凝胶色谱仪标准操作规程
一、基本理论 (一)分子筛效益 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出,这种现象叫分子筛效应。具有多孔的凝胶就是分子筛。各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围,有最大极限和最小极限。分子直径比凝胶最大孔隙直径大的,就会全部被排阻在凝胶颗粒之外,这种情况叫全排阻。 两种全排阻的分子即使大小不同,也不能有分离效果。直径比凝胶最小孔直径小的分子......阅读全文
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的三大效应
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是在电泳体系中采用两种以上的缓冲液成分、pH和凝胶孔径,其中不连续盘状凝胶电泳zui为常用。在不连续盘状凝胶电泳中存在样品的浓缩效应、凝胶的分子筛效应和电荷效应三大效应,由于这三种物理效应,使样品分离效果好,分辨率高。一、浓缩效应: 1、凝胶层的不连续性:(1)样品胶
液相色谱仪选型原则
液相色谱仪有液液分配色谱仪、液固吸附色谱仪、离子交换色谱仪、离子对色谱仪、凝胶色谱仪和生物亲和色谱仪等类型,选型原则如下:一、样品相对分子量<2000:1、不溶于水:(1)同系物:液液分配色谱仪。(2)异构体:液固吸附色谱仪。(3)分子大小差异:凝胶色谱仪。2、溶于水:(1)不离解:反相液液分配色谱
高效液相色谱仪选型原则
高效液相色谱仪有液液分配色谱仪、液固吸附色谱仪、离子交换色谱仪、离子对色谱仪、凝胶色谱仪和生物亲和色谱仪等类型,选型原则如下:一、样品相对分子量<2000:1、不溶于水:(1)同系物:液液分配色谱仪。(2)异构体:液固吸附色谱仪。(3)分子大小差异:凝胶色谱仪。2、溶于水:(1)不离解:反相液液分配
油田聚合物凝胶堵剂的凝胶强度测定
油田出水是目前油田开发中存在的一个普遍问题,由于油藏的非均质性和复杂的油水关系造成注水沿井间的高渗透层或裂缝突进和指进,降低了注入水的波及系数,造成中、低渗透层动用程度较低或根本未动用。寻找适合的堵剂对提高采收率具有一定的现实意义。 质构仪作为一种物性分析仪器,可以用于测定硬度、弹性、断裂强度、拉伸
油田聚合物凝胶堵剂的凝胶强度测定
油田出水是目前油田开发中存在的一个普遍问题,由于油藏的非均质性和复杂的油水关系造成注水沿井间的高渗透层或裂缝突进和指进,降低了注入水的波及系数,造成中、低渗透层动用程度较低或根本未动用。寻找适合的堵剂对提高采收率具有一定的现实意义。 质构仪作为一种物性分析仪器,可以用于测定硬度、弹性、断裂强度、拉伸
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶的制备
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳,广泛用于核酸的研究,为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖,是由1,3连接的β-D吡喃半乳糖和1,4连接的3,6脱水β-D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶的制备
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳,广泛用于核酸的研究,为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖,是由1,3连接的β-D吡喃半乳糖和1,4连接的3,6脱水β-D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶的制备
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳,广泛用于核酸的研究,为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖,是由1,3连接的β-D吡喃半乳糖和1,4连接的3,6脱水β-D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使
油田聚合物凝胶堵剂的凝胶强度测定
油田出水是目前油田开发中存在的一个普遍问题,由于油藏的非均质性和复杂的油水关系造成注水沿井间的高渗透层或裂缝突进和指进,降低了注入水的波及系数,造成中、低渗透层动用程度较低或根本未动用。寻找适合的堵剂对提高采收率具有一定的现实意义。 质构仪作为一种物性分析仪器,可以用于测定硬度、弹性、断裂
琼脂糖凝胶电泳,凝胶电泳条带
原理 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有"分子筛"和"电泳"的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网格结构,电泳分子通过时会受到阻力,大分子物质在泳动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于
凝胶渗透色谱GPC/凝胶过滤色谱GFC基础知识
凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography, GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开),优点是:保留时间短,
凝胶渗透色谱仪净化土壤沉积物中半挥发性有机物的方法
当分析的目的是筛选所有半挥发性有机化合物时应选择凝胶渗透色谱纯化方法1.凝胶渗透色谱柱的校准按照仪器说明书对凝胶渗透色谱柱进行校准,用凝胶渗透色谱仪校准的溶液得到的色谱峰应满足以下条件:各峰均匀对称;玉米油与邻苯二甲酸二(2-二乙基己基)酯的峰间分辨率大于85%,邻苯二甲酸二(2-二乙基己基)酯与d
凝胶渗透色谱仪净化土壤沉积物中半挥发性有机物的方法
