影响电泳色谱仪泳动速度的因素
影响电泳色谱仪泳动速度的因素有电场、缓冲液和支持介质等。一、电场:1、电场强度:电场强度对带电颗粒的泳动速度起着十分重要的作用。电场强度越大,泳动速度越快,单位时间内颗粒的迁移距离越大,分离时间越短。根据电场强度大小,电泳可分为常压电泳(100~500V)和高压电泳(500~5000V)。常压电泳的电场强度一般为2~10V/cm,分离时间长,需数小时到数天,多用于分离大分子物质。高压电泳的电场强度一般为20~200V/cm,分离时间短,有时仅需数分钟,多用于分离小分子物质。2、电极和电极反应:电泳的电极材料大都采用铂金丝,铂金丝的安放位置影响电场强度。若两极间铂金丝位置放的不好,电场强度不均匀,常会使电泳谱带弯曲或同一样品的泳动速度不同。通电过程中电极两端会发生电解反应:正极(氧化极):2H2O → 4H+ + O2+4eˉ负极(还原极):2H2O + 2eˉ→ 2OHˉ+ H2在电泳过程中,正负极均有气体产生,负极有密集的氢气......阅读全文
电泳色谱仪的分离模式
电泳是电解质中的带电粒子在电场作用下,以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用电泳现象对化学和生物化学组分进行分离的仪器称为电泳色谱仪(简称电泳仪),电泳仪的分离模式有区带电泳、移界电泳、等电聚焦电泳和等速电泳等。一、区带电泳:不同的离子成分在均一的缓冲液中分离成独立的区带,可用染色等方法显示出来
传统电泳色谱仪分离模式
传统电泳色谱仪分离模式有自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-PAGE电泳、琼脂糖凝胶电泳、等电聚焦电泳和等速电泳等。一、自由界面电泳:1、原理:溶液在U型管中,根据样品各组分泳动速度的不同进行分离。2、特点:没有载体,对流比较严重,组分不能完全分离,成分相互重叠,检
毛细管电泳色谱仪电泳基本概念
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离。电泳基本概念包括电泳现象、电泳技术、电泳速度和电泳淌度等。一、电泳现象:电泳现象是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的现象。二、电泳技术:电泳技术是指利用
毛细管电泳色谱仪与传统电泳色谱仪相比有什么特点
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度和分配系数的差异进行分离。由于毛细管内径小,表面积和体积的比值大,易于散热,因此,毛细管电泳色谱仪可减少焦耳热的产生,这是毛细管电泳色谱仪和传统电泳色谱仪的根本区别。与传统电泳色谱仪相比,毛细管电泳色谱仪具有以下特点
影响毛细管电泳色谱仪电泳速度的因素
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,影响电泳速度的因素有颗粒性质、电场强度、溶液性质、温度、电渗和载体孔径等。一、颗粒性质:颗粒的直径、形状和静电荷。二、电场强度:电场强度越大,带电颗粒的电泳速度越快。三、溶液性质:电极溶液
毛细管电泳色谱仪分析中的电泳现象
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平。一、电泳:电泳是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的现象。二、电泳技术:电
影响毛细管电泳色谱仪电泳速度的因素
电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,影响电泳速度的因素有颗粒性质、电场强度、溶液性质、温度、电渗和载体孔径等。一、颗粒性质: 颗粒的直径、形状和静电荷。二、电场强度: 电场强度越大,带电颗粒的电泳速度越
传统电泳色谱仪分析的特点
电泳色谱仪可分为传统电泳色谱仪(简称传统电泳仪)和毛细管电泳色谱仪,传统电泳仪有纸电泳仪、薄膜电泳仪、薄层电泳仪、凝胶电泳仪、等电聚焦电泳仪和等速电泳仪等。传统电泳仪分析具有以下特点:一、凡是带电物质均可应用某一电泳仪进行分离,并可进行定性和定量分析。二、样品用量极少。三、设备简单,可在常温下进行。
电泳色谱仪基本分类方法
电泳色谱仪基本分类方法有多种。一、按所用电压不同可分为:1、低压电泳:100~500V,电泳时间较长,适用于分离蛋白质等生物大分子。2、高压电泳:500~5000V,电泳时间较短,有时只需几分钟,多用于分离氨基酸、多肽、核苷酸和糖类等小分子。3、超高压电泳:30~50kV,毛细管电泳,使分析科学从微
毛细管电泳色谱仪电泳淌度的测定方法
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离。电泳淌度的测定方法有电中性标志物法、电流法和流动电势法。一、电中性标志物法:在给定检测器上要有响应,214或200nm UV检测时常用二甲基甲酰胺和二甲亚砜测定电泳淌度。例:石英毛细管长度
影响毛细管电泳色谱仪电泳淌度的因素
毛细管电泳色谱仪电泳淌度又称电泳迁移率,是指带电颗粒在毛细管电泳仪毛细管中单位电场下的泳动速度。影响电泳迁移率的因素有内在因素和外界因素。一、影响电泳迁移率的内在因素:1、颗粒所带净电荷量:颗粒迁移率与颗粒所带净电荷量成正比。2、颗粒大小和形状: 颗粒直径小而接近于球形,在电场中泳动速度快。3、DN
毛细管电泳色谱仪分析中的电泳和电渗
毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以电渗流为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离,电泳淌度不同是电泳分离的内因和前提。一、电泳:1、电泳现象:电泳现象是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的现象。2、电泳技术:电泳技术是指利用
凝胶电泳色谱仪的支持介质
