毛细管等电聚焦电泳仪分离谱带的移动方法

毛细管等电聚焦电泳仪是以载体两性电解质为介质,不同等电点的分子分别聚集在不同的位置上不作迁移,形成电泳谱带而彼此分离。聚焦后分离谱带的移动方法有正极移动、负极移动和压力移动等。一、正极移动: 在正极加电解质如NaCl,使聚焦后分离的谱带向该极移动。二、负极移动: 在负极加电解质如NaCl,使聚焦后分离的谱带向该极移动。三、压力移动: 加电压的同时施加压力,实现移动的同时保持聚焦状态。四、扫描检测分离谱带,无需谱带移动。......阅读全文

毛细管区带电泳发展史

  电泳是电解质中带电粒子在电场力作用下,以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用这种现象对化学和生物化学组分进行分离的技术称为电泳技术,可以实现电泳分离技术的仪器称为电泳仪。从20世纪30~40年代起,相继发展了多种基于抗对流载体的电泳仪(如纸电泳仪和凝胶电泳仪等)。传统电泳仪由于受到焦耳热的限

电泳仪发展史

  电泳是电解质中带电粒子在电场力作用下,以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用这种现象对化学和生物化学组分进行分离的技术称为电泳技术,可以实现电泳分离技术的仪器称为电泳仪。从20世纪30~40年代起,相继发展了多种基于抗对流载体的电泳仪(如纸电泳仪和凝胶电泳仪等)。传统电泳仪由于受到焦耳热的限

等电聚焦凝胶电泳原理

等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在电场中移

等电点聚焦的定义和特点

等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上。

等电点聚焦电泳的技术介绍

中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定  义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

等电点聚焦的定义和特点

等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上。

等电点聚焦电泳的技术介绍

聚丙烯酰胺凝胶电泳( polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。

载体两性电解质pH梯度等电聚焦实验—薄层分析等电聚焦

实验方法原理利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性 pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析。所以利用等电聚焦技术分析的对象只限于蛋白质和两性分子。分析的条件是凝胶中有稳定的、连续的和线性的 pH 梯度。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液仪器、耗材注射器水浴实验步骤一

电泳分析常用方法等电聚焦电泳技术

等电聚焦(isoelectric focusing,IEF)是60年代中期问世的一种利用有pH 梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位,因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。⒈IEF的基本原理 在IEF的电泳中,具有pH梯度的介质其分布是从阳极到

理想的等电聚焦电泳仪载体两性电解质应具备的条件

等电聚焦电泳仪载体两性电解质的介质是两性分子,在电场中迁移到自己的等电点后自然形成pH梯度。理想的载体两性电解质应具备以下条件:一、易溶于水,在pI处应有足够的缓冲能力,形成稳定的pH梯度,不致被蛋白质或其它两性电解质改变pH梯度。二、在pI处应有良好的电导和相同的电导系数,以保持均匀的电场。三、分

毛细管电泳仪毛细管电泳仪的选择方法

毛细管电泳仪需要用到高压电源,它能提供高压直流电场驱动力的直流电源。应该具有工作稳定、性能可靠、操作方便、测量准确、数据显示清晰和高性价比等优点。可以与光学仪器和分析仪器配套使用。

等电聚焦水平板电泳法的操作方法的介绍

  (1)制胶 取A液2.5ml,pH3~10的两性电解质(或其它pH范围的两性电解质)0.35ml,水1.25ml,50%甘油0.5ml,抽气5~10分钟,加B液25μl,N,N,N’,N’-四甲基乙二胺6μl,混匀后缓慢的注入水平模具内,室温下聚合。  (2)预电泳 将已聚合的聚丙烯酰胺凝胶放到

毛细管区带电泳色谱仪与毛细管等电聚焦电泳色谱仪比较

毛细管区带电泳色谱仪是利用溶质分子在毛细管内的背景电解质溶液中以不同速度迁移而形成一个个独立的溶质带而达到分离,毛细管等电聚焦电泳色谱仪是利用不同等电点的溶质分子分别聚集在毛细管内不同的位置上不作迁移而达到分离。两者比较如下:一、分离原理:  1、毛细管区带电泳色谱仪:电泳淌度不同  2、毛细管等电

等电聚焦电泳的基本原理

  在IEF的电泳中,具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极,pH值逐渐增大。如前所述,蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征,这样在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动,直至某一pH位点时失去电荷而停止移动,此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点(pl)。同理,位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷

等电聚焦电泳色谱仪的特点

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离。等电聚焦是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上,聚焦于一个狭窄区带中的过程。一、进行等电聚

固相pH梯度等电聚焦实验

制胶 等电聚焦 pH 梯度的测定 检测             实验方法原理 固相 pH 梯度凝胶是由固相 pH 梯度介质(丙烯酰胺衍生物)共价结合到聚

什么是等电聚焦电泳技术?

