毛细管对HPLC分离的影响

若高效液相色谱 (HPLC) 系统采用了不适当的连接方式或者应用不正确的毛细管,均可能导致均可能导致不良的峰扩宽,色谱柱的最佳分离效率就更无从谈起。甚至还可能发生使用的柱子越细,其洗脱峰的扩宽反而越大的情况。本文将详细介绍毛细管对高效液相色谱分离的影响,以及如何选择正确的毛细管与连接方式。 图1. 为了达到最佳分离性能,即使是毛细管和管路连接也必须与HPLC系统相适配。 高效液相色谱柱良好的分离效率是HPLC成功分离的一个重要前提,不适当的管路连接或毛细管的使用不当,均可能导致不良的峰扩宽,因此需要特别注意。当使用4.6×250mm的“老式”标准分离柱时,毛细管的作用和管路连接的影响还不是很突出;而当使用2.0×100mm的细径色谱柱时,它们的影响就很大。 对于“Ex-柱”而言,造成峰扩宽的主要原因是管路连接中使用了错误的毛细管和空腔,它们会显著扩张淋洗通道。因此原则上应尽可能采......阅读全文

毛细管电泳分离因素添加剂

添加剂在电解质溶液中加入添加剂,例如中性盐、两性离子、表面毛细管活性剂以及有机溶剂等,会引起电渗流的显著变化。表面活性剂常用作电渗流的改性剂,通过改变浓度来控制电渗流的大小和方向,但当表面活性剂的浓度高于临界胶束浓度时,将形成胶束。加入有机溶剂会降低离子强度,Zeta电势增大,溶液粘度降低,改变管壁

毛细管电泳色谱仪分离类型

毛细管电泳色谱仪分离类型有电泳型、色谱型、联用型和其它型。一、电泳型:1、毛细管区带电泳:毛细管内只填充pH缓冲液。2、毛细管凝胶电泳:毛细管内填充聚丙烯酰胺等凝胶。3、毛细管等电聚焦电泳:毛细管内填充pH梯度介质。4、毛细管等速电泳:通常采用不连续(自由溶液)电泳介质。二、色谱型:1、填充毛细管电

毛细管电泳的分离模式的综述

  CE具有多种分离模式(多种分离介质和原理),故具有多种功能,因此其应用十分广泛,通常能配成溶液或悬浮溶液的样品(除挥发性和不溶物外)均能用CE进行分离和分析,小到无机离子,大到生物大分子和超分子,甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦破鉴定、

高效毛细管电泳的分离原理总结

  1 毛细管区带电泳(Capillary Zone Electroporesis,CZE)   分离原理:毛细管区带电泳出称为自由溶液毛细管电泳,是毛细管电泳是最简单的一种形式。其分离机理是基于各被物质的净电荷与质量之间比值的差异,不同离子按照各自表面电荷密度的差异,以不同的速度在中解质中移动而

微量制备毛细管电泳实验——多次分离

实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒血管紧缩素I和血管紧缩素II0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材75 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 低压下(0.5 lb/in2

毛细管电泳技术的分离因素

缓冲液缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电渗流。缓冲液浓度升高,离子强度增加,双电层

毛细管电泳分离条件选择流程

分离条件的选择是毛细管电泳中最重要但也是最难之处。不同的专业研究工作者可能会有各自不同的选择策略和流程,我们提出如下九步选择流程,仅供参考: 第一步,尽可能多地了解分离样品的类型、来源、组成及其性质; 第二步,根据样品的可能性质和来源,选择分离模式,若无样品信息可先选CZE; 第三步,根据样品性质确

毛细管电泳芯片等电聚焦分离

芯片等电聚焦分离芯片等电聚焦分离蛋白质的原理与常规毛细管等电聚焦基本相同,都是依据蛋白质的等电点(pI)不同而进行分离。Hofmann等首次将毛细管等应用于蛋白质分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等电聚焦模式分离厂牛血清白蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)。Das等。26 3

毛细管电泳各类物质的分离要点

1.阴离子及有机酸: ?此类物质没有紫外吸收,要采用间接检测法 ?间接紫外法一般以铬酸钠等物质作为背景吸收物 ?CTAB通常用作电渗流反向剂,以加速出峰,提高峰的尖锐度 ?要使用反向极性分离 2.阳离子及金属离子的分离: ?此类物质没有紫外吸收,要采用间接检测法 ?间接紫外法一般以氨基吡啶等物质作为

毛细管电泳色谱仪分离系统

毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,毛细管是分离的关键。一、毛细管材质:理想的毛细管必须是化学和电惰性,能透过紫外和可见光,有一定的韧性,富有弹性,易于弯曲,耐用而且便宜。目前使用的材质有聚四氟乙烯、玻璃和石英等,其中石英最

高效毛细管电泳的分离原理总结

1 毛细管区带电泳(Capillary Zone Electroporesis,CZE)分离原理:毛细管区带电泳出称为自由溶液毛细管电泳,是毛细管电泳是最简单的一种形式。其分离机理是基于各被物质的净电荷与质量之间比值的差异,不同离子按照各自表面电荷密度的差异,以不同的速度在中解质中移动而导致分离,它

分离电压对毛细管电泳的影响

  在CE中,分离电压也是控制电渗的一个重要参数。高电压是实现CE快速、高效的前提,电压升高,样品的迁移加大,分析时间缩短,但毛细管中焦耳热增大,基线稳定性降低,灵敏度降低;分离电压越低,分离效果越好,分析时间延长,峰形变宽,导致分离效率降低。因此,相对较高的分离电压会提高分离度和缩短分析时间,但电

毛细管电泳分离中性分子时可采用哪种分离模式

可采用胶束电动毛细管色谱法(MEKC),MEKC弥补了毛细管区带电泳(CZE)分离模式的不足,它不仅可以分析荷电离子,还可以测定中性物质。在MEKC分离模式中,通常要向缓冲溶液中加入离子型表面活性剂(如十二烷基硫酸钠,SDS等),当缓冲液中表面活性剂浓度超过其自身的临界胶束浓度时就会形成胶束(准固定

如何防止高效(HPLC)或毛细管(CapLC)液相色谱的污染?