电泳仪是利用在电场作用下待分离样品中各分子带电性质、分子大小和形状等差异,使带电分子产生不同的迁移率,从而对样品进行分离。自由界面电泳仪没有支持介质,扩散和对流都比较强,影响分离效果。于是出现了固定支持介质的电泳仪,减少了扩散和对流等干扰作用。凝胶作为支持介质的引入大大促进了电泳仪的发展,使电泳仪成
等电聚焦电泳色谱仪的特点
等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离。等电聚焦是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上,聚焦于一个狭窄区带中的过程。一、进行等电聚
影响凝胶电泳色谱仪电泳迁移率的因素
影响凝胶电泳色谱仪电泳迁移率的因素有样品的物理性质、支持物介质、电场强度和缓冲液等。一、样品的物理性质:1、分子大小:线状双链DNA分子长度(碱基对数目bp)的常用对数与迁移距离成反比,以此来测定DNA片段(线性双链)的分子量准确且方便。当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶很难将它们分开,
毛细管区带电泳色谱仪与毛细管等电聚焦电泳色谱仪比较
毛细管区带电泳色谱仪是利用溶质分子在毛细管内的背景电解质溶液中以不同速度迁移而形成一个个独立的溶质带而达到分离,毛细管等电聚焦电泳色谱仪是利用不同等电点的溶质分子分别聚集在毛细管内不同的位置上不作迁移而达到分离。两者比较如下:一、分离原理: 1、毛细管区带电泳色谱仪:电泳淌度不同 2、毛细管等电
毛细管电泳色谱仪的应用
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到纳升级水平,应用十分广泛。一、在蛋白质和多肽分析中的应用: 1、肽、蛋白质和糖蛋白的鉴别。 2、结构分析。 3、纯度
毛细管电泳色谱仪检测系统
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带的
毛细管电泳色谱仪检测技术
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。CE的毛细管极细,
毛细管电泳色谱仪特点归纳
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。CE分离模式有毛细
毛细管电泳色谱仪分离系统
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,毛细管是分离的关键。一、毛细管材质:理想的毛细管必须是化学和电惰性,能透过紫外和可见光,有一定的韧性,富有弹性,易于弯曲,耐用而且便宜。目前使用的材质有聚四氟乙烯、玻璃和石英等,其中石英最
毛细管胶束电泳色谱仪工作原理
毛细管胶束电泳色谱仪是在缓冲液中加入浓度高于胶束临界浓度的表面活性剂,胶束相在分离中起到准固定相的作用,是电泳技术与色谱技术相结合的产物。其突出优点是除能分离离子化合物外,还能分离不带电荷的中性化合物。把离子型表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)加入缓冲液,当其浓度超过临界浓度后形成有一疏水内核、外部带负
毛细管胶束电泳色谱仪分析技术
毛细管胶束电泳色谱仪(MECC)是在缓冲液中加入浓度高于胶束临界浓度的表面活性剂,胶束相在分离中起到准固定相的作用,是电泳技术与色谱技术相结合的产物。一、工作原理: MECC中,把离子型表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)加入缓冲液,当其浓度超过临界浓度后形成有一疏水内核、外部带负电的胶束。虽然胶束带负
经典电泳色谱仪各分离模式性能特点
经典电泳色谱仪分离模式有自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-PAGE电泳、琼脂糖凝胶电泳、等电聚焦电泳和等速电泳等。经典电泳仪由于受到焦耳热的限制,只能在低电场强度下进行电泳,分离时间长,分离效率低。一、自由界面电泳: 1、原理:溶液在U型管中,根据样品各组分泳动
等电聚焦电泳色谱仪的检测方法
等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离,检测方法有染色法、扫描法和其它检测方法。一、染色法:1、考马斯亮蓝染色法。2、银染色法。3、同工酶染色法。4、专一蛋白染色法。5、荧光标记以及免疫法。二、扫描法:激光光源强度大,单色性好,扫描I
毛细管电泳色谱仪的用途
毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,用途广泛。一、手性化合物分离:大量研究表明,生命活动与生物分子的手性密切相关,构成
毛细管电泳色谱仪分离类型
毛细管电泳色谱仪分离类型有电泳型、色谱型、联用型和其它型。一、电泳型:1、毛细管区带电泳:毛细管内只填充pH缓冲液。2、毛细管凝胶电泳:毛细管内填充聚丙烯酰胺等凝胶。3、毛细管等电聚焦电泳:毛细管内填充pH梯度介质。4、毛细管等速电泳:通常采用不连续(自由溶液)电泳介质。二、色谱型:1、填充毛细管电
毛细管电泳色谱仪的应用
毛细管电泳色谱仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,主要应用领域是生命科学,分离对象主要涉及氨基酸、多肽、蛋白质和核酸等生物分子。HPCE一开始就紧紧地结合这一重点应用领域,开展了消除毛细管壁吸附和提高分离度等一系列研究。至今,
影响电泳色谱仪泳动速度的因素
影响电泳色谱仪泳动速度的因素有电场、缓冲液和支持介质等。一、电场:1、电场强度:电场强度对带电颗粒的泳动速度起着十分重要的作用。电场强度越大,泳动速度越快,单位时间内颗粒的迁移距离越大,分离时间越短。根据电场强度大小,电泳可分为常压电泳(100~500V)和高压电泳(500~5000V)。常压电泳的
毛细管电泳色谱仪整体柱制备
毛细管电泳色谱仪整体毛细管柱是采用有机和无机方法在毛细管中进行原位自由基聚合反应或固化,形成连续床固定相,不用柱塞,简化了柱制备过程。通过改变单体可引入多种官能团,有更好的多孔性和渗透性,对流动相阻力小,溶质在固定相和流动相之间快速分配,有利于实现高速分离。整体毛细管柱按基质不同可分为无机基质整体毛