分离肽和蛋白质色谱柱的维护

1、使用常规要求 pH:为了保证色谱柱长寿命,硅胶基质色谱柱的使用pH范围是2~7,超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关,但是偏离2~7范围越远,色谱柱性能下降的越快。 温度:典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与60℃之间,高温使用会缩短柱寿命。 缓冲溶液:生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动相的pH值,仔细控制避免缓冲溶液与流动相有机溶剂混合时产生沉淀,色谱柱和HPLC系统不能储存在含盐或缓冲溶液的体系中。 压力:操作压力升高,色谱柱寿命缩短,通常要求色谱柱使用中压力低于3000psi。压力与流动相流速和柱长成正比,与粒径平方成反比。相同规格的3µm填料色谱柱压力约为5µm色谱柱的两倍。流动相不同压力也会有明显差异,如60/40的甲醇/水大约是60/40甲醇/水的两倍。随色谱柱使用,压力会缓慢增加,色谱柱压力突然增加可能是色谱柱或连接管堵塞。 2、色谱柱的维护 ......阅读全文

色谱柱分离经验

柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂

色谱柱分离经验

色谱柱可以分为:加压、常压、减压色谱柱。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶

电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验

实验材料 冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒 甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材 旋转蒸发器小试管实验步骤 1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中,在室温下放置让,将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中,将蛋白质溶解于 50ul 过

电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验

方案1 蛋白质的过甲酸氧化实验 方案2 蛋白质还原和S-羧甲基化:大规模方法 方案3 蛋白质还原和S-羧甲基化:微量方法 方案4 用Ellman 试剂测定自由巯基和二硫键实验 方案5 蛋白质的胰酶消化实验 方案6 用溴化氰切割 M

液相色谱仪色谱柱的维护和保养事项

液相色谱仪色谱柱的维护和保养事项:一、每天用足够的时间平衡色谱柱。二、尽量使用预柱保护分析柱。三、色谱柱在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动。四、避免使用高粘度的溶剂作流动相。五、避免流动相组成和极性的剧烈变化。六、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。七、大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2.5~7,尽

色谱柱的使用和维护注意事项

色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。   影响色谱柱使用寿命的主要因素   一.流动相因素   1.流动相pH   不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为10

LCMS色谱柱的维护和保养

1.所使用的流动相均应为HPLC级或相当于该级别的,在配置过程中所有非HPLC级的试剂或溶液均经0.45um薄膜过滤。而且流动相使用前都经过超声仪超声脱气后才使用。2.所使用的水必须是经过蒸馏纯化后再经过0.45um水膜过滤后使用,所有试液均新用新配。并且在进样的样品都必须经过0.45um薄膜针筒过

气相色谱柱的维护和保养修理

一、气相色谱柱的维护  每次新安装了色谱柱后,都要在进样前进行老化。具体办法是,先接通载气,然后将柱温从℃左右以5-10℃、min的速率程序升温到色谱柱的zui高使用温度以下30℃(如HP-5柱可到280℃)或者实际分析操作温度以上30℃(如分析时用240℃,老化温度应为270℃),并在高温时恒温3

气相色谱柱的维护和保养修理

 每次新安装了色谱柱后,都要在进样前进行老化。具体办法是,先接通载气,然后将柱温从℃左右以5-10℃、min的速率程序升温到色谱柱的zui高使用温度以下30℃(如HP-5柱可到280℃)或者实际分析操作温度以上30℃(如分析时用240℃,老化温度应为270℃),并在高温时恒温30到120min,直到

色谱柱的使用和维护注意事项

流动相因素1.流动相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH 1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流动相pH范围约为1~8。键合相硅胶填料则由于键合层的屏蔽作用,使填料对流动相的

色谱柱的使用和维护注意事项

  色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。  1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢

液相色谱柱的正确使用和维护

液相色谱柱,是一种用于液体色谱分析仪器。在日常使用中不注意就会出现各种突发状况,比如降低柱效缩短使用寿命甚至损坏,严重时甚至影响项目的进度。因此液相色谱柱的正确使用和维护十分重要。 液相色谱柱的正确使用和维护: 1. 维护色谱柱避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉

液相色谱柱的正确使用和维护

色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。  ① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行

高效液相色谱柱的保养和维护

 色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等,色谱柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构及装填技术。  1、高效液相色谱柱的保养  色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并

液相色谱柱的正确使用和维护

液相色谱柱,是一种用于液体色谱分析仪器。在日常使用中不注意就会出现各种突发状况,比如降低柱效缩短使用寿命甚至损坏,严重时甚至影响项目的进度。因此液相色谱柱的正确使用和维护十分重要。 液相色谱柱的正确使用和维护: 1. 维护色谱柱避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉

气相色谱柱的维护和保养修理

  一、气相色谱柱的维护  每次新安装了色谱柱后,都要在进样前进行老化。具体办法是,先接通载气,然后将柱温从℃左右以5-10℃/min的速率程序升温到色谱柱的最高使用温度以下30℃(如HP-5柱可到280℃)或者实际分析操作温度以上30℃(如分析时用240℃,老化温度应为270℃),并在高温时恒温3

盘点色谱柱的使用和维护12要点

  色谱柱石油柱管、压帽、卡套(密封杯)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。  在日常分离分析的工作中,色谱柱的正确使用和维护是十分重要的,色谱柱使用是否得当,直接影响到色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,以下

色谱柱的使用和维护注意事项

色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。  影响色谱柱使用寿命的主要因素  流动相因素  1.流动相pH  不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH

液相色谱柱日常使用和维护

色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在

离子色谱仪柱和分离柱的重要性

 离子色谱的分离机理主要是离子交换,有3种分离方式,它们是离子交换色谱(HPIC)、离子排斥色谱(HPIEC)和离子对色谱(MPIC)。用于3种分离方式的柱填料的树脂骨架基本都是苯乙烯-二乙烯基苯的共聚物,但树脂的离子交换功能基和容量各不相同。HPIC用低容量的离子交换树脂,HPIEC用高容量的树脂

色谱柱的维护方法

   色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外,zui主要的是与日常的维护密切相关。色谱柱的使用寿命主要是柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,消除引起柱效下降和柱压升高的因素。以下是色谱柱的维

色谱柱的维护方法

色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外,最主要的是与日常的维护密切相关。色谱柱的使用寿命主要是柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,消除引起柱效下降和柱压升高的因素。以下是色谱柱的维护方法: 

色谱柱使用维护

 1、色谱柱的使用说明:  (1)色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中

液相色谱柱的分离效果取决于色谱柱的制备和操作条件

 色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 kg/cm2 时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使

高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养事项

高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养事项:一、每天用足够的时间平衡色谱柱。二、尽量使用预柱保护分析柱。三、色谱柱在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动。四、避免使用高粘度的溶剂作流动相。五、避免流动相组成和极性的剧烈变化。六、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。七、大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2.5~7

柱色谱和色谱柱的区别

简单的说色谱柱是一种硬件,而柱色谱则是一种技术,柱色谱法,又称层析法,是一种以分配平衡为机理的分配方法。柱色谱概念:      柱色谱是在一根玻璃管或金属管中进行的色谱技术,将吸附剂填充到管中而使之成为柱状,这样的管状柱称为吸附色谱柱。使用吸附色谱柱分离混合物的方法,称为吸附柱色谱。这种方法可以用来

毛细管色谱柱的安装、老化和维护

  上一个帖子我们详细的介绍了毛细管柱的基础知识,今天咱们再说一说毛细管色谱柱的安装、老化和维护,以及在这过程中需要注意的事项。  毛细管色谱柱的安装  步骤1:检查各个配件。  检查气体过滤器和进样垫,保证辅助气和检测器的通气畅通,如果以前做过较脏样品或活性较高的化合物,需要将进样口的衬管清洗或更

液相色谱柱的使用和维护12要点

液相色谱柱的使用和维护12要点    在日常分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。    在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。    1、柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较

液相色谱柱的使用和维护12要点

 在日常分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。    在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。    1、柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。