凝胶渗透色谱仪净化土壤沉积物中半挥发性有机物的方法 当分析的目的是筛选所有半挥发性有机化合物时应选择凝胶渗透色谱纯化方法 1.凝胶渗透色谱柱的校准 按照仪器说明书对凝胶渗透色谱柱进行校准,用凝胶渗透色谱仪校准的溶液得到的色谱峰应满足以下条件:各峰均匀对称;玉米油与邻苯二甲酸二(2-二乙基己
凝胶层析的概述
凝胶层析是按照蛋白质分子量大小进行分离的技术,又称之凝胶过滤, 分子筛层析或排阻层析。单个凝胶珠本身象个"筛子"。不同类型凝胶的筛孔的大小不同。如果将这样的凝胶装入一个足够长的柱子中,作成一个凝胶柱。当含有大小不同的蛋白质样品加到凝胶柱上时,比凝胶珠平均孔径小的蛋白质就要连续不断地穿入珠子的内部
凝胶色谱的分类
根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。 凝胶过滤色谱 凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子, 如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。 凝胶渗透色谱法 凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的
凝胶成像概述(二)
凝胶成像一般操作步骤1.打开凝胶成像系统开关。2.打开电脑,系统自动打开并进入成像软件。3.打开凝胶成像系统前面板,选择使用紫外透射光源或者白光透射光源,将相应光源安放到位。4.将样品放置在透射光源的样品台上。5.在成像操作界面里面选择使用Upper white光源,点击绿色(即时成像)按钮。常见问
凝胶成像概述(二)
凝胶成像一般操作步骤 1.打开凝胶成像系统开关。 2.打开电脑,系统自动打开并进入成像软件。 3.打开凝胶成像系统前面板,选择使用紫外透射光源或者白光透射光源,将相应光源安放到位。 4.将样品放置在透射光源的样品台上。 5.在成像操作界面里面选择使用Upper wh
凝胶成像概述(一)
凝胶成像定义 凝胶成像即对dna/rna/蛋白质等凝胶电泳不同染色(如eb、考马氏亮蓝、银染、sybr green)及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析。 凝胶成像系统可以应用于分子量计算,密度扫描,密度定量, PCR定量等生物工程常规研究。 凝胶成像系统的原理 样
溶胶凝胶法简介
1846年,法国化学家J.J.Ebelmen发现正硅酸酯在空气中水解时会形成凝胶,从而开创了溶胶-凝胶(Sol—Gel)化学的新纪元。所谓溶胶-凝胶法是以金属烷氧化物为先驱体,通过这种先驱体的水解与缩醇化反应形成溶胶,最后通过缩聚反应形成凝胶制品的一种方法。这是一种制备金属氧化物材料的湿化学方法
凝胶色谱技术概述
凝胶色谱法凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。一、基本理论
凝胶的制备原理
不同种类的凝胶有不同的制备方法,同时还有物理法凝胶和化学法凝胶的区别。
凝胶电泳实验
试剂、试剂盒 丙烯酰胺 双丙烯酰胺储存液过硫酸铵乙醇上样(终止)缓冲液甲酰胺EDTA溴酚蓝二甲苯腈酶和酶缓冲液PCR 产物(放射性)凝胶培养基仪器、耗材 ZapCap 过滤器108 孔深井式梳子色谱纸上样器丙烯酸防护板胶片暗盒凝胶印迹膜盖革计数器凝胶干燥系统胶片S2 型测序仪石蜡封口膜移液管剃须刀片
凝胶色谱的原理
凝胶色谱,又称为分子排阻色谱,其分离物质的原理为分子筛原理,且多用于分离有机大分子化合物,如蛋白质、多肽、多糖等.分子筛效应:一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动,垂直向下的移动和无定向的扩散运动.大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只
凝胶过滤层析简介
支持物是人工合成的交联高聚物,在水中膨胀后成为凝胶。凝胶内为内水层,凝胶周围的水为外水层。控制交联度以形成不同孔径的网状结构。交联度小的孔径大,交联度大的孔径小。凝胶只允许被分离物质中小于孔径的分子进入,大于孔径的分子被排斥在外水层,最先被洗脱下来。而进入孔径的分子也按分子量大小大致分离成不同的
梯度凝胶电泳
中文名称梯度凝胶电泳英文名称gradient gel electrophoresis定 义使所制备的电泳凝胶形成从大到小的孔隙梯度,以期样品中各组分在电泳过程中穿过孔径逐渐减小的凝胶,以期得到更好的分离。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的凝胶过滤
凝胶迁移实验(EMSA)
实验方法原理 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列
凝胶电泳定义
凝胶电泳是分子生物学中用于确定DNA,RNA和蛋白质的大小和电荷的强大工具。使用凝胶电泳带强度作为结果,您可以算出片段的大小。然后可以获取DNA指纹。正如单词的“电”部分所揭示的,凝胶电泳定义需要使用电场。使用一种特殊的机器,该机器包含覆盖电极的缓冲溶液,凝胶悬浮在内部的孔以及电极本身。
凝胶色谱的原理
凝胶色谱,又称为分子排阻色谱,其分离物质的原理为分子筛原理,且多用于分离有机大分子化合物,如蛋白质、多肽、多糖等.分子筛效应:一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动,垂直向下的移动和无定向的扩散运动.大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只
凝胶成像系统介绍
随着分子生物学研究逐步普及,凝胶成像系统在国内的需求在不断增长不管是什么用途,凝胶成像系统的组件都是相似的。都有一个拍摄系统、一个带有特殊光源的暗箱与获取和分析凝胶图片的软件组成。”但是,大部分凝胶成像系统提供了不同的产品特性来满足不同科学研究的需要。快速发展的电子技术、光学技术和成像分析软件使