SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中研究进展
人类基因组序列草图完成后,生命科学进入了“后基因组时代”,研究的重点转向了对复杂的蛋白质功能的研究。蛋白质是基因表达的最终产物,器官组织的生理状态变化会引起血清蛋白质组的改变,因此对蛋白质和蛋白质组学进行研究可以直接获取疾病的特征性标志。由于人血清是一个蛋白质相当丰富并不断变化的系统,单一的血清肿瘤标记物难以真正反溯到相关的细胞组织,而发现一组与特定组织癌变相关的血清蛋白质(多参数标记物)则是更有效的途径,这也就是所谓的“癌症指纹(cancer signature)”[1],而高通量的表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(surface enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)质谱技术的出现加速了开展发现“癌症指纹”的研究。目前利用SELDI技术发现肿瘤的特殊生物学标记,对于肿瘤的早期诊断具有......阅读全文
蛋白芯片检测Hp
大渊幽门螺旋杆菌(HP)IgG抗体蛋白芯片检测系统(PBT-HP-01-A型芯片)是一种定性的蛋白芯片,共放有细胞毒素相关蛋白(CagA),尿素酶C(ureC)二个指标,采用间接法原理,特异性强,灵敏度高。标记方法为免疫金标记。 大渊幽门螺旋杆菌(HP)现症蛋白芯片鉴定检测系统(PBT-HP-02
蛋白芯片检测ENA
大渊自身抗体九项IgG抗体蛋白芯片检测系统是一种定性的蛋白芯片,共集合有抗dsDNA抗体、抗Histone抗体、 抗Smith抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗JO-1抗体、抗Rib-P抗体、抗RNP抗体九个指标。采用间接法原理,特异性强,灵敏度高。标记方法为胶体金标
蛋白芯片检测心梗
一、什么是心肌梗塞? 心肌梗塞(acute myocardial infarction,AMI)是由于冠状动脉急性闭塞引起部分阶段心肌缺血性坏死。临床常表现为剧烈而持久的胸痛,血清心肌酶活力增高,以及反映心肌急性损伤、缺血和坏死一系列特征性心电图衍变。常并发心律失常及急性循环功能障碍。属冠心
蛋白芯片技术的原理
蛋白芯片技术的研究对象是蛋白质,其原理是对固相载体进行特殊的化学处理,再将已知的蛋白分子产物固定其上(如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等),根据这些生物分子的特性,捕获能与之特异性结合的待测蛋白(存在于血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等),经洗涤、纯化,再进行确认和生
蛋白芯片技术解析(二)
蛋白芯片应用:蛋白芯片检测蛋白芯片检测技术按照模式和应用的不同可以分为:正相和反相检测技术。目前广泛使用的是正相蛋白芯片分析技术,它利用不同样品与固定在芯片上的大量已知捕捉分子的相互作用,来同时进行多参数的检测分析。这项技术包括了用于识别和定量目标蛋白的抗体芯片技术和用于分析蛋白和固定结合分子相互作
蛋白芯片技术解析(一)
人类基因组测序计划完成之后,科学家们凭借良好的DNA芯片及坚实的生物信息学平台可以全面地了解生命细胞系统。然而在不同的细胞生理 状态下,细胞内蛋白表达及蛋白的功能存在着差异,细胞蛋白质组存在着差异。而且多种因素影响着细胞在不同环境下的生理状态,比如,细胞信号分子,细胞间及细胞与基质的相互作用
蛋白芯片的主要类型
蛋白芯片主要有三类:蛋白质微阵列、微孔板蛋白质芯片、三维凝胶块芯片等。
蛋白芯片的主要种类
蛋白芯片主要有三类:蛋白质微阵列、微孔板蛋白质芯片、三维凝胶块芯片等。蛋白质微阵列哈佛大学的Macbeath和SchreiberL等报道了:通过点样机械装置制作蛋白质芯片的研究,将针尖浸入装有纯化的蛋白质溶液的微孔中,然后移至载玻片上,在载玻片表面点上1nl的溶液,然后机械手重复操作,点不同的蛋白质
蛋白芯片技术的常用载体介绍
常用的材质有玻片、硅、云母及各种膜片等。理想的载体表面是渗透滤膜(如硝酸纤维素膜)或包被了不同试剂(如多聚赖氨酸)的载玻片。外形可制成各种不同的形状。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技术增强芯片与蛋白质的结合。
蛋白芯片技术的探针的制备方法
