聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪凝胶总浓度与蛋白质相对......

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术。凝胶的三维网状结构具有分子筛效应,分子筛效应的大小取决于凝胶孔径大小与生物大分子大小的接近程度。凝胶总浓度不同,平均孔径不同,不同大小和形状的大分子通过筛孔时受到的阻力不同,加上大分子的电荷效应,使迁移率不同的大分子得以分离,广泛用于蛋白质等生物大分子的分析。凝胶总浓度与蛋白质相对分子量的关系:一、蛋白质相对分子量范围:<1×104适用的凝胶总浓度:20%~30%二、蛋白质相对分子量范围:1×104~4×104适用的凝胶总浓度:15%~20%三、蛋白质相对分子量范围:4×104~1×105适用的凝胶总浓度:10%~15%四、蛋白质相对分子量范围:1×105~5×105适用的凝胶总浓度:5%~10%五、蛋白质相对分子量范围:>5×105适用的凝胶总浓度:2%~5%......阅读全文

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪凝胶总浓度与蛋白质相对......

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术。凝胶的三维网状结构具有分子筛效应,分子筛效应的大小取决于凝胶孔径大小与生物大分子大小的接近程度。凝胶总浓度不同,平均孔径不同,不同大小和形状的大分子通过筛孔时受到的阻力不同,加上大分子的电荷效应,使迁移率不同的大分子得以分离,广泛用

线性浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪介绍

连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪测定蛋白质分子量时,由于SDS和巯基乙醇的作用,天然蛋白质解离为亚基和肽链,测得的分子量不是天然蛋白质的分子量。为了弥补这一缺陷,可采用线性浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳仪分离和鉴定蛋白质。一、工作原理:聚丙烯酰胺凝胶的浓度可在一定范围内(如4%~30%)连续改变,凝

凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量

实验目的掌握凝胶层析的基本原理。学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。实验原理凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。凝胶

蛋白质凝胶色谱仪分类

蛋白质凝胶色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:蛋白质凝胶实验室色谱仪和蛋白质凝胶工业色谱仪。2、按功能可分:蛋白质凝胶分析色谱仪和蛋白质凝胶制备色谱仪。3、按结构可分:台式蛋白质凝胶色谱仪和落地式蛋白质凝胶色谱仪。4、按分离规模可分:微型蛋白质凝胶色谱仪、小型蛋白质凝胶色谱仪和大型蛋白质凝胶色谱仪

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪载体的合成与性质

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的载体是聚丙烯酰胺凝胶。聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH2,简称Acr)和交联剂N,N′-甲叉双丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH-CO-CH = CH2,简称Bis)在催化剂的作用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链,相邻的两个链通过甲叉桥交

凝胶层析法(gel-chromatography)测定蛋白质相对分子质量

实验目的掌握凝胶层析的基本原理。学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。实验原理凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。凝胶

蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳

一.试剂制备:1.分离胶缓冲液(pH8.9):36.6gTris,48ml1mol/l的HCl,或先加水至80ml,用浓HCl调pH,再定容至100ml.2.浓缩胶缓冲液(pH6.7):5.98gTris,48ml1mol/l的HCl, 或先加水至80ml,用浓HCl调pH,再定容至100ml.3.

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的支持介质

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪(简称聚丙烯酰胺凝胶电泳仪)的支持介质有原性凝胶和变性凝胶。原性凝胶是在凝胶中不加变性剂,蛋白质在这种凝胶中的迁移率受它们的静电荷和分子大小两个因素的影响,分子量不同,而带静电荷相同,可能迁移率相同。因此,在原性凝胶中进行电泳不能测定蛋白质分子量。变性凝胶是在凝胶中加入变性剂

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的支持介质

        聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪(简称聚丙烯酰胺凝胶电泳仪)的支持介质有原性凝胶和变性凝胶。原性凝胶是在凝胶中不加变性剂,蛋白质在这种凝胶中的迁移率受它们的静电荷和分子大小两个因素的影响,分子量不同,而带静电荷相同,可能迁移率相同。因此,在原性凝胶中进行电泳不能测定蛋白质分子量。变性

蛋白质凝胶工业色谱仪分类

蛋白质凝胶工业色谱仪分类有多种。1、按分离规模可分:小型蛋白质凝胶工业色谱仪和大型蛋白质凝胶工业色谱仪。2、按作用可分:蛋白质凝胶工业定量色谱仪和蛋白质凝胶工业定性色谱仪。3、按产地可分:国产蛋白质凝胶工业色谱仪和进口蛋白质凝胶工业色谱仪。4、按洗脱方式可分:等度洗脱蛋白质凝胶工业色谱仪和梯度洗脱蛋

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪凝胶载体合成方式

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术,由于分辨率高,目前已广泛用于蛋白质等生物大分子的分析。聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH2,简称Acr)和交联剂N,N′-甲叉双丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH-CO-CH = CH2,简称B

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的优点

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是以聚丙烯酰胺凝胶为载体,不仅能分离含有各种大分子的混合物,而且可以研究生物大分子的特性如电荷、分子量、等电点和分子构型等。一、孔径大小与生物大分子具有相似的数量级,具有良好的分子筛效应。二、孔径大小可调节,可用于分离多种生物分子。三、机械强度好,弹性大,电渗低、分辨率高。四

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的类型

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪根据有无浓缩效应可分为连续凝胶电泳色谱仪和不连续凝胶电泳色谱仪。一、连续凝胶电泳色谱仪:采用相同孔径的凝胶和相同的缓冲液(样品缓冲液、凝胶缓冲液和电极缓冲液),在pH恒定和离子强度相同的条件下进行电泳。  1、分离效应:主要靠电荷效应和分子筛效应实现分离。  2、特点:(1)

