大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选

【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中,用某些物理因素或化学因素处理细菌,可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力,不能在基本培养基上生长,必须补充某些物质才能生长,称为营养缺陷型。实验室获得营养缺陷型菌株通过经过以下几个步骤:诱变处理、突变型筛选、缺陷型检出,缺陷型鉴定。诱变处理首先要选择诱变剂,诱变剂可分为物理和化学两类。微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。进行诱变处理时为了避免出现不纯的菌落,一般要求微生物呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液,分布均匀。试验表明处于对数生长期的细菌对诱变剂的反应最灵敏。诱变处理必须选择合适的剂量,不同微生物的最适处理剂量不同,须经预备实验确定。物理诱变的相对剂量与三个因素有关:诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)功率、处理时间,往往......阅读全文

肠出血性大肠杆菌感染的简介

  家禽家畜为本病储存宿主和主要传染源,人群普遍易感,但以老人、儿童为主。有明显季节性,7、8、9 叁个月为流行高峰。典型的表现是急性起病,腹泻,初为水样便,继之为血性便。伴痉挛性腹痛,不发热或低热,可伴恶心、呕吐及上感样症状。无合并症者,7~10 天自然痊愈。少数病人于病程1~2 周。

大肠杆菌快速检测仪哪个牌子好

“ATP荧光法细菌总数快速检测系统”简称“BL细菌快检仪”,由试剂组、微量荧光检测仪、样品预处理耗材三部件组成。它是由本公司依据萤火虫发光原理研制;经国家有关部门鉴定;关键试剂、组成部件均立足于国内;具有自主知识产权;与美、英、日同类产品性能相同,价格只及其一半的第一款国产细菌快检设备。可用于检测食

大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ-Klenow片段实验

实验方法原理 选用本方法可产生用于放射自显影的32P末端标记分子量标志物。放射自显影带的强度与片段长度无关,标记DNA可稳定数月之久。 实验材料 DNA试剂、试剂盒 dNTP仪器、耗材 水浴锅实验步骤 1.  在20 μl 反应体积中,用可产生5’突出端的限制性内切酶消化0.1~0.4 μg DNA

Cell:大肠杆菌新“益处”,助人体吸收铁

  大肠杆菌是人类肠道中最常见的可致病微生物,不过美国一项研究最新发现,大肠杆菌也有“益处”,它生产的化合物可帮助人体细胞吸收铁,未来有望用于治疗缺铁性贫血。  美国霍华德·休斯医学研究所和科罗拉多大学博尔德分校韩珉实验室研究人员在新一期美国《细胞》杂志上发表论文说,他们发现大肠杆菌生产的化合物“肠

致病性大肠杆菌性肠炎的概述

  由肠病原性大肠埃希杆菌(Enteropathogenic Escherichia coli ,EPEC)引起的肠道传染病。EPEC是早在20世纪40年代认识的一组致腹泻性大肠埃希杆菌,50年代到60年代为流行性婴幼儿腹泻的主要病原,临床上称之为“消化不良”。1983年全国腹泻经验交流座谈会决定,

肠出血性大肠杆菌的相关介绍

  肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic E. coli, EHEC)是大肠杆菌的一个亚型,以O抗原分型,EHEC可分为O157、O26、O111血清型,主要致病菌株为O157:H7,可引起感染性腹泻,因能引起人类的出血性肠炎而得名。在1982年一次出血性结肠炎流行中被分离出。

电感受态大肠杆菌TGl的制备

实验概要本实验制备了电感受态大肠杆菌TGl细胞。主要试剂1. 基本培养琼脂板[10.5g K2HPO4、4.5gKH2PO4、1g(NH4)2SO4、0.5g Na3C6H5O72H2O、15g琼脂加水至1L。高压灭菌,冷却至锥形瓶微温;接着加入lml lmol/L MgSO4、0.5ml 1%维生

新型大肠杆菌检测仪的检测原理

  新型大肠杆菌检测仪的检测原理可以完成准确的微生物大肠杆菌检测,大肠杆菌是非常普遍的一种微生物,当我们免疫力下降时,它就会成为机会致病菌,有可能引起我们肠道外的感染,比如败血症、泌尿道感染等,所以说我们有时候必须防备这种危害的发生。  大肠杆菌检测仪采用标准的方法,酶与细菌培养反应后光信号变化成正

