反相键合相色谱仪的分离机制
典型的反相键合相色谱仪是采用非极性键合相和极性流动相组成的色谱体系,固定相常用十八烷基(ODS或C18)键合相,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相键合相色谱仪是采用弱极性或中等极性键合相和极性大于固定相的流动相组成的色谱体系。反相键合相表面具有非极性烷基官能团和未被取代的硅醇基,硅醇基具有吸附性能,剩余硅醇基的多寡视覆盖率而定。目前,反相键合相色谱仪的分离机制还没有一致的看法,大致有两种观点:一种认为属于分配色谱,另一种认为属于吸附色谱。一、分配色谱的分离机制:分配色谱的分离机制是假设混合溶剂(水 + 有机溶剂)中极性弱的有机溶剂吸附于非极性烷基配合基表面,组分分子在流动相中与被非极性烷基配合基所吸附的液相中进行分配。二、吸附色谱的分离机制:吸附色谱的分离机制可用疏溶剂理论解释。疏溶剂理论把非极性烷基键合相看作是在硅胶表面上覆盖了一层键合的十八烷基的分子毛,分子毛具有强疏水特性。当用水和有机溶剂组成的极性溶剂为流动相分离有......阅读全文
化学键合相色谱仪的优点
化学键合相色谱仪的优点:一、适用于几乎所有类型的化合物的分离。一方面通过控制化学键合反应,可以把不同的有机基团键合到硅胶表面上,从而大大提高了分离的选择性。另一方面可以通过改变流动相的组成来有效地分离非极性、极性和离子型化合物。二、由于键合到载体上的基团不易被剪切而流失,这不仅解决了由于固定液流失所
化学键合相色谱仪的用途
由于化学键合相色谱仪的键合固定相非常稳定,在使用中不易流失。由于键合到载体表面的官能团可以是各种极性的,适用于各种样品的分离分析。目前化学键合相色谱仪已获得了日益广泛的应用,在液相色谱中占有极其重要的地位。一、正相键合相色谱的用途:正相键合相色谱多用于分离各类极性化合物,如染料、甾体激素、多巴胺、氨
化学键合相色谱仪的优点
化学键合相色谱仪的优点:一、适用于几乎所有类型的化合物的分离。一方面通过控制化学键合反应,可以把不同的有机基团键合到硅胶表面上,从而大大提高了分离的选择性。另一方面可以通过改变流动相的组成来有效地分离非极性、极性和离子型化合物。二、由于键合到载体上的基团不易被剪切而流失,这不仅解决了由于固定液
化学键合相色谱仪的特点
化学键合相色谱仪是采用化学键合相作固定相的液相色谱仪。一、适合几乎所有类型化合物的分离。 1、通过控制化学键合反应,可以把不同的有机基团键合到硅胶表面上,大大提高了分离的选择性。 2、可以通过改变流动相的组成分离非极性、极性和离子型化合物。二、键合到载体上的基团不易被剪切而流失。 1、解决了由
反相键合相色谱仪C18柱化学性质对柱性能的影响
影响反相键合相色谱仪C18柱性能的柱化学性质指标有键合类型、碳覆盖率和封端等。一、键合类型:1、单体键合:键合相分子与基体单点相连。单齿键合传质速率高,色谱柱平衡快。2、聚合体键合:键合相分子与基体多点相连。双齿键合增加色谱柱稳定性和载样量。二、碳覆盖率:碳覆盖率指与基质相连的键合相的量。高碳覆盖率
液相色谱仪化学键合相解析
液相色谱仪化学键合相有Si-O-C键型、Si-N或Si-C键型、Si-O-Si-C键型等。一、Si-O-C键型:酯化反应是最早用于制备键合相的反应。用硅羟基Si-OH和醇类R-OH通过酯化反应制得的单分子层硅酸酯易水解,醇解,热稳定性差,现已不大使用。二、Si-N或Si-C键型:比Si-O-C键型的
极性键合相色谱仪固定相介绍
极性键合相色谱仪固定相是由键型、主体基团和极性端基构成的键合相。一、组成: 1、键型: 键型是整个极性键合基团与硅胶母体直接相连的桥梁。如Si-O-Si-C或Si-O-Si-N。 2、主体基团: 为直键烃基或醚基。使硅胶表面与特定的极性基团之间保持一定距离。 3、极
液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。 在检测
液相色谱仪键合相的端基封尾
液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应,将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因:残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响,特别是在非极性键合相的情况下,硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附,使键合相的分离性能改变。二、方法:
正相键合相色谱法
键合相色谱法正相键合相色谱法 氰基与氨基化学键合相 是正相键合色谱法较常用的固定相。流动相与以硅胶为固定相的吸附色谱法的流动相相似,也是烷烃(常用正已烷等)加适量极性调整剂而构成。氰基键合相的分离选择性与硅胶相似,但极性小于硅胶,即用相同的流动相及其它条件相同时,同一组分的保留时间将小于硅胶
气相色谱仪基础词汇化学键合相的概念
化学键合相:chemically bonded phase 用化学反应在载体表面键合上特定基团的固定相。
化学键合相色谱仪应用范围分析
化学键合相色谱仪有反相键合相色谱仪、正相键合相色谱仪和其它键合相色谱仪,在液相色谱仪中占有很重要的地位,应用广泛。一、反相键合相色谱仪:反相键合相色谱仪的应用约占键合相色谱仪的70%,是目前应用最广泛的液相色谱仪。反相键合相有C18、C8、氰基和苯基等,C18、C8、氰基和苯基的应用分别约占反相键合
离子交换键合相色谱仪固定相简介
离子交换键合相色谱仪固定相是在化学键合的有机硅烷分子中引入离子交换基团而制成的键合相。一、离子交换容量: 离子交换容量是指单位质量的离子交换剂能与其它离子发生交换的量。 离子交换容量与固定相的表面积有关。 离子交换容量越大,负载能力越大,k值越大。二、
液相色谱仪键合相为什么要封尾?
