Waters201型高效液相色谱仪操作规程
一、开机前准备1. 实验室温度应保持在10～30℃之间，湿度小于80%。2. 根据实验要求，选择合适的柱子，按装柱子，准备相应的流动相并过滤脱气。二、开机1. 依次打开510泵、检测器和计算机电源开关，设定合适的波长和AUFS 值。2. 双击桌面上的HS V4.0图标，进入工作站系统。三、编辑LC分析方法1. 双击“方案”图标，输入初始参数。2. 双击HS V1.0图标，设定合适的流速和梯度。3. 保存所编辑的方法。四、样品分析与采集数据1. 在文件栏中选择分析方法文件。2. 手动进样：在方案栏中依提示输入文件名称、样品名称、操作者等信息。进标准样并按下进样器手柄，即开始样品分析与数据采集。3. 根据标准色谱图进行归一化法、外标法或内标法校正。4. 输入样品进行分析与数据采集。五．报告输出1. 在界面栏的方案栏中选择打印项。2. 选择所要选用的报告格式，输出报告。六、关机1. 关机前先用100%甲醇冲洗系统30分钟，关闭泵控系统......阅读全文
现代液相色谱进展
色谱法最初仅仅是作为一种分离手段，是根据混合物中不同组分在流动相和固定相间具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些组分在两相间进行反复多次的分配，从而得到分离。直到五十年代，人们才开始把这种分离手段与检测系统连接起来，成为一种独特的分析方法，是几十年来分析化学中最富活力的领域之一，也是生命科
循环制备液相色谱
液相色谱为什么要采用循环技术？ 色谱分离过程的分离效率主要取决于色谱柱的长度。常规的办法是增加色谱柱的长度，但因为系统压降升高、色谱柱填料昂贵、空间受限等因素使得这种方法不可行。而采用循环技术则可以克服以上缺陷，提高色谱分离过程的分离效率。 什么是循环制备液相色谱？ 循环液相色谱技术的关
高效液相色谱原理
采用高效液相色谱（HPLC）法分离单糖和寡糖，较多采用氨基柱，乙腈和水作为流动相，此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法分离测
液相色谱柱再生
1、色谱柱的使用说明： （1）色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容
反相高效液相色谱
实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级） 三氟乙酸（TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。（1）线性梯
液相色谱小知识
高效液相经常使用粒径5um 的色谱柱，用过一段时间后，柱压会略有升高，尤其是做中药。常用来洗色谱柱的溶剂为甲醇，当色谱柱用甲醇洗过之后，再用含乙腈的流动相平衡，会使柱压迅速升高，色谱柱滴漏，这是由于甲醇和乙腈汇合产生局部高压。因此，这种情况下，应慢慢升高流速，可以从0.6ml/min开始，一步步的平
液相色谱工作原理
系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
高效液相色谱原理
色谱法是一种分离技术，试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质
液相色谱基线噪音
对的，虽然理论上分析纯试剂可以上HPLC的，但很多国产的达不到要求，会使仪器噪音高很多但，你可以分析一下噪音的来源1，换100%纯水，不接柱子，当基线平稳时，进空针（就是什么都不进，走一次方法）。如果这时基线同样出现之前的情况，那么应该是仪器本身的问题，联系工程师解决吧（如果用的等度洗脱，这步省略）
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
高效液相色谱柱
一、怎样选择色谱柱现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。（1）硅胶基质填料：1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica），以及其他具有极性官能团，如胺基团（NH2，APS）和氰基团（CN，C
高效液相色谱原理
以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵，色谱柱，进样器，检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比，液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制，只要求把样品制成溶液即可，非常适合于分离生物大分子、离子型化合物，不稳定的天然产物以
高效液相色谱特点
①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。 ②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。 ③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离
高效液相色谱原理
采用高效液相色谱（HPLC）法分离单糖和寡糖，较多采用氨基柱，乙腈和水作为流动相，此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法分离测
液相色谱维护误区
关于标示 1、色谱柱的流向不能改变 在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？ 其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类 ①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrow bore），内径1~2mm，柱长10~20cm； ③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm； ④半制备柱，内径＞5mm； ⑤实验室制备柱，内径20~4
高效反相液相色谱
实验方法原理反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反
液相色谱的应用
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
液相色谱柱通论
选择液相色谱柱简单思路1. 确定分离目的 确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质 评估分析物的化学性质. . 诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱 了解色谱填料的物理和化学性质。A填
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
高效液相色谱基线
高效液相色谱基线色谱基线也常被称作背景噪音，是在无样品组分通过色谱检测器时，检测器响应信号的随机分布。基线噪音的大小直接影响色谱分析方法的检测灵敏度以及对杂质的检出能力，如纯度测试以及痕量物质残留检测方法等。对于液相色谱而言，等度洗脱模式下，由于流动相的组成保持一致，其折光率不变，因而基线比较平坦，
何谓反相液相色谱
液-液色谱有正相和反相之分。如果采用极性固定相和相对非极性流动相，就称为正相；如果采用相对非极性固定相和极性流动相，则称为反相。由于极性化合物更容易被极性固定相所保留，所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物。相反，反相液-液色谱系统一般可用于分离非极性或弱极性化合物。正相色谱的流出顺序是极性
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
液相色谱的用途
高效液相色谱应用很广泛，基本能对有机化合物中百分之七十到百分之八十的化合物进行分离与检测，下面以安捷伦液相色谱技术做为举例：应用液相色谱用途广泛，已经成为大多数化学行业和生命科学行业中的标准配置。安捷伦液相色谱和液－质联用系统正为各种客户群服务，如药物研制和生产、蛋白质、食品安全、环境、国土安全和石
液相色谱串联质谱法
实验方法原理尿样经葡萄糖醛酸甙酶酶解后进行液-液提取,以甲醇-0.1%甲酸缓冲液(含0.02mol/L乙酸铵)(体积比为68∶32)为流动相,采用CosmosilC18色谱柱分离,并以三重四极杆串联质谱多反应监测扫描方式对尿样中的脱氢表雄酮(DHEA)、睾酮、表睾酮、雄酮和苯胆烷醇酮等5种激素进行检
液相色谱的用途
高效液相色谱应用很广泛，基本能对有机化合物中百分之七十到百分之八十的化合物进行分离与检测，下面以安捷伦液相色谱技术做为举例：应用液相色谱用途广泛，已经成为大多数化学行业和生命科学行业中的标准配置。安捷伦液相色谱和液－质联用系统正为各种客户群服务，如药物研制和生产、蛋白质、食品安全、环境、国土安全和石
液相色谱固定相
1.1 正相色谱 八十年代初，人们使用的正相色谱固定相硅胶和吡啶硫氰酸镍盐的络合物晶体能与芳香族化合物形成包合物用于分离芳香族含氮异构体和胆甾醇晶体。已有人[1]将焦炭吸附剂作为填料和键合硅胶作过比较并研究其热力学机理。具有离子化或非离子化功能团的大孔聚合物也开始应用于液相色谱，这些聚合物在
高效液相色谱原理
以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵，色谱柱，进样器，检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比，液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制，只要求把样品制成溶液即可，非常适合于分离生物大分子、离子型化合物，不稳定的天然产物以