-PNAS:将大肠杆菌转变为制药工厂

  紫杉醇是世界知名的抗癌药,已被证明从20世纪70年代起就对多种癌症具有显著疗效。它是一种来自于紫杉树树皮的天然物质,正因为如此,它的分子结构非常复杂,它的作用机制同样如此:在1977年,有研究表明,紫杉醇可以结合到细胞的微管组装中,并稳定微管,这防止收缩,并防止伴随细胞分裂减慢发生的染色体分离。

《Science》揭示大肠杆菌与癌症的神秘关联

  十多年来,科学家们一直致力于研究大肠杆菌素(一种由某些大肠杆菌菌株产生的化合物)与结直肠癌之间的联系,但由于他们无法分离出这种化合物,这种联系受到了阻碍。  所以Emily Balskus决定把注意力集中在大肠杆菌素留下的“烂摊子”上。  Balskus是化学和化学生物学教授,她和同事们是一项新

常见的食源性致病菌来源大肠杆菌

大肠杆菌生蔬菜中也会出现,常在肉类、乳品、生蔬菜、海鲜等食物中出现。大肠菌群不一定都会致病,但其家族中也有一些“危险分子”,比如导致日本“雪印”乳品倒闭的大肠杆菌0157:H7和导致德国数十人死亡的大肠杆菌0104:H4。

如何根据OD值计算大肠杆菌液浓度

测定菌液浓度常用的有以下三种方法:1、平板培养计数可以求出活菌数;将菌液稀释一定浓度,吸100ul菌液涂布于平皿,做菌落技术,然后计算确切数目!2、细胞比较大的可以用血球技术板在显微镜下直接计数;3、比浊法测定细菌的生长,需要

肠出血性大肠杆菌的治疗原则

  O157H7大肠杆菌可引起出血性肠炎、溶血性尿毒综合症和血栓性血小板减少性紫癜等。对出血性肠炎的治疗应根据腹泻病的一般治疗原则,即支持疗法和适当使用抗生素。饮食宜以流质量少为主,避免在直肠及结肠中有过多粪便。有条件时,抗生素的选择应根据药敏试验结果。江苏省疾病预防控制中心对1999年分离到的89

大肠杆菌中高产L高丝氨酸

  L-高丝氨酸是一种天然存在的非蛋白氨基酸,可作为医药中间体,具有较好的市场前景。由于生产强度和经济性等原因, L-高丝氨酸的规模化应用受到严重限制。目前国内外尚未有L-高丝氨酸的产业化生产线,L-高丝氨酸也是当前少数仍未实现工业化生产的氨基酸品种。  近日,中科院微生物研究所研究团队在《Meta

大肠杆菌质粒DNA的提取(碱裂解法)

实验材料 质粒DNA试剂、试剂盒 葡萄糖 EDTA Tris-HCl NaOH SDS 乙酸钾 乙醇 Rnase仪器、耗材 EP管 离心机

大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ-Klenow片段实验

标记DNA的3‘末端 修复突出的3’或5‘末端 随即寡核苷酸引物介导             实验方法原理 选用本方法可产生用于放射自显影的32P末端标记分子量

大肠杆菌感受态细胞的制备

实验概要大肠杆菌感受态细胞的CaCl2法制备及质粒转化。实验原理处于对数生长期的细菌经CaCl2 处理后接受外源DNA的能力显著增加。细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。 在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,

肠出血性大肠杆菌的发病机制

  动物试验研究结果表明O157H7大肠杆菌进入人体后主要侵犯小肠远端和结肠、肾脏、肺、脾脏和大脑。引起肠粘膜水肿、出血、液体蓄积、肠细胞水肿、坏死及肾脏、脾脏与大脑的病变。 O157H7大肠杆菌主要依靠它产生的志贺样毒素、溶血素和对上皮细胞的粘附力引起人体的损害。O157H7大肠杆菌能产生一种细胞

单个突变让大肠杆菌对宿主昆虫有益

一项研究发现,珀椿象与一个大肠杆菌实验菌株之间的互惠(或称共生)相互作用能通过大肠杆菌的一个单一突变进行快速改造。研究结果或有助理解有益微生物如何与它们的宿主共同生长,以及驱动这种关系的分子机制。相关研究8月4日发表于《自然—微生物学》。微生物通常与宿主是共生的关系,意味着双方都能从这种关系中受益。

