反相键合相色谱仪C18柱化学性质对柱性能的影响
影响反相键合相色谱仪C18柱性能的柱化学性质指标有键合类型、碳覆盖率和封端等。一、键合类型:1、单体键合:键合相分子与基体单点相连。单齿键合传质速率高,色谱柱平衡快。2、聚合体键合:键合相分子与基体多点相连。双齿键合增加色谱柱稳定性和载样量。二、碳覆盖率:碳覆盖率指与基质相连的键合相的量。高碳覆盖率:分辨率高,分析时间长。低碳覆盖率:分析时间短。三、封端:封端指在固定相键合步骤后用短链将裸露的硅羟基键合并封闭起来。封端可减轻待测组分与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应而引起的峰拖尾现象。对极性样品,未封端和经过封端的色谱柱在选择性上有明显差异。......阅读全文
反相键合相色谱仪C18柱化学性质对柱性能的影响
影响反相键合相色谱仪C18柱性能的柱化学性质指标有键合类型、碳覆盖率和封端等。一、键合类型:1、单体键合:键合相分子与基体单点相连。单齿键合传质速率高,色谱柱平衡快。2、聚合体键合:键合相分子与基体多点相连。双齿键合增加色谱柱稳定性和载样量。二、碳覆盖率:碳覆盖率指与基质相连的键合相的量。高碳覆盖率
反相键合相色谱中,C18柱的分离原理
针对常规C18反相色谱柱无法满足在高水相及纯水流动相条件下的液相色谱分析,采用混合键合的方式得到一种新型亲水
反相键合相色谱中,C18柱的分离原理
针对常规C18反相色谱柱无法满足在高水相及纯水流动相条件下的液相色谱分析,采用混合键合的方式得到一种新型亲水
反相键合相色谱仪C18柱的物理性质
反相键合相色谱仪C18柱的物理性质指标有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积和孔径等。一、硅胶纯度:硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶(高纯)由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱
反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求
反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适: 满足不同的分离要求。 由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形
反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求
反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:满足不同的分离要求。由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形良好:满足定量精度、灵敏度和分离度要求。
键合相色谱仪色谱柱的维护
键合相色谱仪色谱柱的维护:一、对硅胶基键合相,水溶液流动相的pH值不得超出2~8.5,温度不宜过高。二、色谱柱在酸性或碱性条件下使用后,应依次用水和甲醇清洗。三、防止色谱柱被振动或撞击,否则柱内填料床层产生裂缝和空隙,会出现驼峰或对峰。四、防止流动相逆向流动,否则会使固定相层位移,柱效下降。五、除去
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱?
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
反相键合相色谱仪简介
将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相,以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪,简称键合相色谱仪。流动相极性比固定相极性强的键合相色谱仪称为反相键合相色谱仪。一、固定相:在载体表面键合含弱极性或中等极性的官能团,如十八烷基硅烷、辛烷基、甲基和苯基等。二、流动相:以水为主体,加适量
反相键合相色谱仪简介
将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相,以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪,简称键合相色谱仪。流动相极性比固定相极性强的键合相色谱仪称为反相键合相色谱仪。一、固定相:在载体表面键合含弱极性或中等极性的官能团,如十八烷基硅烷、辛烷基、甲基和苯基等。二、流动相:以水为主体,加适量
键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标
键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标有平均颗粒度及分布、颗粒形状、平均孔径及分布、化学键合相、端基封口、含碳量、硅胶的活性、硅胶的杂质含量、硅胶的pH稳定性和硅胶的热稳定性等。一、平均颗粒度及分布: 颗粒度越小,传质越好,涡流扩散越小,柱效越高,柱压越高。 颗粒分布越宽
液相色谱仪ODS柱物理性质对柱性能的影响
影响液相色谱仪ODS柱性能的柱物理性质指标有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积和孔径等。一、硅胶纯度:硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶(高纯)由于金属含量低,硅羟基pKa高
