聚丙烯酰胺凝胶电泳仪毛细管柱的制备方法
聚丙烯酰胺凝胶电泳仪(CGE)是将聚丙烯酰胺在毛细管内交联生成网状多孔凝胶,凝胶具有多孔性,有类似分子筛的作用。荷质比相等但大小不同的分子在电场作用下发生迁移,其运动速度受到凝胶网状结构的阻碍,大分子受到的阻力大,移动速度慢,小分子受到的阻力小,移动速度快,从而得以分离。蛋白质和DNA等的荷质比与分子大小无关,在CZE分离模式中淌度几乎没有差别,很难分离,采用CGE能获得良好分离,是研究DAN排序的重要手段。聚丙烯酰胺凝胶电泳仪毛细管柱的制备方法如下:一、检测窗口制备:毛细管的聚酰亚胺涂层不透明,检测窗口部位的聚酰亚胺必须剥离除去,剥离长度为2~3mm。常用剥离方法有硫酸腐蚀法、灼烧法和刀片刮除法。二、毛细管内壁修饰:用120℃热空气吹,然后用室温氨气冲洗2h,再用50%3-甲基丙烯酰氧丙基-三甲氧基硅烷充满12h,zui后用甲醇和水冲洗。三、缓冲溶液制备:将1.1gTris和0.01g EDTA溶于100mlL 7M尿素溶液中......阅读全文
聚丙烯酰胺凝胶电泳仪毛细管柱的制备方法
聚丙烯酰胺凝胶电泳仪(CGE)是将聚丙烯酰胺在毛细管内交联生成网状多孔凝胶,凝胶具有多孔性,有类似分子筛的作用。荷质比相等但大小不同的分子在电场作用下发生迁移,其运动速度受到凝胶网状结构的阻碍,大分子受到的阻力大,移动速度慢,小分子受到的阻力小,移动速度快,从而得以分离。蛋白质和DNA等的荷质比与分
色谱仪毛细管柱的制备(二)
1、毛细管柱内表面的粗糙化:毛细管柱内表面的粗糙化方法有表面腐蚀法和表面沉积惰性微粒物质法。表面腐蚀法只用于普通玻璃毛细管柱,不适用于石英玻璃柱,因腐蚀后的石英玻璃柱壁太薄,易于脆断。(1)表面腐蚀法:1)氯化氢刻蚀法:将干燥的氯化氢气体通入普通玻璃柱,用小火把柱两端封住,在300~400℃下加热3
色谱仪毛细管柱的制备(三)
1)静态法:将硅烷化试剂用N2以4~5cm/s的速度通过毛细管柱,试剂排出后将毛细管柱两端封住,缓慢升温(2~3℃/min)至300~400℃保持4~20h,再用甲苯和甲醇依次冲洗,N2吹干。2)动态法:把毛细管柱放在400℃炉中,将两端伸出炉外,一端置于含有硅烷化试剂的鼓泡器中,产生的蒸气通过干燥
色谱仪毛细管柱的制备(一)
色谱仪毛细管柱的制备包括毛细管柱材质的选择、毛细管柱的拉制、毛细管柱内表面的改性、毛细管柱固定液的涂渍和毛细管柱的老化等。一、毛细管柱材质的选择:色谱仪毛细管柱的材料应具有化学惰性、热稳定性好、内表面光滑易润湿和操作方便等性能。自毛细管柱发明以来,对塑料、铜、镍和不锈钢等多种材料进行过研究,目前普遍
毛细管柱的制备
1.玻璃毛细管柱的拉制毛细管柱可用塑料管、玻璃管、金属管拉制成不同内径不同长度的毛细管,其中玻瑞毛细管柱用得zui多。为了控制内径和长度,玻瑞管在熔化温度下,在专门的仪器上位制。2.涂渍方法动态法:这是一种广泛使用的较为简便的涂溃方,它是用钢瓶中的于燥惰性气体N2,推动一定浓度的固定溶液,使之慢慢地
蛋白质的(PAGE)聚丙烯酰胺凝胶电泳制备方法
一.试剂制备: 1.分离胶缓冲液(pH8.9):36.6gTris,48ml1mol/l的HCl,或先加水至80ml,用浓HCl调pH,再定容至100ml. 2.浓缩胶缓冲液(pH6.7):5.98gTris,48ml1mol/l的HCl, 或先加水至80ml,用浓HCl调pH,再定容至
气相色谱毛细管柱的制备与发展
毛细管色谱柱的出现是气相色谱发展中的一个重要的里程碑,它使GC 在分离效率和分析速度两方面都大大提高。1957年,戈雷用聚乙烯毛细管考察空气峰的分离情况,受到启发,他用玻璃管、金属管做试验,成功地在内径为250μm的金属毛细管内壁用1%聚乙二醇的二氯甲烷溶液涂渍了一层很薄的固定液,所得到的结
气相色谱毛细管柱的制备与发展