最小化或者减少背景污染物的建议:所有的溶剂和酸、碱、缓冲盐都是化学品,没有一种是100%纯的。因此,在LC/MS中总是存在着一些化学背景。为了改善数据质量,将干扰以及背景噪音减少到最小是非常值得考虑的。在此我们给大家提出一些小建议,供大家参考。1. 溶剂和添加剂a. 使用最高纯度的试剂 – HPLC

毛细管胶束电泳色谱仪分离的基础

毛细管胶束电泳色谱仪分离中,把离子型表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)加入缓冲液,当其浓度超过临界浓度后形成有一疏水内核、外部带负电的胶束。虽然胶束带负电,但电渗流速度仍大于胶束的迁移速度,故胶束将慢速向负极移动。中性粒子按其疏水性不同,在缓冲液(流动相)和胶束(准固定相)之间分配。疏水性强、亲水性弱的

微量制备毛细管电泳实验——单次分离

实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒4:1(V/V)0.5 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.50)/乙烯乙二醇0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材150 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 制备多肽混合物和预处理柱子(见多次分离步骤 1 和 2)。2. 在 0.

毛细管电泳色谱仪的分离模式

毛细管电泳色谱仪(CE)的分离模式有毛细管区带电泳、毛细管胶束电泳色谱、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳、毛细管等速电泳、毛细管阵列电泳和毛细管芯片电泳等。一、毛细管区带电泳(CZE):CZE又称毛细管自由电泳,由于操作简单、多样化,是目前CE中最基本、应用最广泛的一种分离模式。在CZE中,毛细

毛细管电泳仪的分离因素介绍

缓冲液缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电渗流。缓冲液浓度升高,离子强度增加,双电层

毛细管电泳色谱仪分离分析模式

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,正成为生物样品zui重要的分离分析手段。CE分离分析模式有毛细管电色谱、毛细管区带电泳、毛细管胶束电

毛细管电泳(Capillary-electrophoresis,CE)——分离分析方法

毛细管电泳(Capillary electrophoresis,CE)--分离分析方法CE是在传统的电泳技术基础上于本世纪60年代末由Hjerten发明的,其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽,使电泳效率提高了几十倍。此技术从80年代以来发展迅速,是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性抗原肽与蛋白

毛细管电泳仪分离条件的选择

毛细管电泳仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分离科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分离科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分离成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分离有了新的转机。一、分离条件的选择内容:1、毛

Supelco推出全新生物分离ESC18-HPLC柱

  Sigma-Aldrich(R)旗下分析品牌之一,Supelco 近日宣布推出基于全新的160Å熔融核(Fused CoreTM)色谱填料技术的快速、高效Ascentis Express peptide ES-C18 HPLC多肽分析柱。该款色谱柱高效、稳定,并且反相填料的多孔结构和孔径均经最优

高效毛细管电泳仪与高效液相色谱仪比较

         高效毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪(HPLC)之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分

高效毛细管电泳仪与高效液相色谱仪比较

        高效毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪(HPLC)之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子

毛细管电泳仪与液相色谱仪比较

毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪(HPLC)之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。HPC

毛细管电泳色谱仪分离模式的发展

毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。

芯片的高效高速毛细管电泳(CE)分离系统

近年来该技术发展迅速,在蛋白质、脱氧核糖核酸(DNA)等生物大分子的分离分析中表现出了显著的优越性。20世纪90年代初,Manz和Widmer等首次提出了以微机电加工技术(microelectromechanical systems,MEMS)和分析化学为基础的微全分析系统(miniaturiz

影响毛细管电泳仪分离效果的因素

影响毛细管电泳仪分离效果的因素有电场强度、缓冲液pH、离子强度、温度和添加剂等。一、电场强度:1、结果:电渗速度与电场强度成正比。2、说明:(1)电场强度降低,分离效率和分辨率降低。(2)电场强度增大,焦耳热增大。二、缓冲液pH:1、结果:pH增大,电渗速度增大。2、说明:(1)改变电渗速度zui方

毛细管区带电泳仪的分离条件

毛细管区带电泳仪(CZE)的整个系统用同一种缓冲液充满,带电粒子的迁移速度是电泳速度和电渗流速度的矢量和,分离条件包括缓冲液、添加剂和工作电压等。一、缓冲液:CZE分离过程在缓冲液中进行,缓冲液的选择直接影响粒子的迁移和分离。缓冲液的选择须遵循的要求:1、在所选择的pH范围内有很好的缓冲容量。2、在

毛细管电泳色谱仪分离分析模式详解

分析模式详解。毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,正成为生物样品zui重要的分离分析手段。CE分离分析模式有毛细管电色谱、毛细管区带电泳