血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验             实验方法原理 血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、用样量少和

血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、用样量少和分辨率高等优点,并可通过控制单体浓度或单体与交联剂的比例聚合成孔径大小不同的凝胶,用于蛋白质、核酸等物质的分离、定性和定量分析。实验方法原理血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳

血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

实验方法原理 血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、用样量少和分辨率高等优点,并可通过控制单体浓度或单体与交联剂的比例聚合成孔径大小不同的凝胶,用于蛋白质、核酸等物质的分离、定性和定量分析。根据凝胶形状不同分为盘状电泳和板状电泳。盘状电泳是在直立的

蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳1

【实验原理】蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中为带电的颗粒,在电场中能向正极或负极移动。当溶液pH值大于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动;反之则向负极移动,这种带电的颗粒在电场中泳动的现象称为电泳(electrophoresis)。不同的蛋白质由于等电点不同,在电场中的泳动速率也不

蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳2

(4)10% 过硫酸铵,5ml(0.5g过硫酸铵, 加5ml蒸馏水, 新鲜配置),-20℃保存一个月左右。(5)10% (w/v)SDS,10g SDS加蒸馏水100ml, 室温保存。(6)10% TEMED 0.1ml TEMED , 加0.9 ml蒸馏水。(7) 2×上样缓冲液(10ml):0.

蛋白质单向SDS凝胶电泳实验——连续SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

电泳可用于分离复杂的蛋白质混合物,研究蛋白质的亚基组成以及证实蛋白质的均一性等,还能纯化出蛋白质用于后续的研究工作。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的孔径,蛋白质的电荷、大小、性质等因素共同决定了蛋白质的电泳迁移率。实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS磷酸仪器、耗材电泳仪离心机实验步骤1.  按“Laemm

琼脂糖凝胶电泳色谱仪分析技术

琼脂糖凝胶电泳色谱仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳技术,广泛用于核酸研究,为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。一、工作原理:琼脂糖凝胶电泳中,DNA分子的迁移率与其分子量的常用对数成反比。DNA分子构象对迁移率也有影响,迁移率为共价闭环DNA>直线DNA>开环双链DNA

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的支持介质

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质进行电泳分离,聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好、有弹性、透明、化学性质稳定、对pH和温度变化小、没有吸附、电渗作用小等特点,是一种很好的支持介质。一、聚丙烯胺凝胶聚合方式:聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH2,简称Acr)

蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE,polyacrylamide-gel-...3

【目的和要求】1. 掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理2. 掌握垂直板状凝胶电泳槽的使用和凝胶的配制方法。3. 学会利用相对迁移率分析蛋白质种类。【实验原理】带电颗粒在电场的作用下,向着与其相反的电极移动,称为电泳。电泳做为一种物质分离及鉴定技术,其原理在于任一物质质点,由于其本身的解离作用或由于表面

蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

实验方法原理 蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4 g SDS/1 g蛋白质比例的SDS-蛋白质多肽复合物,该复合物带负电,故可在聚丙烯酰胺凝胶电泳中向正极迁移,且主要由于凝胶的分子筛作用,迁移速率与蛋白质的分子量大小有关,因此可以

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳,由于此种凝胶具有分子筛的性质,所以本法对样品的分离作用,不仅决定于样品中各组分所带净电荷的多少,也与分子的大小有关。其次,聚丙烯酰胺凝胶电泳还有一种独特的浓缩效应,即在电泳开始阶段,由于不连续pH 梯度的作用,将样品压缩成一条狭窄区带

蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE,polyacrylamide-gel-...2

(3)电荷效应在分离胶中,各种血清蛋白所带静电荷不同,而有不同的迁移率。表面电荷多,则迁移快,反之则慢。因此各种蛋白质按照电荷多少、分子量大小及分子形状以一定顺序排成一个个区带。不连续PAGE所具有的分子筛效应、浓缩效应和电荷效应大大提高了它的分辨率。电泳后蛋白质染色目前常用的是考马斯亮蓝法,其比氨

蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapiro建立,1969年由weber和Osborn进一步完善。主要用于(1)蛋白质的分离(2)蛋白质的纯化。实验方法原理蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4 g SDS/1 g蛋白质比例的

蛋白质的(PAGE)聚丙烯酰胺凝胶电泳制备方法

一.试剂制备:    1.分离胶缓冲液(pH8.9):36.6gTris,48ml1mol/l的HCl,或先加水至80ml,用浓HCl调pH,再定容至100ml.    2.浓缩胶缓冲液(pH6.7):5.98gTris,48ml1mol/l的HCl, 或先加水至80ml,用浓HCl调pH,再定容至

蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

SDS-PSGE             实验方法原理 蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4 g SDS/1 g蛋白

垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离蛋白质

一、试验目的了解并掌握垂直板凝胶电泳的使用方法。二、实验原理聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳,由于此种凝胶具有分子筛的性质,所以本法对样品的分离作用,不仅决定于样品中各组分所带净电荷的多少,也与分子的大小有关。其次,聚丙烯酰胺凝胶电泳还有一种独特的浓缩效应,即在电泳开

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理

2006年生化考研题目,简答第五题。蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理 聚丙烯酰胺凝胶,是由丙烯酰胺单体(Acr)和少量的交联剂N,Nˊ-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂(过硫酸胺或核黄素)和加速剂(N, N,NˊNˊ-四甲基乙二胺)的作用下聚合交联成的三维网状结构的凝胶。以此凝胶为支持物的电泳称聚丙