关于流动相的疑问解答(一)
流动相的重要性大家都知道,一旦流动相出问题,那么分析仪器的结果就失去了参考价值,而其有效性对于很多人来说,一直都有很多不确定,很多人是靠经验来定,那么没有经验的人靠什么? 有人会说,靠资料,可是否有相关的流动相有效期的验证文件,或者是流动相的规定有效期资料供大家参考呢,答案是无,即使是国际上也没有特别针对每种流动相的有效期规定文件。大多有效期的规定都是根据试剂或常用药品的稳定性和化学性质来做参考,具体时间还要视当时的环境条件而定。也可以说,流动相的有效期规定是个经验活儿。今天小编给大家总结的就是关于流动相的有效期的给定原则、存放、和复验管理规定。 流动相放置时间影响 1、有机相挥发:有机试剂组成比例越大,沸点越低,其挥发程度越大,不过对于挥发相对比较好控制,只要密封好就可以; 2、pH值影响:反相色谱流动相往往是缓冲盐,其pH值受有机相的挥发、空气中的二氧化碳等影响,有时甚至浑浊;且......阅读全文
分配色谱中对流动相的要求
分配色谱中对流动相的要求构成分配色谱的溶剂系统种类繁多,一般针对被分离化合物的性质进行选择,大多数是采用复合的溶剂系统,可通过调节溶剂系统的性质,使之与被分离的化合物性质相适应。例如,一个强极性溶剂A与一个弱极性溶剂B混合,通过改变其组成比例,可得到一系列中极性强度的流动相系统。表2—1就是根据被分
液固吸附色谱仪流动相简介
液固吸附色谱仪中使用的流动相为有机溶剂,主要是非极性的烃类(如己烷和庚烷等),某些有机溶剂(如二氟甲烷、甲醇和三乙胺等)作为缓和剂加入以调节流动相的溶剂强度、极性和PH值。一、正相色谱:液固吸附色谱是正相色谱。流动相溶剂极性越大,洗脱能力越强,溶质保留越小。流动相溶剂极性越小,洗脱能力越弱,溶质保留
液液分配色谱法流动相
液液分配色谱法流动相 :流动相与固定液应尽量不互溶,或者二者的极性相差越大越好。根据流动相与固定相极性的差别程度,可将液液色谱分为正相分配色谱(流动相极性小于固定相极性,极性小的先流出,适于强极性和中等极性组分分离)和反相分配色谱(流动相极性大于固定相极性,极性大的先流出,适于非极性或弱极性组分分离
高效液相色谱仪流动相脱气方法
在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,高效液相色谱仪(HPLC)也已成为不可或缺的分析仪器。流动相脱气是HPLC系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下,高效液相色谱脱气的必要性,并总结归纳了脱气常用的方法。一、脱气的必要性流动相脱气是HPLC系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HP
如何正确安装流动相杂质捕集小柱
高效液相色谱分析中,几乎不可避免鬼峰的干扰,尤其是使用了缓冲盐或者酸性添加剂的流动相并进行梯度分析时,更容易出现鬼峰从而干扰微量或痕量物质的分离和定量。为了解决上述问题,岛津公司是最早推出流动相杂质捕集小柱(俗称鬼峰捕集柱)的厂家之一。在实际高效液相色谱梯度分析时,将杂质捕集小柱安装在梯度混合器和进
液相色谱仪对流动相的要求
液相色谱仪对流动相的要求:1.流动相:首先必须是HPLC级的,这一条相信大家都做到了。2.脱气:由于流动相里含有微量空气,经泵的压力作用,会在流通池里产生气泡,这对分析产生一定的影响,如噪音增大,甚至于掩盖信号峰。因此,流动相在使用前必须经超声脱气30分钟以上。3.过滤:由于流动相里有很微小
流动相在色谱法中的作用
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。用作流动相的物质有:气体、液体、超临界流体等。常见的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。
液固吸附色谱仪流动相简介
液固吸附色谱仪中使用的流动相为有机溶剂,主要是非极性的烃类(如己烷和庚烷等),某些有机溶剂(如二氟甲烷、甲醇和三乙胺等)作为缓和剂加入以调节流动相的溶剂强度、极性和PH值。一、正相色谱:液固吸附色谱是正相色谱。流动相溶剂极性越大,洗脱能力越强,溶质保留越小。流动相溶剂极性越小,洗脱能力越弱,溶质保留
高效液相色谱仪流动相的处理
高效液相色谱仪流动相的处理包括水的处理、溶剂的提纯、溶剂的过滤与脱气等。一、水的处理:水的等级分纯化水、蒸馏水和去离子水等。将一般的蒸馏水加入少许高锰酸钾,消耗水中的氧气,在 PH=9~10 的条件蒸馏,可用于梯度洗脱。二、溶剂的提纯:通常用蒸馏法可除去大部分有紫外吸收的杂质。三、溶剂的过滤与脱气:
流动相抽滤膜有机与水系怎么辨别
没什么特别大的区别,外观一致。实际抽滤一下吧,用一点纯甲醇,水膜瞬间化掉,有机膜完好。如果两个同时抽滤纯水相,水膜过滤速度会快一些。
高效液相色谱仪流动相脱气方法
脱气方法 1.吹氦脱气法 利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa压力下,以约60mL/min流速通入流动相储液容器中10~15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置,一体积的氦气可从流动相中将等体积
如何正确安装流动相杂质捕集小柱
高效液相色谱分析中,几乎不可避免鬼峰的干扰,尤其是使用了缓冲盐或者酸性添加剂的流动相并进行梯度分析时,更容易出现鬼峰从而干扰微量或痕量物质的分离和定量。为了解决上述问题,岛津公司是最早推出流动相杂质捕集小柱(俗称鬼峰捕集柱)的厂家之一。在实际高效液相色谱梯度分析时,将杂质捕集小柱安装在梯度混合器和进
液相色谱仪流动相脱气的原因
液相色谱仪所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵工作、柱分离效率、检测器灵敏度和基线稳定性,甚至无法检测。一、流动相中的溶解氧可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。二、溶解氧会引起溶剂pH变化,给分析结果带来误差。三、溶解氧能与某些溶剂(如甲醇和四氢呋喃)形成有紫外吸收的络
液相色谱仪流动相脱气的办法
