高效液相色谱仪色谱柱的填充物如何添进去?

1.所有材料均达到规定温度。2.用所需的溶液冲洗柱底部以除去气泡,并确保柱网下没有气泡关闭色谱柱出口,并将1-2cm的缓冲液留在柱管中。3.温和重悬填充物。4.估计需要的悬浊液(重悬的填充物)总量。5.向塔中加入所需体积的混合物,并用玻璃棒排干,以免产生气泡。6.立即用该栏填充缓冲区。7.安装立柱顶部并将立柱连接至泵。8.打开柱口,设定泵的流量。如果混合物的体积大于柱的体积,则应连接一个额外的玻璃柱以供储存。这样使得混合物在填充时的直径维持恒定,从而减少紊流并提高柱子的填充状态。9.在达到柱床高度后,保持填料流量至少为柱体积的3倍,并在柱上标记柱床的高度。10.关闭泵和塔出口,取下上盖,向塔内注入缓冲液,使其向上凸起。11.将接头以一定角度插入到柱中以确保网下无气泡。12.沿立柱向下滑动接头(打开接头出口),直到达到标记的位置,并且接头已锁定并填满。......阅读全文

高效液相色谱仪流动相如何配置

水是纯水,这只是一个比例,也就是3比1,没有什么大的要求。配好以后,抽滤一下(用0.22微米,也有用0.25微米的膜),但我也见过不过滤的。如果有条件还是过滤一下,有的检测器对气泡还是比较敏感的,也有利于仪器的保护。

如何解决高效液相色谱柱柱压过高?

色谱柱类型可分为:通用分析柱、快速分析柱、凝胶色谱分析柱、蛋白质分析柱、氨基酸分析柱、保护柱、半制备/制备柱等。高效液相色谱仪开机或者更换色谱柱时,柱压过高是常出现的问题.高效液相色谱柱柱压过高的原因有两种:一.色谱柱本身的原因。主要表现在:长期使用受样品污染造成区域堵塞,而引起柱压过高.或者柱子在

高效液相色谱仪的心脏色谱柱使用的七大误区

高效液相色谱仪的色谱柱在色谱分析系统中起着分离的作用,是色谱分析核心组成部分。色谱柱的正确使用和维护尤为重要,使用不当会降低色谱柱的效率,缩短使用寿命,甚至造成损坏。本文从七个方面简要介绍了液相色谱柱使用中应注意的问题。1.避免压力和温度的突变或柱体从高处落下会影响柱体的填充状态;柱体压力的突然升高

高效液相色谱仪的色谱柱容易出现问题的内在原因

高效液相色谱仪的色谱柱是高效液相色谱仪的主要组成部分,柱效应直接影响目标化合物的分析和检测。但在高效液相色谱仪分析中,容易出现柱堵塞引起的系统压力高、柱效率低引起的峰尾和变宽、柱污染和破坏造成的虚峰等问题。这些问题的内在原因是硅羟基的死亡吸附、重金属的存在、碳的损失、缓冲溶液中的盐沉淀和液相色谱柱的

高效液相色谱仪中色谱柱的维护保养尤为重要

 高效液相色谱仪(HPLC)是分析实验室常用的测试仪器之一,其应用越来越广泛。此种仪器在使用过程中,难免会出现各种各样的问题,并将直接影响到所测数据的准确性和仪器的正常工作。  色谱柱是高效液相色谱仪最主要的部件,被测物质能否被很好的分离和测定,色谱柱的性能起着决定性的作用。因此,在日常工作中,应特

高效液相色谱仪与经典液相柱色谱仪的差别

高效液相色谱仪是在经典液相柱色谱仪的基础上,引入了气相色谱仪的理论,采用了高压输液泵、高效固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器,具有高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点。一、工作压力差别:1、经典液相柱色谱仪工作压力:常压或减压。2、高效液相色谱仪工作压力:高压,1.5×107~3

高效液相色谱仪色谱柱的主要性能指标

 高效液相色谱仪色谱柱的主要性能指标有柱型、柱选择性和柱效等。一、柱型:        目前,高效液相色谱常用标准柱型的柱内径为3.9mm和4.6mm,柱长为20~25cm,柱流动相的体积流速为1mL/min左右,填料颗粒度5~10um,柱效为7000~10000理论塔板数/m。        色谱

高效液相色谱仪分离柱,柱压高是由哪些原因引起的?

