大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选
【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中，用某些物理因素或化学因素处理细菌，可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力，不能在基本培养基上生长，必须补充某些物质才能生长，称为营养缺陷型。实验室获得营养缺陷型菌株通过经过以下几个步骤：诱变处理、突变型筛选、缺陷型检出，缺陷型鉴定。诱变处理首先要选择诱变剂，诱变剂可分为物理和化学两类。微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。进行诱变处理时为了避免出现不纯的菌落，一般要求微生物呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液，分布均匀。试验表明处于对数生长期的细菌对诱变剂的反应最灵敏。诱变处理必须选择合适的剂量，不同微生物的最适处理剂量不同，须经预备实验确定。物理诱变的相对剂量与三个因素有关：诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)功率、处理时间，往往......阅读全文
手机新应用：检测食品中的“大肠杆菌”
手机中的新应用正逐渐改变着用户的消费世界，” v-Fluence Interactive 网络市场研究与支撑中心总裁Jay Byrne在最近的评论文章中列数了几款时新的手机应用：“比如，一款名为CellScope的手机技术使得手机的摄像头可被用作发光的显微镜——这意味着拥有这种摄像技术的手机，比
新型大肠杆菌检测仪的检测原理
新型大肠杆菌检测仪的检测原理可以完成准确的微生物大肠杆菌检测，大肠杆菌是非常普遍的一种微生物，当我们免疫力下降时，它就会成为机会致病菌，有可能引起我们肠道外的感染，比如败血症、泌尿道感染等，所以说我们有时候必须防备这种危害的发生。 大肠杆菌检测仪采用标准的方法，酶与细菌培养反应后光信号变化成正
致病性大肠杆菌性肠炎的病因
EPEC形态、生化与普通大肠埃希杆菌相同，两者之鉴别主要依靠血清型之不同。EPEC有13个常见血清型，0111最多，占总病例数之40%～50%。
－PNAS：将大肠杆菌转变为制药工厂
紫杉醇是世界知名的抗癌药，已被证明从20世纪70年代起就对多种癌症具有显著疗效。它是一种来自于紫杉树树皮的天然物质，正因为如此，它的分子结构非常复杂，它的作用机制同样如此：在1977年，有研究表明，紫杉醇可以结合到细胞的微管组装中，并稳定微管，这防止收缩，并防止伴随细胞分裂减慢发生的染色体分离。
大肠杆菌感受态细胞的制备
实验原理感受态就是细菌吸收转化因子的生理状态，只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。受体细胞经过一些特殊方法（如：电击法，CaCl2等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许带有外源DNA的载体分子进入的感受态细胞。 目前常用的感受态细胞制备方法有CaCl2
如何根据OD值计算大肠杆菌液浓度
测定菌液浓度常用的有以下三种方法：1、平板培养计数可以求出活菌数；将菌液稀释一定浓度，吸100ul菌液涂布于平皿，做菌落技术，然后计算确切数目！2、细胞比较大的可以用血球技术板在显微镜下直接计数；3、比浊法测定细菌的生长，需要
噬菌体侵染大肠杆菌的实验的原理
噬菌体在侵染时，将DNA注入大肠杆菌复制，蛋白质外壳留在外面，短暂培养后，离心，使蛋白质外壳在溶液上层，大肠杆菌和未从大肠杆菌体内释放出的子代噬菌体在溶液下层。如果是32P标记的噬菌体（标记了DNA）则溶液下层放射性高，如果是35S标记的噬菌体（蛋白质），则溶液上层放射性高
大肠杆菌在革兰氏染色后呈什么颜色
大肠杆菌是革兰氏阴性杆菌。革兰氏阴性细菌通过革兰氏染色可被染成红色或粉红色。因此，如果染色正确，那么通过显微镜油镜观察，可以发现大肠杆菌为红色或粉红色的杆状细菌。 大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli） 革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周生鞭毛，能运动，无芽孢。能
