋喃损坏了柱子吗?   答:四氢呋喃(THF)是反相色谱中洗脱能力极强的溶剂,比甲醇和乙腈都强很多。在流动相中加入THF能改善某些

柱温箱在液相色谱中的作用

柱温箱在液相色谱中的作用色谱法的分离原理是溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出的分离过程,其实质是一个吸附与解

液相色谱仪常见故障分析及解决要点

既使日常精心维护的液相色谱仪,随着使用时间的增加或使用者经验不足也会出现一些问题或故障。现将液相色谱仪容易出现的故障及解决办法介绍如下: 1.保留时间变化 保留时间的变化有三中情况:波动、缩短、延长。 保留时间出现波动时,应检查柱温是否处于恒温状态,如果设置为室温,气温的变化

HPLC故障排除:保留时间问题(二)

2.3.色谱柱温度变化会导致保留时间的变化:每1°C的温度变化会引起1-3%的保留时间变化。如果不使用柱温箱(即“室温”条件),由于实验室温度的变化,温度通常会在日间(和夜间)循环(周期性)变化。虽然在室内恒温器的测量下,实验室温度显示为恒定,但是HPLC系统的微观(微)环境可能会发生显著变化,尤其

气相色谱知识点

  一、气相色谱原理  色谱法又叫层分析法,它是一种物理分离技术。阿德分离原理是使混合物中的各组分在两相间进行分配,其中的一相是不动的,叫做固定相,另一相则是推动混合物流过此固定相的流体,叫做流动相。当流动相中所含的混合物经过固定相,就会与固定相发生相互作用。由于各组分在性质与结构上的不同,相互作用

高效液相色谱柱的常见故障及排除方法

液相色谱仪的色谱柱在使用一段时间后,会出现一定的常见故障,如果不能很好的判断并解决就会影响色谱柱的使用效果,从而影响样品的分析结果。  高效液相色谱柱常见的几种故障判断及排除方法:  1柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱

色谱柱温箱在液相色谱仪中的作用

  色谱法的分离原理是利用混合物中各组分在流动相和固定相中具有不同的溶解-解析能力、吸附-脱附能力,或其他亲和作用力的差异,当两相作相对运动时,样品各组分在经过固定相时发生吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和的大小、强弱不同,从而在固定相中滞留时间不同,这些反复多次的作用,从而使混合物各组分获

色谱柱温箱在使用中有哪些优点

在实际分析过程中,液相色谱仪流动相与色谱柱的温度,影响着组分的分离平衡,对于使用色谱柱温箱的有益之处有以下几点:  1.可以使保留时间相对恒定,对需要进行的定性鉴别可提高其可信度;  2.保留时间的重复性是色谱分析进行定量的基础,这一点在色谱仪检定规程中有严格的要求。不同的保留时间不仅不能判断其成份

色谱柱温箱在使用中有哪些优点

    在实际分析过程中,液相色谱仪流动相与色谱柱的温度,影响着组分的分离平衡,对于使用色谱柱温箱的有益之处有以下几点:  1.可以使保留时间相对恒定,对需要进行的定性鉴别可提高其可信度;  2.保留时间的重复性是色谱分析进行定量的基础,这一点在色谱仪检定规程中有严格的要求。不同

色谱柱温箱在使用中有哪些优点

在实际分析过程中,液相色谱仪流动相与色谱柱的温度,影响着组分的分离平衡,对于使用色谱柱温箱的有益之处有以下几点:  1.可以使保留时间相对恒定,对需要进行的定性鉴别可提高其可信度;  2.保留时间的重复性是色谱分析进行定量的基础,这一点在色谱仪检定规程中有严格的要求。不同的保留时间不仅不能判断其成份