一文了解亲和层析柱装柱注意事项
亲和层析 一般用于纯化蛋白质和核酸等大分子物质的方法的主要依据是各种大分子物质之间理化特性的差异性。下面我们来分析一下亲和层析过程中的注意事项。 1.上样 亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等,以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。 一般生物大分子和配体之间达到平衡的速度很慢,所以样品液的浓度不易过高,上样时流速应比较慢,以保证样品和亲和吸附剂有充分的接触时间进行吸附。 特别是当配体和待分离的生物大分子的亲和力比较小或样品浓度较高、杂质较多时,可以在上样后停止流动,让样品在层析柱中反应一段时间,或者将上样后流出液进行二次上样,以增加吸附量。样品缓冲液的选择也是要使待分离的生物大分子与配体有较强的亲和力。另外样品缓冲液中一般有一定的的离子强度,以减小基质、配体与样品其它组分之间的非特异性吸附。......阅读全文
一文了解亲和层析柱装柱注意事项
亲和层析 一般用于纯化蛋白质和核酸等大分子物质的方法的主要依据是各种大分子物质之间理化特性的差异性。下面我们来分析一下亲和层析过程中的注意事项。 1.上样 亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、
关于层析柱装柱、使用及相关注意事项
(1)、装柱前要仔细看填料的使用说明书,每种填料都有自己的特性,以及特殊的装柱方法,针对不同的空柱,也要注意方法可能不同;3、这一点非常重要:装柱包括以后使用中绝对不允许柱内进入气泡(bubble free),柱头事先也要排除气泡。(2)、填料要加水搅拌成均匀悬液,悬液浓度依填料而不同,一般70-8
单克隆抗体(McAb)亲和层析柱纯化
重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的细胞因子新型药物,已在国内外广泛投入临床应用,并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高,美国NIH规定必须在90%以上,因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的McAb 3F1,
McAb(单克隆抗体)亲和层析柱纯化
重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的细胞因子新型药物,已在国内外广泛投入临床应用,并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高,美国NIH规定必须在90%以上,因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的 McAb 3F1
人造沸石装柱注意事项
人造沸石装柱注意事项如下:1、使用前要清洗去除粉尘,否则这些的粉尘可能暂时会影响水质的清洁度。但建议不要直接用新鲜的自来水冲洗,因为沸石的多孔隙一旦吸附大量自来水中的氯以及漂白粉,在随后放置到过滤器中使用时对水质造成的破坏,因此在使用前需要对其冲洗。2、一般来说,简单清洗难以将沸石多孔隙中的杂物清洗
层析柱的介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的简介
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的规格
层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形
层析柱高径比对层析柱分离效果有什么影响
层析柱高径比是指层析柱的高度与内径之比。层析柱高径比对层析柱分离效果有着重要的影响,一般来说,高径比越大,分离效果越好。高径比的提高可以带来以下几个方面的优势:提高分离效率:高径比的提高可以增加层析柱的理论板数,提高分离效率。提高分离精度:高径比的提高可以减少色谱柱床颗粒的翻滚、流动等运动,从而减小
层析填料装柱的注意事项
装柱前要仔细看填料的使用说明书,每种填料都有自己的特性,以及特殊的装柱方法,针对不同的空柱,也要注意方法可能不同。 1、装柱前要仔细看填料的使用说明书,每种填料都有自己的特性,以及特殊的装柱方法,针对不同的空柱,也要注意方法可能不同; 2、填料要加水搅拌成均匀悬液,悬液浓度依填料而不同,一般70-8
层析柱如何来选择
层析柱的质量关键要考虑以下几点:两端的4F塞是否密封质量好,中间的玻璃管的透明度以及耐压度,是否有相应的转换接头来控制进料高度,
层析柱如何来选择
层析柱的质量关键要考虑以下几点:两端的4F塞是否密封质量好,中间的玻璃管的透明度以及耐压度,是否有相应的转换接头来控制进料高度,我们研究所用的是同兴玻璃的。
层析柱与液相柱的区别
1、压力 液相色谱柱(尤其是分析性高效液相色谱):压力较高,一般为10-20Mpa 层析柱:一般为常压,或使用真空泵(0.1Mpa左右) 2、填料 液相色谱柱:粒径较小(常规5-20um) 层析柱:粒径较大 3、分离度 由第二项决定,粒径越小,单位长度下理论塔板数越高 液相色谱柱
凝胶层析柱,离子交换柱,色谱吸附柱