毛细管色谱柱的出现是气相色谱发展中的一个重要的里程碑,它使GC 在分离效率和分析速度两方面都大大提高。1957年,戈雷用聚乙烯毛细管考察空气峰的分离情况,受到启发,他用玻璃管、金属管做试验,成功地在内径为250μm的金属毛细管内壁用1%聚乙二醇的二氯甲烷溶液涂渍了一层很薄的固定液,所得到的结果比当
毛细管柱的安装方法
通常来说,一根毛细管色谱柱由两部分组成—管身和固定相。管身一般使用熔融二氧化硅或不锈钢作为基本材质:而固定相种类就有许多了。大部分的固定相是液体或胶状的高分子量,具有高热稳定性的聚合物,zui常用的是聚硅氧烷(有时误称为硅氧烷)和聚乙二醇,另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石(例如氧化铝
ICP光谱仪的样品制备方法
样品制备 样品所采用的试剂一般为纯度不低于优级纯的酸类,如硝酸、盐酸、高氯酸、过氧化氢、氢氟酸、硫酸、王水等。一般首选酸为硝酸,因为硝酸引起的干扰最小。试剂用水为去离子水(电导率<0.056μS/cm)。 固体样品需要采用合适的方法进行消解。常用的消解方法有湿法消解、干法消解、微波消解等。 液
微量制备色谱仪分类方法
微量制备色谱仪类型有多种。1、按流动相物理状态可分:微量制备气相色谱仪和微量制备液相色谱仪。2、按分离对象的属性可分:有机物微量制备色谱仪和无机物微量制备色谱仪。3、按固定相性质可分:微量制备键合固定相色谱仪和微量制备硅胶固定相色谱仪等。4、按洗脱方式可分:微量制备等度洗脱色谱仪和微量制备梯度洗脱色
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的样品制备
可溶性样品 组织样品准备 细胞 样品分级 实验方法原理 由于2-DE 所分析样品的多样性,没有一种制备方法可以普遍
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的样品制备
实验方法原理 由于2-DE 所分析样品的多样性,没有一种制备方法可以普遍适用于各种样品,但有几点考虑一定要提出,很有必要尽量减少可能在 2-DE 谱中导致假点 (artifactualspot) 的蛋白质修饰,在实验中,含尿素的样品一定不要加热,因为加热后尿素分解产生的异氰酸盐可能对蛋白
糖类制备液相色谱仪分类方法
糖类制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:实验室糖类制备液相色谱仪和工业糖类制备液相色谱仪。2、按应用范围可分:糖类制备专用液相色谱仪和糖类制备通用液相色谱仪。3、按洗脱方式可分:等度洗脱糖类制备液相色谱仪和程序洗脱糖类制备液相色谱仪。4、按产地可分:国产糖类制备液相色谱仪和进口糖类制备
制药制备液相色谱仪分类方法
制药制备液相色谱仪分类方法有多种。 1、按分离目的可分:实验室制药制备液相色谱仪和工业制药制备液相色谱仪。 2、按分离规模可分:小型制药制备液相色谱仪和大型制药制备液相色谱仪。 3、按固定相和流动相的极性大小可分:正相制药制备液相色谱仪和反相制药制备液相色谱仪。 4、
食品制备液相色谱仪分类方法
食品制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按进样自动性可分:自动进样食品制备液相色谱仪和手动进样食品制备液相色谱仪。2、按洗脱方式可分:等度洗脱食品制备液相色谱仪和梯度洗脱食品制备液相色谱仪。3、按应用范围可分:专用型食品制备液相色谱仪和通用型食品制备液相色谱仪。4、按分离目的可分:化验室食品制备液相色
制药制备液相色谱仪分类方法
制药制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:实验室制药制备液相色谱仪和工业制药制备液相色谱仪。2、按分离规模可分:小型制药制备液相色谱仪和大型制药制备液相色谱仪。3、按固定相和流动相的极性大小可分:正相制药制备液相色谱仪和反相制药制备液相色谱仪。4、按应用范围可分:专用型制药制备液相色谱仪
制药制备液相色谱仪分类方法