等电聚焦(IEF)是利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术,特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分,在区带电泳中分辨率最好。常用的pH梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等。

固相pH梯度等电聚焦实验

实验方法原理 固相 pH 梯度凝胶是由固相 pH 梯度介质(丙烯酰胺衍生物)共价结合到聚丙烯酰胺凝胶中并形成 pH 梯度,所以制胶过程比载体两性电解质凝胶复杂。灌胶的方法与常规聚丙烯酰胺梯度凝胶和 SDS 梯度凝胶相似。高质量的凝胶介质和固相 pH 梯度介质,聚合过程以及漂洗对固相 pH

制备电泳实验——等电聚焦制备电泳

实验方法原理等电聚焦制备电泳是一种非变性制备技术。由于等电聚焦电泳技术的特点,因而是一种理想的制备方法。试剂、试剂盒电极液两性电解质Ultrodex实验步骤一、液体介质垂直柱状蔗糖密度梯度等电聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制备和分析目的的等电聚焦方法。载体两性电解质在蔗糖密度梯度柱中形成 pH

引起高效毛细管电泳仪区带展宽的因素

        高效毛细管电泳仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平。引起电泳区带展宽的因素有纵向扩散、焦耳热、进样、吸附、电扩散、层流和检测器池体积等。一、

引起毛细管电泳仪区带展宽的因素

毛细管电泳仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平。引起电泳区带展宽的因素有纵向扩散、焦耳热、进样、吸附、电扩散、层流和检测器池体积等。一、纵向扩散:纵向扩散是影响

引起高效毛细管电泳仪区带展宽的因素

         高效毛细管电泳仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平。引起电泳区带展宽的因素有纵向扩散、焦耳热、进样、吸附、电扩散、层流和检测器池体积等。一

等电聚焦电泳(IEF)分离蛋白及测定蛋白质等电点

一、原理等电点聚焦(IEF)是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展,等电聚焦是在稳定的pH梯度中按等电点的不同分离两性大分子的平衡电泳方法。在电场中充有两性载体和抗对流介质,当加上电场后,由于两性载体移动的结果,在两极间逐步建立稳定的pH梯度,当蛋白质分子或其他两性分子存在于这样的pH梯度中时,这种

等电聚焦水平板电泳法的相关介绍

  两性电解质在电泳场中形成一个pH梯度,由于蛋白质为两性化合物,其所带的电荷与介质的pH值有关,带电的蛋白质在电泳中向极性相反的方向迁移,当到达其等电点(此处的pH值使相应的蛋白质不再带电荷)时,电流达到最小,不再移动。本法用于检测蛋白类和肽类供试品的等电点。  除另有规定外按以下方法测定。  1

双向凝胶电泳的等电聚焦相关介绍

  蛋白质是两性分子,在不同的pH环境中可以带正电荷、负电荷或不带电荷。对每个蛋白质来说都有一个特定的pH,此时蛋白质的静电荷为零,此pH值即该蛋白质的等电点(pI)。将蛋白质样品加载至pH梯度介质上进行电泳时,它会向与其所带电荷相反的电极方向移动。在移动过程中,蛋白分子可能获得或失去质子,并且随着

等电聚焦电泳与普通电泳区别

两者的原理上的区别:等电聚焦是根据被分离的蛋白质组分间的等电点的差异被分离,具有不同等电点的蛋白质会停留在相应的pH区带,而普通的SDS-PAGE凝胶电泳是根据蛋白质组分间的分子量大小差异进行分离的,分子量不同的蛋白质会停留在相应孔径的凝胶层。

蛋白等电聚焦凝胶电泳技术

蛋白等电聚焦凝胶电泳技术可应用于:(1)蛋白质的分离提纯;(2)蛋白质组学研究。实验方法原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,

固相pH梯度等电聚焦实验——检测

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液实验步骤1. 各种染色方法在所述的染色方法,包括各种考马斯亮蓝方法、银染色、荧光探针法、放射自显影、免疫固定等均适用于固相 pH 梯度等电聚焦后的检测。作者实验室进行转铁蛋白的考马斯亮蓝 R-250 染色时,脱色困难。用 G-250 染色时,脱色同样困难。为了

等电点聚焦分离蛋白质实验

等电点聚焦             实验方法原理 等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两性

蛋白等电聚焦凝胶电泳技术

1.原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在