生物分子的等电点沉淀分离法
等电点沉淀分离法是利用两性电解质在等电点时溶解度最小的性质,不同的两性电解质其等电点不同,其在电中性时溶解度不同,可用于某些两性电解质的分离,如氨基酸、蛋白质和核苷酸等生物分子。为了增加沉淀效果,往往在等电点时再加上其它沉淀因素。等电点沉淀分离法一般不单独使用,常与盐析分离法、有机溶剂沉淀分离法一起使用,以提高沉淀分离能力。最后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。......阅读全文
生物分子的等电点沉淀分离法
等电点沉淀分离法是利用两性电解质在等电点时溶解度zui小的性质,不同的两性电解质其等电点不同,其在电中性时溶解度不同,可用于某些两性电解质的分离,如氨基酸、蛋白质和核苷酸等生物分子。为了增加沉淀效果,往往在等电点时再加上其它沉淀因素。等电点沉淀分离法一般不单独使用,常与盐析分离法、有机溶剂沉淀分离
生物分子的等电点沉淀分离法
等电点沉淀分离法是利用两性电解质在等电点时溶解度最小的性质,不同的两性电解质其等电点不同,其在电中性时溶解度不同,可用于某些两性电解质的分离,如氨基酸、蛋白质和核苷酸等生物分子。为了增加沉淀效果,往往在等电点时再加上其它沉淀因素。等电点沉淀分离法一般不单独使用,常与盐析分离法、有机溶剂沉淀分离法一起
生物样品分离技术等电点沉淀法
利用蛋白质在等电点时溶解度最低,用酸、碱调节pH值,可使蛋白质沉淀析出,但这时沉淀不完全,可与有机溶剂沉淀法、盐析法联合使用。
生物分子的有机溶剂沉淀分离法
一、生物分子有机溶剂沉淀分离的原理:有机溶剂对许多溶于水的生物小分子以及核酸、多糖、蛋白质等生物大分子都能发生沉淀作用。有机溶剂主要是降低溶液的介电常数,从而增强分子之间的相互作用使其溶解度降低而析出。对具有表面水层的生物大分子,有机溶剂可破坏溶质分子表面的水膜,使这些大分子脱水而相互聚集析出。不同
生物分子的有机溶剂沉淀分离法
一、生物分子有机溶剂沉淀分离的原理:有机溶剂对许多溶于水的生物小分子以及核酸、多糖、蛋白质等生物大分子都能发生沉淀作用。有机溶剂主要是降低溶液的介电常数,从而增强分子之间的相互作用使其溶解度降低而析出。对具有表面水层的生物大分子,有机溶剂可破坏溶质分子表面的水膜,使这些大分子脱水而相互聚集析出。不同
蛋白质沉淀方法等电点沉淀法介绍
此法单独应用较少,多与其它方法结合使用 两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低,不同的两性电解质具有不同的等电点,以此为基础可进行分离。如工业上生产胰岛素时,在粗提液中先调PH8.0去除碱性蛋白质,再调PH3.0去除酸性蛋白质。利用等电点除杂蛋白时必须了解制备物对酸碱的稳定性,不然盲目使用十
关于等电点沉淀法的原理讲解
等电点沉淀法是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。 在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质
生物分子的有机溶剂沉淀分离法优缺点
一、生物分子 有机溶剂沉淀分离的原理: 有机溶剂对许多溶于水的生物小分子以及核酸 、多糖、 蛋白 质等生物大分子都能发生沉淀作用。有机溶剂主要是降低溶液的介电常数,从而增强分子之间的相互作用使其溶解度降低而析出。对具有表面水层的生物大分子,有机溶剂可破坏溶质分子表面的水膜,使这些大分子脱水而相
酪蛋白的制备实验_等电点沉淀法
实验方法原理牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调到4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。实验材料牛乳试剂、试剂盒乙醇 无水乙醚 醋酸 醋酸钠 乙醇 乙醚仪
蛋白质等电点的测定和沉淀实验结果
1,在等电点附近,蛋白质溶液开始变浑浊,离心可见沉淀2,远离等电点,蛋白质溶液开始变澄清,离心未见沉淀
关于等电点沉淀法的注意事项介绍
1.不同的蛋白质,具有不同的等电点。在生产过程中应根据分离要求,除去目的产物之外的杂蛋白;若目的产物也是蛋白质,且等电点较高时,可先除去低于等电点的杂蛋白,如细胞色素C [1]的等电点为10.7,在细胞色素C的提取纯化过程中,调pH=6.0除去酸性蛋白,调pH=7.5~8.0,除去碱性蛋白。
生物分子的透析分离法
一、生物分子透析分离的原理:天然或人工半透膜只允许小分子通过而阻碍大分子通过,当膜的两侧存在小分子浓度差时,小分子从高浓度一侧向低浓度一侧扩散直到平衡。通过离心机分离不断去除扩散出来的小分子,从而达到分离纯化的目的。二、影响生物分子透析分离的因素:1、半透膜的通透性:半透膜的通透性取决于膜孔径的大小
生物分子的透析分离法
一、生物分子透析分离的原理:天然或人工半透膜只允许小分子通过而阻碍大分子通过,当膜的两侧存在小分子浓度差时,小分子从高浓度一侧向低浓度一侧扩散直到平衡。通过离心机分离不断去除扩散出来的小分子,从而达到分离纯化的目的。二、影响生物分子透析分离的因素:1、半透膜的通透性:半透膜的通透性取决于膜孔径的大小
关于αs2酪蛋白的等电点沉淀分离方法介绍
关于αs2-酪蛋白的等电点沉淀分离方法:等电点沉淀法是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。在蛋白质的等电点时,蛋白质分子的存在形式是两性离子,其分子正负电荷相等 (即净电荷为零),此时在溶液中的蛋白质分子颗粒由于失去了相同电荷具有相互排斥作用,减弱了分