液相色谱仪所用的流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。才外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果带来误差。 溶解氧能与某些溶剂形成有
色谱法按流动相种类的分类
色谱法按流动相种类的分类:色谱类型流动相主要分析对象气相色谱法气体挥发性有机物液相色谱法液体可以溶于水或有机溶剂的各种物质超临界流体色谱法超临界流体各种有机化合物电色谱法缓冲溶液、电场离子和各种有机化合物
液相色谱仪流动相的贮存方法
液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染的溶剂如用于液相色谱仪系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成的变化,同时防止空气中的氧和二氧化碳溶入流动相中。磷酸盐、乙酸
反相色谱流动相的选择注意事项
在液质联用中,一般均使用极性溶剂进行洗脱。反相色谱中洗脱强度顺序为:水
液相色谱仪流动相脱气的办法
高效液相色谱仪所用的流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。才外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果带来误差。 溶解氧能与某些溶剂形成
液相色谱仪流动相的选用要求
液相色谱仪流动相的选用要求包括流动相性质要求、流动相选择、流动相pH值、流动相脱气、流动相过滤、流动相贮存、卤代溶剂应特别注意的问题和HPLC用水等方面。一、流动相性质要求:HPLC中,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k值减小;较弱的溶剂使溶质在填料表面的吸附增加,相应的容量因子k值
流动相抽滤膜有机与水系怎么辨别
没什么特别大的区别,外观一致。实际抽滤一下吧,用一点纯甲醇,水膜瞬间化掉,有机膜完好。如果两个同时抽滤纯水相,水膜过滤速度会快一些。
液相色谱仪流动相的选择原则
液相色谱仪分析中,选择流动相时应考虑流动相与填料的作用、纯度、与检测器的匹配、粘度、对样品的溶解度和样品回收等方面。一、流动相与填料的作用:流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流
液相色谱流动相混合导致基线噪音
液相色谱作为常见的分析检测设备,在工业生产以及实验研究的过程中有着重要作用。在液相色谱使用过程中,基线噪音是令做液相色谱的操作人员感到十分头疼的问题,尤其是在使用液相色谱进行痕量分析时。其中,由于液相色谱采用的多种流动相便是出现这类噪音的原因之一。以下根据网上资料,对液相色谱因多种流动相在线
流动相的有效期是多少天
看是什么流动相了。如果是纯水相,一般有效时间不会超过24小时。时间长了里面会长微生物,即便是过滤也不能保证安全,所以一般一天以上的就不要了。有机相和缓冲液混合的流动相,一般常温情况也就是一天。因为虽然混合在一起了,但是里面的有机相,比如甲醇或者乙腈还是会挥发的。如果时间放得太久,保留时间会出现偏差。
液相色谱仪对流动相的要求
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下特点:1 纯度 流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。溶剂所含杂质在柱上积累,会影响色谱柱的使用寿命。2 溶解度 样品的溶解度要适宜如果溶解度
液相色谱仪流动相的选择方法
液相色谱仪分析中,流动相溶剂的洗脱能力与溶剂极性相关。一、正相色谱的流动相:在正相色谱中,溶剂强度随极性的增强而增加。正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。二、反相色谱的流动相:在反相色谱中,溶剂强度随极性的增强而减弱。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂,再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂
高效液相色谱仪流动相选择方法
流动相选择方法 1:由强到弱: 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。 2: 三倍规则 :每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调
液相色谱仪溶剂流动相的纯化
分析纯和优级纯溶剂在很多情况下可以满足液相色谱仪分析的要求,但不同的色谱柱和检测方法对溶剂的要求不同。目前液相色谱分析用的色谱纯溶剂除zui常用的甲醇外,其余多为分析纯,有时要进行除去紫外杂质、脱水和蒸馏等纯化操作。一、乙腈是常用的溶剂,分析纯乙腈中含有少量的丙酮、丙烯腈、丙烯醇和噁唑等化合物,会产
HPLC对流动相的一般要求
流动相就比如人体的血液,其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。 应该使用HPLC级的溶剂,不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!一般在水相和与其不混溶的溶剂切换时,使用异丙醇作为过渡溶剂。 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的最低波长,低于该波长后,溶剂会
HPLC分析方法开发中流动相的调整
秘诀1:由强到弱: 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验, 这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。秘诀2 三倍规则 :每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意
离子交换色谱的流动相的选择
离子交换色谱的流动相必需是有一定离子强度的并对pH 有一定缓冲能力的溶液。为了避免目的蛋白失活,使用缓冲液可稳定流动相的pH,使之在色谱过程中不发生明显变化,同时可稳定目的分子上的电荷量,保证色谱结果的重要性。选择缓冲液一般按照以下原则:阳离子交换剂应选用阴离子缓冲液,可用柠檬酸盐、磷酸盐、醋酸