大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选
【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中,用某些物理因素或化学因素处理细菌,可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力,不能在基本培养基上生长,必须补充某些物质才能生长,称为营养缺陷型。实验室获得营养缺陷型菌株通过经过以下几个步骤:诱变处理、突变型筛选、缺陷型检出,缺陷型鉴定。诱变处理首先要选择诱变剂,诱变剂可分为物理和化学两类。微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。进行诱变处理时为了避免出现不纯的菌落,一般要求微生物呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液,分布均匀。试验表明处于对数生长期的细菌对诱变剂的反应最灵敏。诱变处理必须选择合适的剂量,不同微生物的最适处理剂量不同,须经预备实验确定。物理诱变的相对剂量与三个因素有关:诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)功率、处理时间,往往......阅读全文
大肠杆菌感受态制备
[ 实验目的 ] 通过本实验掌握大肠杆菌感受态细胞的制备。 [ 实验原理 ] 细菌处于易于吸收外源 DNA 的状态叫感受态。细菌处于 0 ℃ 的 CaCl 2 低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的 DNA 形成抗 DNA 酶的羟基 - 钙磷酸复合物黏附于细胞表面,经 42 ℃ 段时间
大肠杆菌中的致病物质
1.定居因子(Colonizationfactor ,CF);也称粘附素(Adhesin),即大肠杆菌的菌毛。致病大肠杆菌须先粘附于宿主肠壁,以免被肠蠕动和肠分泌液清除。使人类致泻的定居因子为CFAⅠ、CTAⅡ(Colonization factor antigen Ⅰ、Ⅱ),定居因子具有较强的免疫
大肠杆菌显色培养基
大肠杆菌显色培养基配方(每升):蛋白胨15.0g酵母膏粉3.0g氯化钠5.0g十二烷基硫酸钠0.1g琼脂12.0g显色底物6.5g最终ph7.0±0.2
如何治疗大肠杆菌肠炎?
药物治疗:对于轻到中度的大肠杆菌肠炎,通常推荐使用抗生素进行治疗。常用的抗生素包括喹诺酮类(如诺氟沙星或氧氟沙星)和头孢类(如头孢克污)。这些药物可以帮助控制感染,减轻症状。 补液治疗:如果患者出现严重脱水症状,如频繁腹泻、口渴、少尿等,需要及时补充液体和电解质。可以通过口服补液盐溶液或在严重
生吃生菜-小心大肠杆菌中毒
过去7周,美国和加拿大共发生至少50起大肠杆菌中毒事件,其中有两人死亡。 美国疾病预防与控制中心初步确定,生菜中的大肠杆菌是导致中毒的主要原因。加拿大公共卫生署建议多个省市的居民不要吃生菜,以免发生类似事件。 美国食品安全研究中心主任詹姆斯·罗格斯表示,虽然不能100%断定生菜是导致这次大肠
大肠杆菌重组蛋白复性
实验概要 Invitrogen 公司的蛋白复性试剂盒(Protein Refording Kit)能够在弱酸性条件下溶解大肠杆菌中的包涵体重组蛋白,并在中性的环境中对溶解的蛋白透析两次:第一次利用加入还原剂的透析液促使蛋白二硫键的正确形成,第二次除去多余的还原剂实验步骤 1.
大肠杆菌质粒DNA的提取
一、大肠杆菌质粒DNA的提取质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法:碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。2、3
大肠杆菌生物学性状
(一)形态与染色大小0.4~0.7×1~3um,无芽胞,大多数菌株有动力。有普通菌毛与性菌毛,有些菌株有多糖类包膜,革兰氏阴性杆菌。(二)培养特性在血琼脂平板上,有些菌株产生β型溶血。在鉴别性或选择性培养基上形成有颜色、直径2~3mm的光滑型菌落。生化反应:大部分菌株发酵乳糖产酸产气,并发酵葡萄糖、
大肠杆菌的致病作用特性
对人和多种动物来讲,由于病原大肠杆菌常常倾向具有一定的宿主特异性,对人有致病作用的菌株常常是很少引起动物的感染,反之亦然,据此可将病原大肠杆菌大致上将其划分为两种 :即人病原大肠杆菌和动物病原大肠杆菌。动物的致泻性大肠杆菌已被明确的特征主要是类似于ETEC的菌株。UPEC是一群能够引起人的尿道感
小儿大肠杆菌肠炎的概述
小儿大肠杆菌肠炎:多发生在气温较高的季节,以5-8月份为多,可在新生儿室、托儿所甚至病房内流行。营养不良儿、人工喂养儿或更换饮食是更易发病。潜伏期为1~2天,起病较急。临床表现类似霍乱,一般不发热或发低热,腹泻多为水样便,量多,有腥臭味,在显微镜下检查无白细胞和红细胞,常有中、重度等渗或低渗性脱
大肠杆菌微菌落照片
大肠杆菌微菌落照片James Shapiro and Clara Hsu, Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Chicago, Chicago, Ill., USAEscherichia coli micr
小儿大肠杆菌肠炎的病因
细菌感染(20%): 细菌性肠炎的致病菌以痢疾杆菌最常见,其次为空肠弯曲菌和沙门氏菌。 病毒感染(20%): 在病毒性胃肠炎中,轮状病毒是婴幼儿腹泻的主要病因,而诺瓦克病毒是成人和大龄儿童流行性病毒性胃肠炎的主要病因。 寄生虫感染(15%): 寄生虫引起的肠炎以溶组织内阿米巴较为常见。
小儿大肠杆菌肠炎的检查
内窥镜检查 临床上多数病变在直肠和乙状结肠,采用乙状结肠镜检查很有价值,对于慢性或疑为全结肠患者,宜行纤维结肠镜检查。 放射学钡剂检查 急性期一般不宜作钡剂检查。而特别注意的是重度溃疡性结肠炎在作钡灌肠时,有诱发肠扩张与穿孔的可能性。
关于大肠杆菌菌株的简介
大肠杆菌(Escherichia coli)大肠埃希氏菌,它是一种普通的原核生物,根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为6类:肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)和弥散粘附性大肠杆菌
