HPLC高效液相色谱法测定中精密度与回收率怎么计算?
密度系数是指在规定条件下,对均匀样品进行重复取样所得结果之间的接近程度精密度通常用偏差或相对标准表示。当用标准差或相对标准差表示时,抽样测量的次数应具有统计意义,并对结果进行至少6次评价。在同样的条件下,由分析师确定的结果的精度被称为重复性(重复性)。在同一个实验室,不同分析员在不同时间、不同设备上测定结果的准确度称为中间精密度。不同实验室的不同分析人员测定结果的精密度称为重现性(重复性)。当法定标准采用分析方法时,应进行再现性试验。回收率是在制作样品时加入标准,经过预处理后,与原标准的比值可能超过100%。精密度检查是检查方法的重现性;相对标准偏差(RSD%)通常小于2.0%。对方法的精密度进行了考察,相对标准偏差(RSD%)一般小于2.0%。......阅读全文
液相色谱(HPLC)入门(二)
什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中,黄色谱带完全通过了检测器流通池;产生的电信号被送到计
HPLC的故障及处理(二)
(五) 鬼峰1.进样阀残余峰 每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗。2.样品中未知物 处理样品。3.柱未平衡 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)。4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂。5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水。(六) 基线
液相色谱(HPLC)入门(一)
什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料,粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶
HPLC常见故障排除小贴士
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。 鉴于HPLC在全行业运用越来越广泛,因此每一个实验室分析人员都应该熟练掌握并应用HPLC,对于一些常见的故障分析应该做到游刃有余,才能在运行故障的时候即使解决问题,提高工作效率。
HPLC基础知识教程(五)
2.泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性,必须按照下列注意事项进行操作: ①、防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Mi
水质对-HPLC-分析的影响
简介: 优化的高效液相色谱法分析需要高纯度溶剂和试剂。同时,在流动相准备阶段,色谱柱中盐和有机溶剂的选择十分谨慎,所以水质是非常重要的。在洗脱液中,中痕量有机物的存在可能会导致长期不好的结果。随着时间推移,柱效可能会阻塞,导致分辨率降低,峰拖尾。大量实验表明,水中的有机物可能极大地影响液相色谱
HPLC与GC有什么差别?
HPLC可通过高效液相色谱(HPLC)被称为(高效液相色谱)也称为高压液相色谱法。与气相色谱最重要的区别如下:高效液相色谱流动相为液体(液-液分配原理)。GC的流动相(载气)为气体(气-液分配原理)。但是,这两项工作所采用的分离原理基本相同,都是用色谱理论分析的,都可以使用多种检测器,常用于定量分析
hplc进样浓度多少合适
3ug/ml。HPLC高效液相色谱法,High Performance Liquid Chromatography缩写,进样浓度为3ug/ml,S/N为180,一针一针试,先配一个浓度进针再根据结果调整,6次进样,最小检测浓度不超过1×10-7g/ml萘/甲醇溶液, 高效液相色谱法(HPLC)是应用
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话,最好还是用(水:乙腈=9:1)先冲洗一下,如果柱子里盐不冲洗干净的话,再用小极性的流动相冲柱子时,盐就会析出,影响色谱柱寿命。要是没有盐的话,就无所谓了,用甲醇乙腈冲洗都行,冲洗到什么程度,主要看柱压是否已经回落,稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂(乙腈最好)中,避
HPLC是做什么的
HPLC是高效液相色谱,英文全称是HighPerformanceLiquidChromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、
液相色谱(HPLC)入门(四)
高效液相色谱分离模式总的来说,化合物的三种主要的性质可以用来产生高效液相色谱分离。它们是:· 极性· 电荷· 分子大小首先,让我们考虑极性和根据这一特性的两种主要分离模式:正相和反相色谱。基于极性的分离一个分子的结构、活性和物化性质由组成它的原子和化学键决定。在一个分子内部,决定了其特殊性质和可预测
HPLC基础知识教程(六)
1.柱的构造 色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛
VE中苯并芘的HPLC检测
苯并芘是由5个苯环构成的多环芳烃化合物,是一种强致癌物,在生产植物油的过程中可能因环境污染、原材料携带或加工时温度过高而产生。目前,维生素E的生产都是以植物油生产脱臭过程的副产物-脱臭馏分作为原料,因此苯并芘也不可避免地残留于脂溶性的维生素E产品中。为了评价维生素E中苯并芘含量是否超标,本方法
HPLC日常维护有哪些步骤