低密度蛋白质芯片的探针包括特定的抗原、抗体、酶、吸水或疏水物质、结合某些阳离子或阴离子的化学集团、受体和免疫复合物等具有生物活性的蛋白质。制备时常常采用直接点样法,以避免蛋白质的空间结构改变。保持它和样品的特异性结合能力。高密度蛋白质芯片一般为基因表达产物,如一个cDNA文库所产生的几乎所有蛋白质均
蛋白芯片制作与应用(3)-操作流程
一个经典的蛋白芯片操作流程:Experimental Procedures for Protein Microarrays--------------------------------------------------------------------------------Chemicall
被几只猴子救活的蛋白芯片数据
随着层出不穷的生物学研究和分析方法的发展,我们手里可能都会积攒下很多数据,但往往这些数据并不会按照我们的预想去排布和集中,一整套分析下来往往得不到预先假设的结果,或者根本就是理论和数据南辕北辙,如何去处理科研假设与数据之间的冲突,我们也一直在探索着如何让科研思路追着数据走,数据又怎样不断校正科研设想
蛋白芯片制作与应用(4)-液态芯片
液态芯片原理编码微球:分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球(Beads)染成不同的荧光色,从而获得多达100种经荧光编码的微球。 交联探针、抗体或抗原:把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。 检测反应:先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码
蛋白芯片制作与应用(1)-液态芯片原理
液态芯片原理编码微球:分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球(Beads)染成不同的荧光色,从而获得多达100种经荧光编码的微球。 交联探针、抗体或抗原:把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。 检测反应:先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码
微孔板蛋白芯片技术的特点和应用
Mendoza等在传统微滴定板的基础上,利用机械手在96孔的每一个孔的平底上点样成同样的四组蛋白质,每组36个点(4×36阵列),含有8种不同抗原和标记蛋白。可直接使用与之配套的全自动免疫分析仪,测定结果。适合蛋白质的大规模、多种类的筛选。
蛋白芯片制作与应用(2)-研究意义与分类
研究蛋白质芯片的意义1 。蛋白质是基因表达的最终产物, 接近生命活动的物质层面; 2 。探针蛋白特异性高、亲和力强, 可简化样品前处理,甚至可直接利用 生物材料(血样、尿样、细胞及组织等)进行检测;3 。适合高通量筛选与靶蛋白作用的化合物;4 。有助于了解药物或毒物与其效应相关蛋白质的相互作用。蛋白
SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中研究进展
人类基因组序列草图完成后,生命科学进入了“后基因组时代”,研究的重点转向了对复杂的蛋白质功能的研究。蛋白质是基因表达的最终产物,器官组织的生理状态变化会引起血清蛋白质组的改变,因此对蛋白质和蛋白质组学进行研究可以直接获取疾病的特征性标志。由于人血清是一个蛋白质相当丰富并不断变化的系统,单一的血清肿瘤
蛋白芯片的基本原理及技术研究现状
作者:陈玮莹 来源:《国外医学临床生物化学及检验学分册》汕头大学医学院 陈玮莹 综述 温博贵 随着分子生物学芯片技术研究工作的进一步深入开展,NDA芯片技术已经被逐渐应用于对生物样品中的各种已知或未知的核酸序列表达的检测和比较研究。但是,作为生物体细胞中实施化学反应功能成分的蛋白质,其相当部分与活性
蛋白芯片的基本原理及技术研究现状
随着分子生物学芯片技术研究工作的进一步深入开展,DNA芯片技术已经被逐渐应用于对生物样品中的各种已知或未知的核酸序列表达的检测和比较研究。但是,作为生物体细胞中实施化学反应功能成分的蛋白质,其相当部分与活性基因所表达的mRNA之间未能显示出直接的关系,因此使作为高通量基因表达分析平台的cDNA芯片技
SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中研究进展(三)
SELDI蛋白芯片技术可有效筛选血清中特异性蛋白标志物,为建立卵巢癌的诊断模型提供可靠的技术平台。 2.4 乳腺癌 CA153用于乳腺癌的检测,其灵敏度23%,特异性69%,只能用于监测治疗效果和复发情况。LI等[23]对169例血清进行检测,其中乳腺
SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中研究进展(一)
作者:余家密 【摘要】 SELDI蛋白芯片技术全称为表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)是近年用来研究蛋白质组学的一项新的技术平台,具有高通量、高效率、高灵敏度等特点,可以快速地分析各种生物样品中蛋白质组的组成,在基础医学研究、临床疾病诊断以及药物研发方面
SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中研究进展(二)
2.1 肝 癌 肝癌是非洲、中国和东南亚国家最常见的恶性肿瘤之一,其生存率低,很大一部分是由于诊断时病程已到了进展期,失去了很好的治疗机会[6]。目前肝癌的早期诊断主要依靠血清AFP的检测,但近年来大量临床研究表明,AFP阳性率波动在60%~70%[7],约有1/
抗结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片的临床应用
我国现有结核病人约450万例,每年病死近13万人[1]。造成上述严峻形势的重要原因之一是结核病的早期快速诊断技术不理想。目前已有的结核抗体检测试剂均为未纯化的结核菌菌液抗原,存在特异性差异的问题[2,3]。我们对南京大渊生物技术工程公司使用的基因工程表达的结核菌蛋白和脂多糖生产的结核芯片系统进行了检
抗结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片的临床应用
我国现有结核病人约450万例,每年病死近13万人[1]。造成上述严峻形势的重要原因之一是结核病的早期快速诊断技术不理想。目前已有的结核抗体检测试剂均为未纯化的结核菌菌液抗原,存在特异性差异的问题[2,3]。我们对南京大渊生物技术工程公司使用的基因工程表达的结核菌蛋白和脂多糖生产的结核芯片系统进行
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒PP 缓冲液变性裂解缓冲液仪器、耗材微量滴定板实验步骤3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表达载体里构建的,可表达带 N 端 RGS-His6 标记的大肠杆菌 cDNA 表达克隆来生产重组植物蛋白。由于超出本章节的范围,我们不在此详细叙
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒 PP 缓冲液变性裂解缓冲液仪器、耗材 微量滴定板实验步骤 3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表达载体里构建的,可表达带 N 端 RGS-His6 标记的大肠杆菌 cDNA 表达克隆来生产重组植物蛋白。由于超出本章节的范围,
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒:PP 缓冲液 变性裂解缓冲液 仪器、耗材:微量滴定板实验步骤:3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表
概述芯片上的荧光免疫分析
蛋白质芯片作为生物芯片的一种,已经成为研究蛋白质的重要工具。蛋白芯片的检测原理同免疫检测,也可以称为芯片免疫分析。蛋白芯片大致分为三种类型,第一类是由蛋白质微阵列构成的芯片,第二类是以各种微结构为基础的微流控型芯片,第三类是结合微球编码和流式检测的悬浮芯片。这三种类型中,利用免疫原理并采用荧光检
芯片上的荧光免疫分析
蛋白质芯片作为生物芯片的一种,已经成为研究蛋白质的重要工具。蛋白芯片的检测原理同免疫检测,也可以称为芯片免疫分析。蛋白芯片大致分为三种类型,第一类是由蛋白质微阵列构成的芯片,第二类是以各种微结构为基础的微流控型芯片,第三类是结合微球编码和流式检测的悬浮芯片。这三种类型中,利用免疫原理并采用荧光检
芯片上的荧光免疫分析
蛋白质芯片作为生物芯片的一种,已经成为研究蛋白质的重要工具。蛋白芯片的检测原理同免疫检测,也可以称为芯片免疫分析。蛋白芯片大致分为三种类型,第一类是由蛋白质微阵列构成的芯片,第二类是以各种微结构为基础的微流控型芯片,第三类是结合微球编码和流式检测的悬浮芯片。这三种类型中,利用免疫原理并采用荧光检