等电点聚焦电泳
中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定 义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
等电点小知识
小知识:等电点等电点(pI,isoelectric point)等电点:两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变,当两性离子正负电荷数值相等时,溶液的pH值即其等电点。两性与等电点氨基酸具有氨基和羧基的典型反应,例如氨基可以羟基化、酰基化,可与亚硝酸作用;羧基以成酯或酰氯或酰胺等。此外,由于分子中同
共沉淀分离法的常用沉淀剂
当沉淀从溶液中析出时,溶液中某些可溶的组分被沉淀夹带而混杂于沉淀中,这种现象称为共沉淀现象。常用的沉淀剂又有哪些? 在称量分析中,由于共沉淀现象,使沉淀不纯,影响分析结果的准确度,应设法消除。但在分离方法中,利用共沉淀现象可以分离和富集痕量组分。例如,海水中含UO22+量为2~3ug/L,不能
共沉淀分离法的常用沉淀剂
当沉淀从溶液中析出时,溶液中某些可溶的组分被沉淀夹带而混杂于沉淀中,这种现象称为共沉淀现象。 在称量分析中,由于共沉淀现象,使沉淀不纯,影响分析结果的准确度,应设法消除。但在分离方法中,利用共沉淀现象可以分离和富集痕量组分。例如,海水中含UO22+量为2~3ug/L,不能直接用沉淀法分离
等电点聚焦电泳的定义
中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定 义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
关于等电点的应用介绍
1、蛋白质的沉淀 同种蛋白质在水溶液中带有同种电荷,互相排斥,且蛋白质表面能形成水化膜,这就使得蛋白质溶液(实际上是胶体)十分稳定。要想破坏其稳定性让其沉淀则需要从这两方面入手,也就是除去水化膜和表面电荷。 比如,可以先将蛋白质的pH调整至等电点,这时的蛋白质分子呈等电状态,虽不很稳定,但还
等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
等电聚焦(Isoelectric focusing,简称 IEF)是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展,已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点(pI)只差 0.001pH 单位的生物分子。由于其分辨力高,重复性好,样品容量大,操作简便迅速,在
等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点 实验方法原理 实验原理蛋白质分子是典型的两性电解质分子。它在大于其等电点的 pH 环境中解离成带负电荷的阴离子,向电场的
等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
实验方法原理 实验原理蛋白质分子是典型的两性电解质分子。它在大于其等电点的 pH 环境中解离成带负电荷的阴离子,向电场的正极泳动,在小于其等电点的 pH 环境中解离成带正由荷的阳离子,向电场的负极泳动。这种泳动只有在等于其等电点的 pH 环境中,即蛋白质所带的净电荷为零时才能停止。如果在一个
关于明胶的等电点的介绍
据报道酸法猪皮明胶的等电点一般在pH 7.5~9的范围内,而碱法明胶的等电点在pH 4.8~5.0范围内。这两种不同工艺制得的明胶相混合使用时会出现不相容的现象,如乳剂分层、透明度降低、凝聚等等,因此在混胶时要注意胶的等电点及使用时的pH。
等电点聚焦的定义和特点
等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上。
等电点聚焦电泳的技术介绍
中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定 义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
等电点聚焦电泳的技术介绍
聚丙烯酰胺凝胶电泳( polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。
等电点聚焦的定义和特点
等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上。
常见蛋白质的等电点
常见蛋白质等电点参考值 蛋白质 等电点鲑精蛋白[salmine] 12.1鲱精蛋白[clupeine] 12.1鲟精蛋白[sturline] 11.71胸腺组蛋白[thymohistone] 10.8珠蛋白(人)[globin(human)] 7.5卵白蛋白[ovalbuin] 4.71;4.59伴
共沉淀分离法的相关介绍
当沉淀从溶液中析出时,溶液中的某些原本可溶的组分被沉淀剂沉淀下来,共同存在于沉淀物中的现象即为共沉淀现象。在沉淀分离、质量测定和材料制备中所得到的沉淀往往不是绝对纯净的,这对于分离和测定来说是不利的。但有时为了得到某些离子,可利用共沉淀进行分离富集,变不利为有利。共沉淀分离法就是加入某种离子同沉