液相色谱仪键合相的封尾是用三甲基硅烷等小分子与键合了C18的硅胶进行进一步反应的化学处理过程。一、C18和其它键合相在发生键合反应时只能覆盖不到50%的硅胶表面,经封尾处理的硅胶基质固定相减小了溶质与固定相之间的次级相互作用,使分离效果明显改善。二、、硅胶表面未被键合的酸性硅羟基会与样品组分相互作用
液相色谱仪键合相为什么要封端?
液相色谱仪键合相是将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相。目前,键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基质,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应形成Si-O-Si-C键型的单分子膜而制成。硅胶表面的硅醇基密度约为5个/nm2,由于空间位阻效应,不可能将较大的有
化学键合相专用色谱仪类型
化学键合相专用色谱仪类型有多种。1、按分离目的可分:化验室化学键合相专用色谱仪和工业化学键合相专用色谱仪。2、按灵敏度可分:微量化学键合相专用色谱仪和痕量化学键合相专用色谱仪。3、按洗脱方式可分:等度洗脱化学键合相专用色谱仪和梯度洗脱化学键合相专用色谱仪。4、按色谱柱的控温方式可分:化学键合相专用恒
离子交换键合相色谱仪固定相简介
离子交换键合相色谱仪固定相是在化学键合的有机硅烷分子中引入离子交换基团而制成的键合相。一、离子交换容量:离子交换容量是指单位质量的离子交换剂能与其它离子发生交换的量。离子交换容量与固定相的表面积有关。离子交换容量越大,负载能力越大,k值越大。二、固定相类型: 1、按引入电荷基团的性质可分为:(1)
高效液相色谱仪化学键合相解析
高效液相色谱仪化学键合相有 Si-O-C 键型、Si-N 或 Si-C 键型、Si-O-Si-C 键型等。一、Si-O-C 键型:酯化反应是最早用于制备键合相的反应。用硅羟基 Si-OH 和醇类 R-OH 通过酯化反应制得的单分子层硅酸酯易水解,醇解,热稳定性差,现已不大使用。二、Si-N 或 Si
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应,将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因:残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响,特别是在非极性键合相的情况下,硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附,使键合相的分离性能改变。二、方
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应,将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因: 残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响,特别是在非极性键合相的情况下,硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附
化学键合相色谱仪的常用固定相
化学键合相色谱仪的固定相分疏水基团和极性基团,常用固定相有C18、C8、C3、C4、苯基、-CN、-NH2、二醇基、醚基和聚苯乙烯基等。一、C18:1、分离方式:反相和离子对。2、应用特点:普适性好,保留值大。适合溶于水的高极性和中等极性化合物的分离。二、C8:1、分离方式:反相和离子对。2、应用特
液相色谱仪键合相制备时的硅胶预处理
液相色谱仪键合相制备时,作为载体的硅胶预处理包括酸处理、中和与干燥等。一、酸处理:1、酸处理的目的:(1)洗去硅胶制备、运输和保存过程中进入的污染物。(2)除去硅胶表面层的金属氧化物杂质,如Na+、Ca2+、Al3+和Fe3+等。(3)使硅胶表面的硅氧烷键打开,形成尽可能多的自由羟基,有利于反应。2
高效液相色谱仪键合相的端基封尾
高效液相色谱仪键合相的端基封尾是用氯化三甲基硅烷等试剂与键合相硅胶表面的残留硅醇基反应,将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。一、原因:残余的硅醇基会对键合相的分离性能产生影响,特别是在非极性键合相的情况下,硅醇基的存在会降低硅胶表面的疏水性。对极性化合物或溶剂产生吸附,使键合相的分离性能改变。二、方
如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质如血
如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余?
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质
反相离子键合相色谱仪种类有哪些
反相离子键合相色谱仪种类有多种。 1、按分离目的可分:实验室反相离子键合相色谱仪和工业反相离子键合相色谱仪。 2、按使用范围可分:专用型反相离子键合相色谱仪和普通型反相离子键合相色谱仪。 3、按分离规模可分:小型反相离子键合相色谱仪和大型反相离子键合相色谱仪。 4、按作用可分:
键合相色谱法介绍
键合相色谱法是由液-液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上,克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解,及流动相通过色谱柱时的机械冲击,固定相不断损失,色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。正常相色谱法在正常相色谱法中共价结合到载体
化学键合相色谱仪流动相的要求与常用溶剂
化学键合相色谱仪流动相由为底剂和洗脱剂组成。底剂决定基本的色谱分离情况,洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分进行选择性分离。一、流动相的要求:1、溶剂具有稳定的化学性质。2、溶剂的选择与检测器相容。3、溶剂的粘度小。4、溶剂的沸点不能太低。5、溶剂的纯度高且价格便宜。二、常用溶剂:1、正相键
高效液相色谱仪键合相为什么要封端
高效液相色谱仪键合相是将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相。目前,键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基质,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应形成Si-O-Si-C键型的单分子膜而制成。硅胶表面的硅醇基密度约为5个/nm2,由于空间位阻效应,不可能将较大
高效液相色谱仪键合相制备时的硅胶预处理
高效液相色谱仪键合相制备时,作为载体的硅胶预处理包括酸处理、中和与干燥等。一、酸处理:1、酸处理的目的:(1)洗去硅胶制备、运输和保存过程中进入的污染物。(2)除去硅胶表面层的金属氧化物杂质,如 Na+、Ca2+、Al3+和 Fe3+等。(3)使硅胶表面的硅氧烷键打开,形成尽可能多的自由羟基,有利于