高效液相色谱(HPLC)是色谱法的一种,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。 高效液相色谱(HPLC)的日常维护有哪些呢? 1.高效液相级色谱醇,
液相色谱(HPLC)入门(五)
正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中,茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末; 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极
HPLC基础知识教程(十二)
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1.键合相的性质 目前,化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷
HPLC基础知识教程(三)
4.相平衡参数 分配系数(distributioncoefficient,K)——在一定温度下,化合物在两相间达到分配平衡时,在固定相与流动相中的浓度之比。K=。 分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中,K有不同的概念:吸附色谱法为吸附系数
赛默飞在HPLC-2018推出最新HPLC色谱柱--提供更高分辨率
分析测试百科网讯 第47届高效液相分离及相关技术国际研讨会于2018年7月29日-8月2日在华盛顿举行,为了支持高效液相色谱的创新和应用,赛默飞在会上展示其最新的HPLC色谱柱产品。 “我们的客户不断面临新的分析挑战,因为他们使用用HPLC来加深对分析样品,”赛默飞色谱和质谱分析的副总裁兼总经
依利特将参加HPLC-2011-Dalian
依利特分析仪器有限公司将参加2011年10月8日至11日在大连世界博览广场览馆举办的第37 届国际高效液相色谱及相关技术会议(含仪器展览会)(HPLC 2011 Dalian)。 期间我们将向您展出大流量工业制备型高效液相色谱仪、P1201高效液相色谱仪、LU23
HPLC紫外灯的维护和更换
HPLC紫外灯的维护和更换 一、HPLC紫外灯的维护 对紫外灯的最根本维护就是在不进行测定时应及时关灯。具体的做法为: 1.缩短检测前的开灯时间 尽量在检测前1小时开紫外灯,具体时间根据系统的稳定时间而定。太早会缩短灯的使用寿命太晚会浪费流动相,对色谱柱也不好。 2.检测
液相色谱仪(HPLC)的保养
HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一,由于其精度较高,对实验人员和实验室条件要求较高,因此保养也很重要,应引起注意:1.HPLC的日常操作条件:温度:10~30℃; 相对湿度
HPLC保留时间漂移的故障排除
保留时间不重现有两种不同的情况:即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上,保留时间漂移的多半原因是不同机
HPLC色谱系统的功能介绍
主要功能 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附 -解吸的分配过程,
HPLC中常用色谱柱类型
极性,非极性,弱极性是气相色谱柱常用的分类方法。液相色谱柱一般是分为如下几类:尺寸排阻色谱法(SEC)色谱柱 反相液相色谱法(RPLC或RPC)色谱柱离子交换(IEC)色谱柱 亲合作用(HILIC)色谱柱疏水作用(HIC)色谱柱正相液相色谱(NPC)色谱柱
用HPLC分析与纯化的区别
用于分析的就是普通的高效液相色谱仪,主要的配置就是根据不同需要选择的泵(包括三元的、二元的、四元的等),柱温箱,检测器,进样器(自动的,手动的),可选的包括脱气机和控温装置。用于纯化的叫做制备液相,原理和普通的液相相似,不过他的泵叫做制备泵,他比普通液相多了几个模块,制备池、馏分收集器。高通量收集软
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器,其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器,如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应,ECD,FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器,HPLC通常配置的P
HPLC保留时间漂移现象原因分析
1、温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定2、流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡
分享|HPLC的酸清洗和钝化!
HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸,暴露在实验室化学环境,与零部件制造相关的残留物,或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗,但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上,因而会降低总的性能。 •磷酸清洗:通常用于从系统中除去有机杂质。
HPLC紫外灯的维护和更换
一.HPLC紫外灯的维护 对紫外灯的最根本维护就是在不进行测定时应及时关灯。具体的做法为: 1.缩短检测前的开灯时间。尽量在检测前1小时开紫外灯,具体时间根据系统的稳定时间而定。太早会缩短灯的使用寿命太晚会浪费流动相,对色谱柱也不好。 2.检测结束后的关灯。在检测结束后应立即关灯,最好采用