大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选
【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中，用某些物理因素或化学因素处理细菌，可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力，不能在基本培养基上生长，必须补充某些物质才能生长，称为营养缺陷型。实验室获得营养缺陷型菌株通过经过以下几个步骤：诱变处理、突变型筛选、缺陷型检出，缺陷型鉴定。诱变处理首先要选择诱变剂，诱变剂可分为物理和化学两类。微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。进行诱变处理时为了避免出现不纯的菌落，一般要求微生物呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液，分布均匀。试验表明处于对数生长期的细菌对诱变剂的反应最灵敏。诱变处理必须选择合适的剂量，不同微生物的最适处理剂量不同，须经预备实验确定。物理诱变的相对剂量与三个因素有关：诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)功率、处理时间，往往......阅读全文
关于大肠杆菌的分类介绍
1、按致病作用 目前国际公认的分类，主要有六个种类的大肠杆菌，即能够致使胃肠道感染的肠道致病性的大肠杆菌（EPEC）、肠道产毒素性的大肠杆菌（ETEC）、肠道侵袭性的大肠杆菌（EIEC）、肠道出血性的大肠杆菌（EHEC）、肠集聚性的大肠杆菌（EAEC）以及近年来发现的肠产志贺样毒素同时具有一定
大肠杆菌的电击转化实验
大肠杆菌的电击转化实验可以用于：更为简便快捷地进行转化。实验方法原理转化（transformation）是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。也是细菌间遗传物质转移的多种形式中最早发现的一种，它不同于通过噬菌体感染
中德合作锁定大肠杆菌疫情元凶
这张来自德国餐馆的照片帮助科学家确定了最终的罪魁祸首。 5月中旬，一场突如其来的疫情袭击德国。5月22日，德国首次通告世界卫生组织，本国感染肠出血性大肠杆菌的患者人数激增;5月25日，来自德国汉堡-埃普多夫大学医学中心临床部的装有纯化病菌DNA的小试管被运抵中国深圳华大基因
大肠杆菌的生长周期是多少
一般大肠杆菌每20分钟繁殖一代，这就意味着，它的生活周期才20分钟。培养周期得看的目的，种子一般过夜培养，发酵过程应该以菌种消亡时刻为终点，或者以产量最高时刻为放罐时刻。大肠杆菌的血清型能够引起人体或动物胃肠道感染，主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的，除胃肠道感染以外，还会引起尿道感染、
大肠杆菌转化实验——热击法
大肠杆菌转化可以：（1）将重组DNA分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制，增殖和表达，以获得目的基因；（2）验证大肠杆菌感受态细胞效果；（3）用于分子生物学其他研究。实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面，经过42摄氏度短时间的热击处理，促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代，待质粒
大肠杆菌的生长曲线测定实验
细菌的生长曲线测定实验对于（1）细胞生长过程监控（2）细胞生长时态的观察等都有重要意义实验方法原理将一定数量的细菌，接种于适宜的液体培养基中，在适温下培养，定时取样测数，以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓
出血性大肠杆菌及检验
一、概况 肠出血性大肠杆菌（EHEC）是能引起人的出血性腹泻和肠炎的一群大肠埃希氏菌。以O157:H7血清型为代表菌株。 肠出血性大肠杆菌感染可引起轻度腹泻、出血性结肠炎（HC）、溶血性尿毒综合症（HUS），血栓性血小板减少性紫癜（TTP）等。其中HUS病程凶险，易造成急性肾衰竭乃至死亡。
新技术可快速检测大肠杆菌
