关于流动相的疑问解答(一)
流动相的重要性大家都知道,一旦流动相出问题,那么分析仪器的结果就失去了参考价值,而其有效性对于很多人来说,一直都有很多不确定,很多人是靠经验来定,那么没有经验的人靠什么? 有人会说,靠资料,可是否有相关的流动相有效期的验证文件,或者是流动相的规定有效期资料供大家参考呢,答案是无,即使是国际上也没有特别针对每种流动相的有效期规定文件。大多有效期的规定都是根据试剂或常用药品的稳定性和化学性质来做参考,具体时间还要视当时的环境条件而定。也可以说,流动相的有效期规定是个经验活儿。今天小编给大家总结的就是关于流动相的有效期的给定原则、存放、和复验管理规定。 流动相放置时间影响 1、有机相挥发:有机试剂组成比例越大,沸点越低,其挥发程度越大,不过对于挥发相对比较好控制,只要密封好就可以; 2、pH值影响:反相色谱流动相往往是缓冲盐,其pH值受有机相的挥发、空气中的二氧化碳等影响,有时甚至浑浊;且......阅读全文
流动相的有效期是多少天
看是什么流动相了。如果是纯水相,一般有效时间不会超过24小时。时间长了里面会长微生物,即便是过滤也不能保证安全,所以一般一天以上的就不要了。有机相和缓冲液混合的流动相,一般常温情况也就是一天。因为虽然混合在一起了,但是里面的有机相,比如甲醇或者乙腈还是会挥发的。如果时间放得太久,保留时间会出现偏差。
液相色谱仪流动相的选用要求
液相色谱仪流动相的选用要求包括流动相性质要求、流动相选择、流动相pH值、流动相脱气、流动相过滤、流动相贮存、卤代溶剂应特别注意的问题和HPLC用水等方面。一、流动相性质要求:HPLC中,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k值减小;较弱的溶剂使溶质在填料表面的吸附增加,相应的容量因子k值
流动相的有效期是多少天
看是什么流动相了。如果是纯水相,一般有效时间不会超过24小时。时间长了里面会长微生物,即便是过滤也不能保证安全,所以一般一天以上的就不要了。有机相和缓冲液混合的流动相,一般常温情况也就是一天。因为虽然混合在一起了,但是里面的有机相,比如甲醇或者乙腈还是会挥发的。如果时间放得太久,保留时间会出现偏差。
离子交换色谱的流动相的选择
离子交换色谱的流动相必需是有一定离子强度的并对pH 有一定缓冲能力的溶液。为了避免目的蛋白失活,使用缓冲液可稳定流动相的pH,使之在色谱过程中不发生明显变化,同时可稳定目的分子上的电荷量,保证色谱结果的重要性。选择缓冲液一般按照以下原则:阳离子交换剂应选用阴离子缓冲液,可用柠檬酸盐、磷酸盐、醋酸
HPLC对流动相的一般要求
流动相就比如人体的血液,其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。 应该使用HPLC级的溶剂,不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!一般在水相和与其不混溶的溶剂切换时,使用异丙醇作为过渡溶剂。 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的最低波长,低于该波长后,溶剂会
高效液相色谱仪流动相的处理
高效液相色谱仪流动相的处理包括水的处理、溶剂的提纯、溶剂的过滤与脱气等。一、水的处理:水的等级分纯化水、蒸馏水和去离子水等。将一般的蒸馏水加入少许高锰酸钾,消耗水中的氧气,在 PH=9~10 的条件蒸馏,可用于梯度洗脱。二、溶剂的提纯:通常用蒸馏法可除去大部分有紫外吸收的杂质。三、溶剂的过滤与脱气:
为什么要对流动相进行过滤处理
液相色谱仪是属于易学难用的仪器,特别讲究“正确使用”和经验。液相工作者接触最多的是流动相,流动相也是造成液相色谱各种问题的最主要源头。液相色谱最常见的故障一是堵,二是漏。下面就这两分别展开讨论(流动相以甲醇为例,色谱柱以C18为例) 。 为何会堵? “堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因
流动相的有效期是多少天
看是什么流动相了。如果是纯水相,一般有效时间不会超过24小时。时间长了里面会长微生物,即便是过滤也不能保证安全,所以一般一天以上的就不要了。有机相和缓冲液混合的流动相,一般常温情况也就是一天。因为虽然混合在一起了,但是里面的有机相,比如甲醇或者乙腈还是会挥发的。如果时间放得太久,保留时间会出现偏差。
反相色谱流动相的选择注意事项
在液质联用中,一般均使用极性溶剂进行洗脱。反相色谱中洗脱强度顺序为:水
液相色谱仪流动相的预处理
液相色谱仪流动相的预处理包括流动相过滤和脱气等。一、流动相过滤:所有溶剂使用前都必须经0.45μm或0.22μm滤膜过滤,以除去杂质微粒。色谱纯试剂也不例外,除非在标签上标明已过滤。用滤膜过滤时,要注意分清有机相(脂溶性)滤膜和水相(水溶性)滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂,过滤水溶液时流速低或
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分
应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
液相色谱所用流动相使用时应注意什么问题?