制药制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:实验室制药制备液相色谱仪和工业制药制备液相色谱仪。2、按分离规模可分:小型制药制备液相色谱仪和大型制药制备液相色谱仪。3、按固定相和流动相的极性大小可分:正相制药制备液相色谱仪和反相制药制备液相色谱仪。4、按应用范围可分:专用型制药制备液相色谱仪
农药制备液相色谱仪分类方法
农药制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:农药化验室制备液相色谱仪和农药工业制备液相色谱仪。2、按色谱柱可分:农药制备填充柱液相色谱仪和农药制备毛细管柱液相色谱仪。3、按进样自动性可分:农药制备自动进样液相色谱仪和农药制备手动进样液相色谱仪。4、按应用范围可分:专用型农药制备液相色谱仪和
农药制备液相色谱仪分类方法
农药制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:农药化验室制备液相色谱仪和农药工业制备液相色谱仪。2、按色谱柱可分:农药制备填充柱液相色谱仪和农药制备毛细管柱液相色谱仪。3、按进样自动性可分:农药制备自动进样液相色谱仪和农药制备手动进样液相色谱仪。4、按应用范围可分:专用型农药制备液相色谱仪和
制备液相色谱仪与方法开发
制备色谱是以分离出纯物质为目的的色谱系统,分析色谱是以分析出样品组分信息为目的的色谱系统,基于他们目的的不同,制备色谱相对于分析色谱有很多不同特征,不能简单等同。当我们在实验室中想得到纳克乃至毫克级的纯物质时,稍微改装下分析型色谱系统就能简单轻松的完成,不过,若所需制备的纯品量很大,此时,再用分析型
亮绿的制备方法
在盐酸或硫酸介质中,苯甲醛与N,N-二乙基苯胺缩合,产物经氧化,并转化为硫酸盐。最初生成的树脂状物质会突然固化为良好的晶体。用于亚硫酸盐测定,制造细菌培养基,用以鉴别大肠杆菌及其他乳糖发酵菌,培养分离粪便中的伤寒杆菌。
siRNA的制备方法
化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的siRNA的情况
糊精的制备方法
淀粉预处理→干燥→热处理→冷却→成品(糊精)其中白糊精的反应温度较低,PH值较低,有色产物较少。黄糊精是低PH值及高温下高度转化产品。
抗原的制备方法
抗原的制备 除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。 一、抗原的提取
核苷的制备方法
核苷可从水解核酸来制备。用吡啶水溶液、氧化铝或酶促水解核糖核酸RNA,可得到核糖核苷;用氧化铝或酶水解脱氧核糖核酸DNA可得到脱氧核糖核苷。核苷也可用化学方法合成。适当保护的核糖或脱氧核糖与碱基衍生物缩合,可得到相应的核糖核苷和脱氧核糖核苷。或在糖的C1上先形成碳-氮和碳-碳键,然后闭环成杂环碱基而
抗原的制备方法
实验步骤一、抗原的提取抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中,如
核苷的制备方法
核苷可从水解核酸来制备。用吡啶水溶液、氧化铝或酶促水解核糖核酸RNA,可得到核糖核苷;用氧化铝或酶水解脱氧核糖核酸DNA可得到脱氧核糖核苷。核苷也可用化学方法合成。适当保护的核糖或脱氧核糖与碱基衍生物缩合,可得到相应的核糖核苷和脱氧核糖核苷。或在糖的C1上先形成碳-氮和碳-碳键,然后闭环成杂环碱基而
乳糖的制备方法
药用乳糖一般是从牛奶的乳清中经浓缩、结晶、精制、重结晶、干燥后提取得到的,再经过不同的最终处理工艺,可得到粒径、可压性、流动性不同的产品,从而满足多种需求。
地塞米松的制备方法
一种新的地塞米松21-羟基物的生产工艺方法,以中间体21-醋酸酯为底物,以含0~10%氯仿的适量甲醇作为溶剂对底物进行半溶,用碱作为催化剂进行水解反应,反应完全后用醋酸中和,将反应液减压浓缩至适量体积,降温,过滤,用水冲洗滤饼,干燥得21-羟基物。该工艺可缩短生产周期,提高21-羟基物的质量和收率,