华威大学生命科学学院的研究人员发现了一种新技术，可以在几分钟内检测细菌的存在。在这项研究中，华威大学的科学家发现健康细菌和受到抗生素或紫外线杀伤的细菌表现出完全不同的电反应。这些发现发表在《PNAS》杂志上。 目前测试临床样品或商业产品中的细菌污染情况通常需要数天的时间。在此期间，如果不能通过
质粒DNA高频转化大肠杆菌实验
实验材料 感受态细胞试剂、试剂盒 质粒DNA抗生素仪器、耗材 Ep管水浴锅LB平板实验步骤 1、取新制备的一管感受态细胞。 2、取0．03 ml感受态细胞转和4 ng质粒DNA混匀，置冰浴30min 3、将 Ep管置于42 ℃水浴中热冲击2分钟，立即置于冰上1分钟。 4、在 Ep管中加70 ul L
大肠杆菌杂交及基因定位实验
一、原理大肠杆菌染色体呈环状。高频重组菌株（Hfr）的染色体上整合有F因子，当Hfr细菌与F－细菌细胞发生接合（即杂交）时Hfr细胞（供体菌）的染色体从Hfr细胞向F－细胞内转移。由于染色体的转移具有一定的方向性，并且可以随时中断，因此根据结合后F－细菌（以重组子形式选出）中Hfr细菌染色体基因出现
外源质粒DNA转化大肠杆菌
摘要： 转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程细菌中的过程,是基因工程等研究领域的基本实验技术之一. 外源质粒 DNA 转化 大肠杆菌 1 实验简介 转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程
大肠杆菌检测的新方法
1 气相色谱（GC）和高效液相色谱法（HPLC）气相色谱法主要是将大肠杆菌经过一系列衍生化的前处理后，为接下来的分析研究提供尽可能多的化学组分。大肠杆菌的污染程度可以用顶空气相色谱法来分析，其原理是利用食品密封系统顶部的微生物代谢产物CO2对微生物进行分析。这种方法对食品质量安全检测有重大意义。与上
人造大肠杆菌可实现病毒抵抗
大肠杆菌作为一种重要的模式工业微生物，在医药、化工、农业等方面具有广泛的应用。近30年来，多种代谢工程改造的新策略和新技术，被用于设计、构建和优化大肠杆菌细胞工厂，极大地提高了生物法合成化学品的生产速率和产量。 不过，此前对于大肠杆菌的利用，仅局限在自然界中存在的物质上，无法满足人们对于化工生
关于大肠杆菌表达系统的介绍
在各种表达系统中，最早被采用进行研究的是大肠杆菌表达系统，也是掌握最为成熟的表达系统，大肠杆菌表达系统以其细胞繁殖快速产量高、IPTG诱导表达相对简便等优点成为生产重组蛋白的最常用的系统。 对于表达不同的蛋白，需要采用不同的载体。已知的大肠杆菌的表达载体可分为非融合型表达载体和融合型表达载体两
肠杆菌和大肠杆菌的区别
这是分类学上的差异。肠杆菌，是一个“科”；大肠杆菌，是“肠杆菌科”下的一个“种”。————————————中文名称： 大肠杆菌外文名称： 学名:Escherichia coli (T. Escherich 1885)界： 细菌界门： 变形菌门(Bacteria)纲： γ-变形菌纲(Proteobac
突变让大肠杆菌与宿主互惠
本报讯 《自然—微生物学》8月4日发表的一篇论文指出，珀椿象与一个大肠杆菌实验菌株之间的互惠（或共生）作用能通过大肠杆菌的一个单一突变进行快速改造。研究结果或帮助科学家理解有益微生物如何与它们的宿主共同生长，以及驱动这种关系的分子机制。微生物通常与宿主是共生的关系，这意味着双方都能从这种关系中受益。
小儿大肠杆菌肠炎的症状体征
产毒性大肠杆菌肠炎 潜伏期为1～2天，起病较急。临床表现类似霍乱，一般不发热或发低热，腹泻多为水样便，量多，有腥臭味，在显微镜下检查无白细胞和红细胞，常有中、重度等渗或低渗性脱水。为自限性疾病，病程4～7天。 侵袭性大肠杆菌肠炎 潜伏期18-24小时，起病急，腹泻频繁，大便呈粘冻状，带脓血
小儿大肠杆菌肠炎的鉴别诊断
慢性肠炎泛指肠道的慢性炎症性疾病，其病因可为细菌、霉菌、病毒、原虫等微生物感染，亦可为过敏、变态反应等原因所致。临床表现为长期慢性、或反复发作的腹痛、腹泻及消化不良等症，重者可有粘液便或水样便。
大肠杆菌的生长周期是多少
一般大肠杆菌每20分钟繁殖一代，这就意味着，它的生活周期才20分钟。培养周期得看的目的，种子一般过夜培养，发酵过程应该以菌种消亡时刻为终点，或者以产量最高时刻为放罐时刻。大肠杆菌的血清型能够引起人体或动物胃肠道感染，主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的，除胃肠道感染以外，还会引起尿道感染、