1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题:很多做色谱分离试验的人都遇到过这样的情况:流动相不及时补充,溶剂瓶中的流动相被泵吸干,高效液相色谱系统停止工作这会损坏色谱柱吗?泵是否排出了塔中的所有流动相?是否可以使用列?事实上,如果泵吸入溶剂瓶中的流量,则不会对色谱柱造成损坏。即使泵充满空气,泵也不会将空
所有可以用作液相色谱流动相的有机溶剂
常用,乙腈水正己烷脂肪醇(甲醇,异丙醇)氯代烷烃酰胺苯,烷基取代苯氯苯脂肪酮(丙酮等)
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些
冲柱时间的长短,要看你的色谱柱。柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行,需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水(或乙腈水)来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些
冲柱时间的长短,要看你的色谱柱。柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行,需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水(或乙腈水)来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结
正相,反相色谱中固定相,流动相极性有何特点
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流动相
正相,反相色谱中固定相,流动相极性有何特点
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流动相
液相时间太长一瓶流动相不够怎么办
快用完的时候换一瓶吧,然后再走一下基线,平稳了再继续要么配的大瓶一点;样品也可以试着分2次做
液相色谱用流动相甲醇进样会有峰出现么
紫外检测器下,甲醇最大吸收波长在183nm,吸收值非常低。但是作为溶剂的话在接近183nm波长处就会有明显的吸收。 比如在210nm波长处,甲醇会有较明显的吸收,但是在220nm以上的话甲醇吸收就逐渐变得不明显了。很多物质吸收值集中在230~300nm波长之间,甲醇的在色谱系统中显
液相色谱用流动相甲醇进样会有峰出现么
流动相理论上是不会出溶剂峰和样品峰的,甲醇不会出样品峰,可以出溶剂峰。如果有样品峰出现,一般是针上残留导致一个很小的样品峰出现,目前的液相色谱还不能完全消除针上残留,只能多洗一下进样针。对于一些高端的进样器,进样针就是管路的一部分,针上残留几乎没有,基本不出样品峰。这是指一般情况,但是实践表明,当进
高效液相流动相为什么用甲醇而不用乙醇
理论上乙醇是可以用作流动相,一般情况下不选择乙醇作流动相,因为乙醇的黏度相对较大,用作流动相时柱压太大。以水作1计,乙醇1.2 丙酮0.32 甲醇0.60 乙腈0.37 。另外,使用乙醇的成本要高于甲醇,所以一般不用乙醇用流动相。
LCMS高效液相色谱质谱仪流动相的制备要求
高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法。
高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分介绍
应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
液相色谱分析仪器对流动相的要求
液相色谱活性是一种溶剂。它既具有传递效应,又具有固定的相位。它参与部件的竞争。因此,溶剂的选择对于分离非常重要。溶剂必须对样品进行测试使其具有适当的极性和良好的选择性。其次,溶剂必须与探测器匹配:对于紫外吸收检测器检测器的波长应大于溶剂的紫外截止波长。溶剂的紫外线截止波长是指当辐射小于截止波长通过溶
液相色谱HPLC流动相的溶剂怎么选择应遵循什么原则?
流动相溶剂的选择:正确选择流动相溶剂对高效液相色谱的成功至关重要。目前还没有理想的选择模式这主要取决于经验的积累。流动相溶剂选择的一般要求是:(1)溶剂应纯度高,不溶于固定相,并能保持色谱柱的稳定性;(2)溶剂的性能应与所用的检测器相匹配;(3)溶剂应具有足够的样品溶解能力;(4)溶剂应该具有低粘度