高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法

高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法: 1.以0.5ml/min的流速用正己烷-乙腈(99∶1)洗涤柱体积10次,然后用氯仿、异丙醇和甲醇-水依次冲洗柱子。 2.以0.5ml/min的流速用30倍体积的ph 11.0氢氧化钠溶液注意ph值不得超过11.0冲洗柱然后立即用水0.5ml/min,30倍体积柱冲洗用流动相代替。 3.在制备流动相时,每一组分应分别测量,较小的组分应精确测量,pH值应调整为0.1。 4.在反相使用时,应特别注意控制ph值的范围。ph值越低,水解就越危险。水在流动相中的比例越高,发生水解的危险性就越大。pH范围为pH3.07.0; 5.如果要使用的流动相中有缓冲盐,建议在使用分析流动相之前,应以相同的流动相比例过渡无缓冲盐的流动相,......阅读全文

高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法

高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法:    1.以0.5ml/min的流速用正己烷-乙腈(99∶1)洗涤柱体积10次,然后用氯仿、异丙醇和甲醇-水依次冲洗柱子。    2.以0.5ml/min的流速用30倍体积的ph 11.0氢氧化钠溶液注意ph值不得超过11.0冲洗柱然后立即用水0.5ml/min

反相色谱柱的使用方法

反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m

反相色谱柱的使用方法

反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m

液相色谱仪反相色谱柱的平衡

液相色谱仪反相色谱柱是保存在乙腈中,新柱应先用10~20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱,一定确保分析样品所使用的流动相与乙腈-水互溶。每天用足够的时间以流动相平衡色谱柱,会在处理问题方面获得zui大的“补偿”,而且色谱柱的寿命会变得更长。平衡操作步骤:1、平衡开始时,将流速缓慢提高,用流动相平衡色谱

高效液相色谱仪色谱柱的填料及正相色谱柱的使用方法

高效液相色谱仪色谱柱的填料:    在填料和流动相之间进行液相色谱柱分离。液相色谱柱的分类取决于填料的类型。    正相柱:硅胶主要用作柱填料。按形状可分为无定形和球形两种,其粒径在3-10um之间另一种正相填料是硅胶表面键合-CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶    反相柱:硅胶表面结合十八

导致液相色谱仪反相色谱柱污染的因素

反相色谱在高效液相色谱中是应用最广泛的技术,主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质,因此,分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的。    反相色谱柱在分离检测过程中,分析物和基质污染能使固定相受到影响,使用过程中应当注意固定

反相高效液相色谱柱的维护如何?

反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。     在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一

反相高效液相色谱柱的维护如何?

反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。     在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一

反相色谱柱

 反相色谱柱

高效液相色谱仪色谱柱的保养

正常情况下,高效液相色谱仪色谱柱至少可以使用 3~6 个月,能完成数百次分离。但若操作不慎,将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性,必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护:1、流动相和样液都需用 0.45um 孔径的滤膜过滤。2、加 3~5 cm 保护柱。3、进样阀进样。

高效液相色谱仪色谱柱的结构

色谱柱由柱节点、柱管和过滤器组成。柱节点是低死体积结构的螺纹组件。一端为7/16英寸外螺纹,另一端为3/16英寸内螺纹(国内外已标准化)7×16英寸外螺纹连接到1×4英寸圆筒管(Φ6.35mm),并在中间放置一个压力环进行密封3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(1.57mm)的连接管连接,中间放置一

高效液相色谱仪色谱柱的保养

       正常情况下,高效液相色谱仪色谱柱至少可以使用3~6个月,能完成数百次分离。但若操作不慎,将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性,必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护:  1、流动相和样液都需用0.45um孔径的滤膜过滤。  2、加3~5cm保护柱。  3、

高效液相色谱仪色谱柱的种类

液相色谱柱有很多种:正柱、反柱、离子交换柱液相色谱柱的生产厂家很多不同类型的液相色谱柱也可以不同每个制造商都有每个制造商的名称有的称为液相色谱柱,有的称为色谱柱,有的称为c-十八烷基硅烷化建柱。    液相色谱柱可分为:正相色谱柱、反相色谱柱、凝胶柱、Hilic柱、离子柱、疏水柱、亲和柱、超高效液相

高效液相色谱仪的色谱柱简介

色谱柱是高效液相色谱仪的核心部件,由柱管和固定相等组成。一、柱管材质:柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜和内衬光滑聚合材料的其它金属。玻璃管耐压有限,金属管使用较多。二、色谱柱描述方式:如 ODS(Φ4.6×150mm,5um)。三、色谱柱规格:色谱内径为 4~5mm,柱长为 50~300mm,凝胶色谱

影响反相液相色谱仪ODS柱性能的因素

影响反相液相色谱仪ODS柱性能的因素有色谱柱物理性质和化学性质。一、色谱柱物理性质:1、硅胶纯度:硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶(高纯)由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱性化合