如果高效液相色谱仪系统压力过高,首先判断压力产生的位置,然后采用分段拆卸的方法进行判断一般从后向前拆,首先断开色谱柱与检测器的连接,压力不会明显下降或下降,检测器不会被堵塞,检测器也不会被堵塞;然后拆色谱柱,压力会明显下降,色谱柱会有问题,否则泵的出口会堵塞,柱没有问题。当确定该列存在问题时,有以下

高效液相色谱仪和色谱柱常见问题以及解决办法

  1 色谱柱柱压问题  色谱柱柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压

高效液相色谱柱如何选择填料粒度

    Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。    高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢?    色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒

高效液相色谱柱如何选择填料粒度

   Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。    高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢?    色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小

高效液相色谱柱如何选择填料粒度

   Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。    高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢?    色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小,填

高效液相色谱仪柱压问题及解决办法

高效液相常见的就是柱压问题及解决办法柱压问题 柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI(3.3 Bar)之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允

实验室分析方法高效液相色谱仪液相色谱柱保护柱选择

在高效液相分析检测样品的过程中,色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染,从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。来自于色谱系统的污染主要指,HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒,以及流动相系统过滤不完全残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指,未完全溶解的样品或者已完全溶解的样品进入色谱系统中,由于样

如何解决液相色谱仪坏柱的问题?

液相色谱仪中故障坏柱问题通常是色谱柱有某些的缺陷,原因很多,可能是色谱柱柱头压的过劲导致色谱柱柱头塌陷,或者是柱头过滤片被阻塞,或者就是填料有溶蚀性。其他原因:1.色谱柱与色普系统不配套2.柱效低3.样品的强滞留组分污染色谱柱4.保留性质的改变等等。以上原因都与峰拖尾有关。柱头阻塞或塌陷是最常见的故

实验分析仪器高效液相色谱仪的色谱柱的相关知识

色谱柱色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好、分析速度快等。市售的用于 HPLC 的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔炭等,其粒度一般为3μm、5μm、7μm、10μ

流动相跑空了,色谱柱内会不会进去气泡

只能说有可能,具体有没有气泡得具体看情况。如果柱子进了气泡,一来可能压力会升高,二来可能压力会忽上忽下,第三可能会出现诡峰。跑空了确实对仪器影响很大,可能堵住单向阀、可能堵住泵,可能堵住柱子,也可能堵住检测器。再运行的时候要先排气,把泵前的液体都排掉,然后观察压力,如果有明显的压力升高找出具体堵住的

流动相跑空了,色谱柱内会不会进去气泡

只能说有可能,具体有没有气泡得具体看情况。如果柱子进了气泡,一来可能压力会升高,二来可能压力会忽上忽下,第三可能会出现诡峰。跑空了确实对仪器影响很大,可能堵住单向阀、可能堵住泵,可能堵住柱子,也可能堵住检测器。再运行的时候要先排气,把泵前的液体都排掉,然后观察压力,如果有明显的压力升高找出具体堵住的

流动相跑空了,色谱柱内会不会进去气泡

只能说有可能,具体有没有气泡得具体看情况。如果柱子进了气泡,一来可能压力会升高,二来可能压力会忽上忽下,第三可能会出现诡峰。跑空了确实对仪器影响很大,可能堵住单向阀、可能堵住泵,可能堵住柱子,也可能堵住检测器。再运行的时候要先排气,把泵前的液体都排掉,然后观察压力,如果有明显的压力升高找出具体堵住的

流动相跑空了,色谱柱内会不会进去气泡

只能说有可能,具体有没有气泡得具体看情况。如果柱子进了气泡,一来可能压力会升高,二来可能压力会忽上忽下,第三可能会出现诡峰。跑空了确实对仪器影响很大,可能堵住单向阀、可能堵住泵,可能堵住柱子,也可能堵住检测器。再运行的时候要先排气,把泵前的液体都排掉,然后观察压力,如果有明显的压力升高找出具体堵住的