大肠杆菌的检测方法多管发酵法简介
多管发酵法是根据大肠菌群能发酵乳糖产酸产气的特征，检测水样中大肠菌群的方法。多管发酵的大肠菌群阳性，如果在 44.5℃的培养基上进行 24h的培养，能释放出荧光产物而使培养基在紫外光源的照射下呈现荧光反应，此种方法即可检测出样本中是否含有大肠杆菌，具体步骤:取一定量水样于乳糖蛋白胨培养液中进行初
大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选
【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中，用某些物理因素或化学因素处理细菌，可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力，不能在基本培养基上生长，必须
肠出血性大肠杆菌的相关介绍
肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic E. coli, EHEC）是大肠杆菌的一个亚型，以O抗原分型，EHEC可分为O157、O26、O111血清型，主要致病菌株为O157:H7，可引起感染性腹泻，因能引起人类的出血性肠炎而得名。在1982年一次出血性结肠炎流行中被分离出。
大肠杆菌在生物技术中的应用
大肠杆菌作为外源基因表达的宿主,遗传背景清楚,技术操作简单,培养条件简单,大规模发酵经济,倍受遗传工程专家的重视.目前大肠杆菌是应用最广泛,最成功的表达体系,常做高效表达的首选体系 真核基因在大肠杆菌中表达,必须有合适的表达载体(Vector),常用载体:pBV220,pET系统 目的基因在
欧盟建议建立追溯体系避免大肠杆菌疫情
据国外食品类网站报道，英国利兹海德食品研究所食品安全与危机管理主任托尼.海因斯表示，在大肠杆菌疫情期间，德国卫生当局失去了对食品行业的控制力，然而有效的追溯体系对于避免大肠杆菌疫情再次上演至关重要。 据了解，大肠杆菌疫情共造成德国48人死亡，法国15人死亡，最终疫情源头被追溯至从埃及进口的
如何根据OD值计算大肠杆菌液浓度
测定菌液浓度常用的有以下三种方法：1、平板培养计数可以求出活菌数；将菌液稀释一定浓度，吸100ul菌液涂布于平皿，做菌落技术，然后计算确切数目！2、细胞比较大的可以用血球技术板在显微镜下直接计数；3、比浊法测定细菌的生长，需要
肠出血性大肠杆菌的治疗原则
O157H7大肠杆菌可引起出血性肠炎、溶血性尿毒综合症和血栓性血小板减少性紫癜等。对出血性肠炎的治疗应根据腹泻病的一般治疗原则，即支持疗法和适当使用抗生素。饮食宜以流质量少为主，避免在直肠及结肠中有过多粪便。有条件时，抗生素的选择应根据药敏试验结果。江苏省疾病预防控制中心对1999年分离到的89
关于大肠杆菌重组蛋白表达系统解答
大肠杆菌（E.coli）重组蛋白表达技术经过多年的发展，相对于其他表达体系，算是非常成熟的一个体系。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点：遗传背景清楚；易于培养和控制；转化操作简单；表达水平高；成本低；周期短。本篇将对大肠杆菌重组蛋白表达系统的常见技术问题进行一一解答。1：大肠杆菌表达体系的优点是什么
如何根据OD值计算大肠杆菌液浓度
测定菌液浓度常用的有以下三种方法：1、平板培养计数可以求出活菌数；将菌液稀释一定浓度，吸100ul菌液涂布于平皿，做菌落技术，然后计算确切数目！2、细胞比较大的可以用血球技术板在显微镜下直接计数；3、比浊法测定细菌的生长，需要
大肠杆菌质粒DNA的提取（碱裂解法）
实验材料 质粒DNA试剂、试剂盒 葡萄糖 EDTA Tris-HCl NaOH SDS 乙酸钾 乙醇 Rnase仪器、耗材 EP管 离心机
大肠杆菌定性测试仪主要特点
1.比传统检测饮用水、污染水、地表水、水处理及再生水的MF或MTF方法更加便捷，数据更可靠；2.不需要复杂、昂贵的实验室器材和专业人员即可现场测试，而且简单方便，操作方法更容易掌握；3.现场测试减少了由于运输及保持时间引起的误差，这样可确保准确采样；4.在没有实验室的偏远地方也可进行精确可靠的测试；
肠出血性大肠杆菌的发病机制