凝胶柱层层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,因
层析柱柱体积如何计算
柱体积就是根据层析柱内径和长度求出,你内径有了,长度应该是13cm,这样就好算了。给你一个估计的方法:柱体积=填充物质量(g)×2
层析柱的操作方法
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例: 1.吸附剂的处理及柱子装填 将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。 2.上样
层析柱柱体积如何计算
柱体积就是根据层析柱内径和长度求出,你内径有了,长度应该是13cm,这样就好算了。给你一个估计的方法:柱体积=填充物质量(g)×2
SAC手动螺旋压缩层析柱-柱效测试
介质: Q-HP,体积为2L, 缓冲液1为0.4M/L NaCl, 缓冲液2为0.8M/L NaCl柱子:SAC200*500(利穗) 设备为 AKTA Polit(GE)
树脂柱和层析柱一样吗
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。凝胶过滤层析是利用一定大小孔隙的具有网状结构的凝胶作层析介质(如葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)而树腊吸附柱;通俗的说,就是一种装载(阳、阴)离子交换树脂的设备,简称离子交换(柱)器,目的是离子交换树脂“吸附”水中阳离子或阴离子等盐类
一文了解色谱法注意事项
气相色谱的分离机制主要有吸附、分配等。 一、对仪器的一般要求 所用的仪器为气相色谱仪,气相色谱仪由载气源、进样部分、色谱柱、检测器和数据采集系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。由于柱温箱温度的波动会影响色谱分析结果的重现性,因此柱温箱控温精度应在±1℃,且温度波动小于每小时
动态轴向压缩柱系统相对层析柱的介绍
1、DAC系统配有专用的输液系统和在线检测系统,可以随时观测样品的分离程度与出峰时间,及时把控实验进度。 2、效率高,单针上样量大,分离纯化时间短,按照工艺,日处理量能达到300-400克的范围,随着内径的增大,上样量为柱内径比的平方。 3、选择的溶剂可以使用分析级或者工业级试剂,价格低廉,
层析柱原理和使用方法
柱层析技术(Columnchromatography)又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相
层析柱原理和使用方法
柱层析技术又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中
TLC中干法装柱
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧(湿法也要敲的,效果好点),至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实(一般柱子不敢用油泵抽,怕把柱子抽裂了)。接着是用淋洗剂"走柱子",一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一
TLC中湿法装柱
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压(土方法可以用养鱼的氧气泵加压或是用氮气,当然不加压也可以)用淋洗剂"走柱子",本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。 (我一般都用湿法装柱)
高效液相色谱柱怎么装柱
一般来说是这样:1. 色谱柱应该是可以直接接在匀浆罐上的,如果不能,则需要一个转换接头。这个转换接头的尺寸很重要,既要能防止漏液,又要避免过硬或尺寸不合适而导致色谱柱接口螺纹的损坏;2. 具体装柱过程一般来说是①先以合适的匀浆液(多为有机溶剂,刘国诠老师的《色谱柱技术》一书中列的比较全,可供参考)将
固相萃取柱如何装柱
用异丙醇浸泡填料,在柱下端放微孔滤膜,开动真空泵抽,这样填料均匀分布,上面再加一层筛板压实。外面买的成品柱两头都有筛板,将填料夹在中间,这样不会散。如果没有条件可以试试棉花,但是这只用于大体积的制备柱。小柱还是不适合。
填充柱的装柱的相关介绍
根据不同的柱管形状可以选择不同的装柱方式。对于螺旋形色谱柱,可以用真空泵抽气的方法装填。装柱时先将柱的一头用玻璃棉和纱布轻轻堵住,接上玻璃过滤球(或安全瓶)和真空泵,柱的另一头用塑料漏斗及过渡接头接上,填料从漏斗加进柱内。开动真空泵,填料即通过漏斗不断地被抽进柱中,同时不断敲振柱的各部位,使填料
免疫亲和柱简介
AOKIN 霉菌毒素免疫亲和柱一.简 介霉菌毒素是由霉菌产生的有毒代谢产物,有较强的致癌性和降低免疫力作用。常见的霉菌毒素主要有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素,呕吐素素、单端孢霉烯(T-2毒素)、玉米赤霉烯酮、串珠镰刀菌素、伏马菌毒素等。粮食及饲料很容易受到霉菌毒素的污染,这一问题越来越成为现代农业生产中不