反相液相色谱仪色谱柱的pH值使用范围

反相液相色谱仪色谱柱的优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂,但以硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的pH范围。一般的C18柱的pH值范围在2~8。当流动相的pH<2时,会导致键合相水解;当流动相的pH>7时,硅胶易溶解;经常使用缓冲液,固定相会降解。一旦发生上述情况,色谱柱入口处会塌陷。

高效液相色谱仪中反相色谱缓冲液的选择

反相色谱中缓冲液的选择化合物的划分通过HPLC分离的样品可根据其在分离系统(或流动相)中的状态分成中性样品和离子样品所谓中性样品是在分离条件下不能离解的化合物,而离子化合物可以离解离子。换句话说,离子样品指的是酸碱化合物,而中性化合物是其它化合物。有盐流动相好在那里反相色谱(RPC)主要是基于待分离

怎么使用高效液相色谱仪色谱柱

   色谱柱是高效液相色谱仪最主要的部件,被测物质能否被很好的分离和测定,色谱柱的性能起着决定性的作用。因此,在日常工作中,应特别注意色谱柱的正确使用和维修保养,以延长色谱柱的使用寿命。  使用预柱和保护柱。预柱(pre-column)安装于泵和进样器之间,它给色谱柱中的流动相提供了完全的平衡,并防

高效液相色谱仪常用色谱柱

高效液相色谱仪常用色谱柱有C18柱、C8柱、C4柱、C2柱、C1柱和NH2柱等。一、C18柱:        又称ODS柱,使用zui普遍,品种繁多。值得注意的是同样的C18柱,得到的结果可能不一致,尤其是分析极性或离子化合物。        流动相为甲醇(乙腈)水系统。        适合大多数化

高效液相色谱仪色谱柱结构解析

色谱柱是高效液相色谱仪的核心部件,色谱柱的柱材料、柱结构、柱规格和柱连接方式等对分析起着关键作用。一、柱材料:色谱柱管常采用内壁经过精密加工抛光的不锈钢管,以获得高柱效。不锈钢管耐溶剂、水和缓冲溶液的腐蚀,使用前色谱柱管先用氯仿、甲醇和水依次清洗,再用 50% 的 HNO3 对柱内壁作钝化处理。钝化

高效液相色谱仪色谱柱性能的评价

     高效液相色谱仪色谱柱性能的评价包括评价内容和评价方法等方面。一、评价内容:  1、分离效能。  2、对指定溶质的选择性。  3、在不同PH值介质中的稳定性。  4、不同批次但同型号填料间性能的重现性。  5、适宜的操作压力等。二、评价方法:  以指定的一组标准溶质为样品,测定其在色谱柱上的

反相色谱色谱柱的选择

  色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30~250 mm,颗粒直径在1.6~5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优

反相高效液相色谱柱的原理及使用维护

反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能

反相色谱柱的选择

 反相色谱柱的选择:   1.柱子的PH值使用范围   反相色谱柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。   一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要

反相色谱柱的选择

1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况,色谱柱人口处会塌陷

填充柱高效液相色谱仪分类

填充柱高效液相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:填充柱高效液相化验室色谱仪和填充柱高效液相工业色谱仪。2、按功能可分:分析型填充柱高效液相色谱仪和生产型填充柱高效液相色谱仪。3、按操作压力可分:填充柱高效液相中压色谱仪和填充柱高效液相高压色谱仪。4、按分离规模可分:小型填充柱高效液相色谱仪和大型

反相液相色谱仪ODS柱的化学性质

反相液相色谱仪ODS柱的化学性质指标有键合类型、碳覆盖率和封端等。一、键合类型:1、单体键合:键合相分子与基体单点相连。单齿键合传质速率高,色谱柱平衡快。2、聚合体键合:键合相分子与基体多点相连。双齿键合增加色谱柱稳定性和载样量。二、碳覆盖率:碳覆盖率指与基质相连的键合相的量。高碳覆盖率:分辨率高,

色谱柱冲洗的那些事儿(反相色谱柱)

衣服穿久了要洗,色谱柱用久了要冲,不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单,到底该怎么洗,还是有些门道的:第一个问题:用什么冲1.1:什么叫冲洗色谱柱通常,色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来,并且保存在合适的溶剂中;还有另一种情况,也可以算作冲洗的范畴,就是梯度方法间重新平衡色谱

反相色谱柱与正向色谱柱的区别

倒置或法线相位是基于相对于固定相位的移动相位的极性。如果流动相的极性强于固定相,则称为反相色谱;如果流动相的极性弱于固定相,则称为正相色谱。反相色谱流动相极性强,易携带极性分子,留下非极性分子。主要用于非极性样品的分离。常用的高压液相色谱就是这样,有些人喜欢说,反相液相色谱其实是一种意义,也就是说,

色谱柱冲洗的那些事儿(反相色谱柱)

衣服穿久了要洗,色谱柱用久了要冲,不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单,到底该怎么洗,还是有些门道的:第一个问题:用什么冲1.1:什么叫冲洗色谱柱通常,色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来,并且保存在合适的溶剂中;还有另一种情况,也可以算作冲洗的范畴,就是梯度方法间重新平衡色谱