动物试验研究结果表明O157H7大肠杆菌进入人体后主要侵犯小肠远端和结肠、肾脏、肺、脾脏和大脑。引起肠粘膜水肿、出血、液体蓄积、肠细胞水肿、坏死及肾脏、脾脏与大脑的病变。 O157H7大肠杆菌主要依靠它产生的志贺样毒素、溶血素和对上皮细胞的粘附力引起人体的损害。O157H7大肠杆菌能产生一种细胞
大肠杆菌感受态细胞的制备
实验概要大肠杆菌感受态细胞的CaCl2法制备及质粒转化。实验原理处于对数生长期的细菌经CaCl2 处理后接受外源DNA的能力显著增加。细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。 在自然条件下，很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内，但在人工构建的质粒载体中，一般缺乏此种转移所必需的mob基因，
概述大肠杆菌菌株的分型及区别
1：DH5a菌株 DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coliDH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。 基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，end
关于大肠杆菌无细胞系统的简介
大肠杆菌无细胞系统：S30原核体外翻译系统的E.coliT7S30提取物是由OmpT 内切蛋白酶和L.on的E.coliB 菌株制备的，所以在S30系统中表达基因可以增加产物的稳定性，尤其适用于在作外表达时易被蛋白酶降解的蛋白质。S30体外翻译系统也适合表达那些在体内表达时由于宿主编码的抑制酶作
奥迪投资研发大肠杆菌生产新型生物燃料
随着全球排放标准的不断提升，新能源技术已成为降低车辆二氧化碳等排放的重要方法之一。继纯电动、燃料电池等技术后，奥迪正在研发全新的“气”油，其有望成为一种新的能源燃料。 近日奥迪公司可持续产品开发部负责人ReinerMangold近日在接受采访时表示：“我们采用创新技术能够实现可再生燃料的生
目的基因在大肠杆菌中的诱导表达
[实验原理] 将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具
肠出血性大肠杆菌感染的简介
家禽家畜为本病储存宿主和主要传染源，人群普遍易感，但以老人、儿童为主。有明显季节性，7、8、9 叁个月为流行高峰。典型的表现是急性起病，腹泻，初为水样便，继之为血性便。伴痉挛性腹痛，不发热或低热，可伴恶心、呕吐及上感样症状。无合并症者，7～10 天自然痊愈。少数病人于病程1～2 周。
如何区分大肠杆菌、黑曲霉、啤酒酵母
这四种微生物分别属于原核微生物的革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌（大肠杆菌和枯草芽孢杆菌），真核微生物的单细胞酵母菌和丝状真菌（啤酒酵母和黑曲霉），从菌落形态和显微镜下的个体形态能区别开来。黑曲霉：四种比较而言，用普通的PDA培养基培养黑曲霉的菌落最大，呈圆形，菌丝蔓延迅速，初为白色，后变成鲜黄色直至黑色
肠出血性大肠杆菌的生长环境
1、肠出血性大肠杆菌产生的毒素称为志贺样毒素或类志贺毒素，这是因为它们与志贺氏痢疾杆菌产生的毒素相似。肠出血性大肠杆菌可在7℃-50℃的温度中生长，其最佳生长温度为37℃。 2、一些出血性大肠杆菌可在pH值达到4.4和最低水活度（Aw）为0.95的食物中生长。通过烹调食物，使食物的所有部分至少
噬菌体侵染大肠杆菌的实验的原理
噬菌体在侵染时，将DNA注入大肠杆菌复制，蛋白质外壳留在外面，短暂培养后，离心，使蛋白质外壳在溶液上层，大肠杆菌和未从大肠杆菌体内释放出的子代噬菌体在溶液下层。如果是32P标记的噬菌体（标记了DNA）则溶液下层放射性高，如果是35S标记的噬菌体（蛋白质），则溶液上层放射性高
大肠杆菌感受态制备与质粒转化
主要试剂1、LB培养基（灭菌后使用）胰蛋白胨（bacto-tryptone） 10g/L酵母提取液（bacto-yeast extract） 5 g/LNaCl 10g/L用NaOH调pH至7.0。2、LB固体平板每升液体培养基中加入15g琼脂粉，高压灭菌后倒入灭过菌的培养皿中。3、SOC培养基20