关于大肠杆菌的滤膜法简介
该方法主要过程：加入 10 mL 左右的无菌水于滤器中，然后掺入一些无菌水进行清洁滤器的内壁，再进行过滤，将滤膜放在 M-FC 培养基中，两者之间不能够有气泡，然后进行密封，存放温度为 44.5℃，存放时间约 24 h，直到大肠杆菌的菌群变成蓝色或蓝绿色。然后记录数据，估算每一单位的水溶液菌群数
大肠杆菌检测的新方法
1 气相色谱（GC）和高效液相色谱法（HPLC） 气相色谱法主要是将大肠杆菌经过一系列衍生化的前处理后，为接下来的分析研究提供尽可能多的化学组分。大肠杆菌的污染程度可以用顶空气相色谱法来分析，其原理是利用食品密封系统顶部的微生物代谢产物CO2对微生物进行分析。这种方法对食品质量安全检测有重
大肠杆菌的检测方法－滤膜法
滤膜法是目前最为流行的检测水中大肠杆菌群的方法。滤膜法的具体步骤是首先将一定量的水体样本注入 0.45μm的滤膜过滤，经过抽滤，水中的细菌则被留在滤膜上，将滤膜贴于品红亚硫酸钠培养基上培养 24h，温度为恒温 37℃，这使得菌群因发酵乳糖而使得滤膜，出现紫红色，通过计算滤膜上的菌落进而计算出单位
肠出血性大肠杆菌(EHEC)
肠出血性大肠杆菌（EHEC）大肠杆菌（E.coli）是一种在人和温血动物肠道内常见的细菌。大多数大肠杆菌菌株无害。然而，一些菌株，例如肠出血性大肠杆菌（EHEC）可引起严重的食源性疾病。它主要通过食用被污染的食物传染给人类，这些食物如生的或烹调不彻底的绞碎肉制品和原料奶。它作为一个公共卫生问题的重要
侵入性大肠杆菌如何引起疾病？
侵入宿主细胞：EIEC具有侵入宿主细胞的能力，能够穿透肠道上皮细胞，进入宿主体内。这种侵入性是EIEC引起疾病的关键因素。 产生毒素：虽然EIEC不产生与食物中毒相关的毒素，但它能够产生类似志贺氏菌毒素（Shiga toxin）的毒素，这种毒素对宿主细胞具有毒性作用，导致细胞损伤和炎症反应。
大肠杆菌的呼吸酶和底物
大肠杆菌的呼吸酶和底物呼吸酶氧化还原对中点电位（伏）甲酸脱氢酶碳酸氢盐/甲酸盐−0.43氢化酶质子/氢−0.42NADH脱氢酶NAD/NADH−0.32甘油-3-磷酸脱氢酶DHAP/Gly-3-P−0.19丙酮酸氧化酶醋酸盐+二氧化碳/丙酮酸盐?乳酸脱氢酶丙酮酸盐/乳酸盐−0.19D-氨基酸脱氢酶2
关于大肠杆菌感染－的病原介绍
大肠杆菌 为革兰阴性短杆菌，因可分解乳糖而产酸，菌落在SS、中国蓝及伊红美蓝平板上分别呈红色、蓝色及紫黑色，借此可与沙门菌及志贺菌相鉴别，但应注意少数菌株分解乳糖缓慢。本菌属能分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇，产酸、产气，不分解蔗糖。靛基质 (吲哚)、甲基红、VP及枸椽酸盐（IMVC）试验分别呈
致病性大肠杆菌的种类
埃希菌属杆菌为肠道正常菌群之重要成分，大肠杆菌为主要代表菌种。大多数大肠杆菌为条件致病菌，能产生和携带肠毒素（LT、ST、SLT）、定居因子（CFA-ⅠCFA-Ⅱ）、K抗原或类似物质以及带有性菌毛和分泌内毒素者，为致病性大肠杆菌，主要有： （1）肠产毒性大肠杆菌（ETEC） ETEC是5岁以上婴
小儿大肠杆菌肠炎的病理病因
细菌感染（20%）： 细菌性肠炎的致病菌以痢疾杆菌最常见，其次为空肠弯曲菌和沙门氏菌。 病毒感染（20%）： 在病毒性胃肠炎中，轮状病毒是婴幼儿腹泻的主要病因，而诺瓦克病毒是成人和大龄儿童流行性病毒性胃肠炎的主要病因。 寄生虫感染（15%）： 寄生虫引起的肠炎以溶组织内阿米巴较为常见。
小儿大肠杆菌肠炎的症状体征
产毒性大肠杆菌肠炎 潜伏期为1～2天，起病较急。临床表现类似霍乱，一般不发热或发低热，腹泻多为水样便，量多，有腥臭味，在显微镜下检查无白细胞和红细胞，常有中、重度等渗或低渗性脱水。为自限性疾病，病程4～7天。 侵袭性大肠杆菌肠炎 潜伏期18-24小时，起病急，腹泻频繁，大便呈粘冻状，带脓血
小儿大肠杆菌肠炎的检查介绍
内窥镜检查 临床上多数病变在直肠和乙状结肠，采用乙状结肠镜检查很有价值，对于慢性或疑为全结肠患者，宜行纤维结肠镜检查。 放射学钡剂检查 急性期一般不宜作钡剂检查。而特别注意的是重度溃疡性结肠炎在作钡灌肠时，有诱发肠扩张与穿孔的可能性。