化学键合相色谱仪C18色谱柱的维修
化学键合相色谱仪C18色谱柱的维修包括柱污染再生、柱污染的修复和柱塌陷的修复等。一、柱污染再生:色谱柱污染后,可以用合适的溶剂冲洗,使柱效再生。C18柱常规的再生方法:1、分别用甲醇、甲醇和水各60mL依次通过色谱柱,再用100%甲醇60mL平衡色谱柱后封存,柱效将恢复正常。必要时,根据柱污染性质(
化学键合相色谱仪C18色谱柱规格对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱规格包括柱内径和柱长度两方面。一、C18柱的柱内径和柱长度: 1、分析型C18柱:(1)柱内径:2~6mm(2)柱长度:50~300mm 2、制备型C18柱:(1)柱内径:20~80mm(2)柱长度:150~500mm二、柱内径的影响:一般来说,柱内径不影响分离度和分
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料的粒径、孔径、孔体积、键合反应、含碳量和端基封尾等对色谱行为有重要影响。一、粒径: 粒径是指柱填料的颗粒直径大小。实际上色谱柱上所标的粒径是颗粒粒径的平均值。 一般来说,平均粒径越小,颗粒分布度越小,柱效越高。反之越低。
化学键合相色谱仪C18色谱柱规格对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱规格包括柱内径和柱长度两方面。一、C18柱的柱内径和柱长度: 1、分析型C18柱:(1)柱内径:2~6mm(2)柱长度:50~300mm 2、制备型C18柱:(1)柱内径:20~80mm(2)柱长度:150~500mm二、柱内径的影响: 一般来说,柱内径
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料的粒径、孔径、孔体积、键合反应、含碳量和端基封尾等对色谱行为有重要影响。一、粒径:粒径是指柱填料的颗粒直径大小。实际上色谱柱上所标的粒径是颗粒粒径的平均值。一般来说,平均粒径越小,颗粒分布度越小,柱效越高。反之越低。目前C18柱填料粒径在4~10um之间。二、孔径:孔
反相键合相液相色谱仪概述
反相键合相液相色谱仪又称非极性键合相液相色谱仪,在液相色谱仪中占有重要地位。一、分离机理:有疏溶剂理论和双保留机理。1、疏溶剂理论:疏溶剂理论认为非极性烷基键合相是在硅胶表面蒙覆了一层以Si-C键化学键合的十八烷基(或其它烃基)的分子毛。溶质分子(分析物)有非极性部分和极性官能团部分组成。当溶质分
键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标详解
键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标有平均颗粒度及分布、颗粒形状、平均孔径及分布、化学键合相、端基封口、含碳量、硅胶的活性、硅胶的杂质含量、硅胶的pH稳定性和硅胶的热稳定性等。一、平均颗粒度及分布:颗粒度越小,传质越好,涡流扩散越小,柱效越高,柱压越高。颗粒分布越宽,渗透性差,柱效低。二、颗粒形状:
影响反相液相色谱仪ODS柱性能的因素
影响反相液相色谱仪ODS柱性能的因素有色谱柱物理性质和化学性质。一、色谱柱物理性质:1、硅胶纯度:硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶(高纯)由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱性化合
影响液相色谱仪C18柱性能的因素
影响液相色谱仪C18柱性能的因素有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积、孔径、键合类型、碳覆盖率和封端等。一、硅胶纯度:硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶(高纯)由于金属含量低
反相键合相液相色谱仪流动相概述
反相键合相液相色谱仪流动相溶剂极性越低,洗脱能力越强。一、常用流动相:1、甲醇-水。2、乙腈-水。3、四氢呋喃-水。溶剂强度为水<甲醇<乙腈<四氢呋喃。系统2较系统1好,原因如下:系统2的粘度较系统1小,柱效好。粘度降低,柱压降低,传质阻力降低(溶质扩散阻力降低), 柱效升高。乙腈的紫外末端吸收较甲
影响反相键合相液相色谱仪溶质保留的因素
影响反相键合相液相色谱仪溶质保留的因素有溶质的极性、溶质分子中非极性部分的总表面积、键合相上的烷基总面积和流动相的表面张力等。一、溶质的极性:溶质的极性越弱,疏水性越强,保留值越大。二、溶质分子中非极性部分的总表面积:溶质和固定相接触的总表面积越大,保留值越大。三、键合相上的烷基总面积:烷基键合相的
液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。 在检测
反相键合相色谱仪的分离机制
典型的反相键合相色谱仪是采用非极性键合相和极性流动相组成的色谱体系,固定相常用十八烷基(ODS或C18)键合相,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相键合相色谱仪是采用弱极性或中等极性键合相和极性大于固定相的流动相组成的色谱体系。反相键合相表面具有非极性烷基官能团和未被取代的硅醇基,硅醇基具有吸附