高效液相色谱仪,跑梯度,如何平衡基线

首先做梯度时基线漂移是正常的,但可以通过以下措施来改善基线漂移的严重程度。1、做梯度前最好,把色谱柱用纯的有机溶剂冲洗一下或是用新的色谱柱,防止柱内残留物引起基线的漂移。2、试剂纯度最好都是正规的色谱纯试剂,如何纯度不够,在梯度时,也会出现基线的漂移。3、控制好室温或柱温,防止有较在的温度波动。4、

高效液相色谱仪,跑梯度,如何平衡基线

首先做梯度时基线漂移是正常的,但可以通过以下措施来改善基线漂移的严重程度。1、做梯度前最好,把色谱柱用纯的有机溶剂冲洗一下或是用新的色谱柱,防止柱内残留物引起基线的漂移。2、试剂纯度最好都是正规的色谱纯试剂,如何纯度不够,在梯度时,也会出现基线的漂移。3、控制好室温或柱温,防止有较在的温度波动。4、

高效液相色谱仪如何用水冲系统

根据你使用的色谱柱和用过的流动相来决定用什么样的溶剂来冲洗系统。  如果用过盐或者酸,必须用9比1的水和合适的有机溶剂先冲洗一段时间,将其中的盐分冲洗干净,防止结晶,然后逐渐提高有机相的比例来冲洗,冲洗时间可以根据柱子的死体积来计算,最后用纯有机相来冲洗,最好是乙腈,因乙腈不容易挥发,柱子不容易干,

高效液相色谱仪如何用水冲系统?

高效液相色谱仪如何用水冲系统:根据使用高效液相色谱仪的列和流程阶段,决定使用何种溶剂冲洗系统。如果使用盐或酸,必须用9:1水和适当的有机溶剂冲洗一段时间。将盐冲洗干净,防止结晶,然后逐步增加有机相的比例。冲洗时间可以根据柱的死体积计算,最后用纯有机相冲洗,最好是乙腈,因为乙腈不挥发,柱不易干燥,而柱

高效液相色谱仪,跑梯度,如何平衡基线

首先做梯度时基线漂移是正常的,但可以通过以下措施来改善基线漂移的严重程度。1、做梯度前最好,把色谱柱用纯的有机溶剂冲洗一下或是用新的色谱柱,防止柱内残留物引起基线的漂移。2、试剂纯度最好都是正规的色谱纯试剂,如何纯度不够,在梯度时,也会出现基线的漂移。3、控制好室温或柱温,防止有较在的温度波动。4、

高效液相色谱仪

高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。

高效液相色谱仪

   高效液相色谱仪主要有分析型、制备型和专用型三类。    一般由五个部分组成:   高压输液系统 —— 进样系统 —— 分离系统—— 检测系统 —— 数据处理系统   一. 高压输液系统    贮液装置、高压输液泵、过滤器、脱气装置等   1. 贮液器:贮液器用于存放溶剂。溶剂必须很纯

液相色谱仪色谱柱的柱材料及规格

 液相色谱仪色谱柱的柱材料及规格:  1 柱材料  常用内壁抛光的不锈钢管作色谱柱的柱管以获得高柱效。使用前柱管先用氯仿、甲醇、水依次清洗,再用50%的HNO3对柱内壁做钝化处理。钝化时使用HNO3在柱管内至少滞留10min,以在内壁形成钝化的氧化物涂层。    2 柱规格  一般采用直形柱管,标准

高效液相色谱的色谱柱

填料和流动相的组分应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。在用

高效液相色谱仪、流动相、色谱柱、检测器、泵的保养维护

液相色谱仪是利用混合物在液-固或互不相溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行分离和分析鉴定的仪器,应用极其广泛。流动相流动相:保持贮液瓶清洁,对专用贮液瓶应定期清洁;定期(如半个月)在稀硝酸溶液中超声、清洁过滤器,清洁后用纯水清洗到中性,保持过滤器畅通。使用的流动相应为HPLC级或同等级,在配置