大肠杆菌质粒DNA的提取(碱裂解法)

碱裂解法 实验材料 质粒DNA 试剂、试剂盒 葡萄糖 EDTA Tris-HCl N

大肠杆菌转化子有大有小原因分析

   近日,我司实验室经常接到客户这样的疑问,他们在测试大肠杆菌转化子时,大肠杆菌转化子有大有小,结果诡异,想咨询一下具体原因。    这情况我遇到过,尤其菌液PCR时候,有的强有的弱,有的带大小还不一样。我没有具体研究过啥愿意,但把大小一样的那个送去测序,一般都是正确的。    关于你的这个情况,

什么是大肠杆菌?它对人体有什么危害?

大肠杆菌(Escherichia coli),又叫大肠埃希氏菌,Escherich在1885年发现的。大肠杆菌是条件致病菌,在一定条件下可以引起人和多种动物发生胃肠道感染或尿道等多种局部组织器官感染。大肠杆菌是动物肠道中的正常寄居菌,其中很小一部分在一定条件下引起疾病 。大肠杆菌的血清型能够引起人体

关于食品中大肠杆菌检测方法的研究

  摘 要:随着人们生活水平的提高,食品安全问题受到越来越多的重视,在不断被报道的食品安全事故中,大肠杆菌是引起这些事件的主要的影响因素之一,是判断食品污染程度的一个重要参数,因此采用快速、可靠、简便的方法来准确检测食品中大肠杆菌数量是否超标是至关重要的。本文综述了大肠杆菌的传统检测方法以及最新的检

大肠杆菌致美国婴儿发生菌血症相关研究

  大肠杆菌是造成不足90天的婴儿发生菌血症的最常见原因。    在美国,将近2%的发热婴儿患有菌血症,最常见致病因是B族链球菌 (GBS)、大肠杆菌和单核细胞增生李斯特氏菌。然而,最近的一些针对某一地理区域的研究表明发热婴儿感染GBS的比例下降了而大部分都是大肠杆菌感染。为研究更多的多样化趋势

自动加氟的大肠杆菌助理药物开发

  氟(fluorine)是一种非常活泼的元素,很多含氟的化合物都是有毒的,所以这种元素基本上也是与生物学绝缘的。但是开发新药的化学家们却非常喜欢它。2012年全世界最畅销的10款药物中有3种都含有氟,这3种药物的总销售额已经超过了200亿美元。通过添加氟,化学家们能够对药物的特性进行微调,帮助这些

大肠杆菌感受态细胞的制备

实验概要制备出感受态细胞实验原理        感受态就是细菌吸收转化因子的生理状态,只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。受体细胞经过一些特殊方法(如:电击法,CaCl2等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许带有外源DNA的载体分子进入的感受态细胞。       

噬菌体侵染大肠杆菌的实验的原理

噬菌体在侵染时,将DNA注入大肠杆菌复制,蛋白质外壳留在外面,短暂培养后,离心,使蛋白质外壳在溶液上层,大肠杆菌和未从大肠杆菌体内释放出的子代噬菌体在溶液下层。如果是32P标记的噬菌体(标记了DNA)则溶液下层放射性高,如果是35S标记的噬菌体(蛋白质),则溶液上层放射性高

大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选

【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中,用某些物理因素或化学因素处理细菌,可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力,不能在基本培养基上生长,必须

大肠杆菌的流行病学特征

  区域分布  大肠杆菌的发生与流行感染是呈世界性分布的,但大肠杆菌的流行性还是存在一定的区域分布特征的。这些区域分布的特征在人的大肠杆菌感染中表现的更明显些,最大的可能是因为与区域间经济条件和社会卫生状况等有一定联系的 [1] 。  易感宿主  动物的大肠杆菌病可以发生在多种家畜、家禽、养殖经济动

如何根据OD值计算大肠杆菌液浓度

测定菌液浓度常用的有以下三种方法:1、平板培养计数可以求出活菌数;将菌液稀释一定浓度,吸100ul菌液涂布于平皿,做菌落技术,然后计算确切数目!2、细胞比较大的可以用血球技术板在显微镜下直接计数;3、比浊法测定细菌的生长,需要