大肠杆菌生长曲线有波动
很正常的,因为微生物会经过四个时期,对数期过后就会到衰退期了,这个时候如果你想要让他的数量一直升高,那就可以增加培养基,
大肠杆菌肠炎的预防方法
个人卫生:保持良好的个人卫生习惯是预防大肠杆菌感染的关键。这包括勤洗手、特别是在准备食物、进餐前、上厕所后要彻底洗手。 食品安全:确保食物安全是预防大肠杆菌感染的重要措施。这包括: 避免食用未煮熟的肉类、禽类和鱼类。 避免食用未经巴氏消毒的乳制品。 避免食用可能受到污染的水果和蔬菜,如未
大肠杆菌的理化特性简介
大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状 ;大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状;大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢;多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异
水质大肠杆菌检测的意义
水质大肠杆菌在线监测仪作为检测水中大肠杆菌含量的仪器,在污水检测当中占着很重要的位置,且水质大肠杆菌在线监测仪的自我要求也很多水质监测仪器要高很多。生活饮用水、医院排放的污水等场所都会有大肠杆菌超标的情况存在,为了让我们用到健康的水源,为了不破坏到生态环境,所以水质大肠杆菌在线监测仪是值得拥有的
大肠杆菌的生化特性简介
大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性,吲哚产生和乳糖发酵是阳性(个别菌株表现阴性),维-培试验是阴性,尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性(极个别菌株表现阳
小儿大肠杆菌肠炎的诊断
其病理表现为胃肠道粘膜的充血、水肿、粘液分泌增多,有时伴有出血及糜烂。在我国以夏、秋两季发病率较高,无性别差异,一般潜伏期为12―36小时。恶心、呕吐、腹泻是急性胃肠炎的主要症状。
大肠杆菌的生长曲线测定
实验方法原理 将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定期及衰亡期四个时期,各时期的长短同菌种本身特征、培养基成分和培养条件
大肠杆菌的检验方法
以SN标准方法为例,进行说明。样品制备:以无菌操作取25 g样品,放入装有225 mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000 r/min均质1~2min,制成1:10样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替)。稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计,用稀释剂将样品匀液制成一系列十倍递增的样品稀释液,如10**
关于大肠杆菌的各类介绍
按致病作用 目前国际公认的分类,主要有六个种类的大肠杆菌,即能够致使胃肠道感染的肠道致病性的大肠杆菌(EPEC)、肠道产毒素性的大肠杆菌 (ETEC)、肠道侵袭性的大肠杆菌(EIEC)、肠道出血性的大肠杆菌 (EHEC)、肠集聚性的大肠杆菌(EAEC) 以及近年来发现的肠产志贺样毒素同时具有一
大肠杆菌杂交及基因定位
一、原理 大肠杆菌染色体呈环状。高频重组菌株(Hfr)的染色体上整合有F因子,当Hfr细菌与F-细菌细胞发生接合(即杂交)时Hfr细胞(供体菌)的染色体从Hfr细胞向F-细胞内转移。由于染色体的转移具有一定的方向性,并且可以随时中断,因此根据结合后F-细菌(以重组子形式选出)中
大肠杆菌的检测试剂
对于总大肠杆菌以及更为重要的埃希氏大肠菌(E.coli)的检测,十分需要一种简单可靠的方法,能够快速有效地进行检测。 Colitag是一种预制式的干性混合试剂,含有盐分、氮源、碳源以及用于检测总大肠杆菌、埃希氏大肠菌(E.coli)所用的指示剂以及营养底物医学教育|网搜集整理。阳性的检测结果可
大肠杆菌的特点解析
1.大肠杆菌是细菌bai,属于原核生du物;具有由肽聚糖组成的细胞壁,只含zhi有核糖体简单的细胞器dao,没有细胞核有拟核;细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。 2.大肠杆菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。 3.人体与大肠杆菌的关系:在不致病的情况下(正常状况下),可认为是互利共生
关于大肠杆菌的分类介绍
1、按致病作用 目前国际公认的分类,主要有六个种类的大肠杆菌,即能够致使胃肠道感染的肠道致病性的大肠杆菌(EPEC)、肠道产毒素性的大肠杆菌(ETEC)、肠道侵袭性的大肠杆菌(EIEC)、肠道出血性的大肠杆菌(EHEC)、肠集聚性的大肠杆菌(EAEC)以及近年来发现的肠产志贺样毒素同时具有一定
大肠杆菌的电击转化实验
实验方法原理 转化(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。也是细菌间遗传物质转移的多种形式中最早发现的一种,它不同于通过噬菌体
大肠杆菌的电击转化实验
实验方法原理 与制备用化学方法进行转化的感受态细胞相比,制备电转化的感受态细胞要容易得多。细菌简单地生长至对数中期、冷却、离心,用冰冷的水或缓冲液充分洗净以降低细胞悬液的离子强度,而后再用含 10% 甘油的冰冷缓冲液悬浮。实验材料 质粒 DNA试剂、试剂盒 甘油纯水SOC 培养液仪器、耗材 CYTL
大肠杆菌生长曲线测定实验
一定量的微生物,接种在适合的新鲜液体培养基中,在适宜的温度下培养,以菌数的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,做出的曲线叫生长曲线。一般可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。不同的微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。实验方法原理测定微生物生长曲线的方法很多