决明子蛋白质提取工艺研究及其体外消化率的测定
摘要: 目的: 优选决明子蛋白质的最佳提取工艺及体外消化率测定。方法: 采用正交试验法, 以凯氏定氮法测得决明子蛋白质的含量和得率为考察指标, 对提取过程中缓冲液浓度、pH 值、固液比及提取时间4 个工艺因素进行优化研究, 并用胃蛋白酶- 胰蛋白酶法测定体外消化率。结果: 决明子蛋白质最佳提取工艺为KH2PO4- NaOH 缓冲液浓度为50 mmol/L, pH 值为8.0, 液固液比为1∶50, 提取12h。影响决明子蛋白提取各因素的主次关系为: 缓冲液浓度>pH 值>固液比>提取时间, 其中缓冲液浓度和pH 值的影响达显著性水平。优化参数下提取的决明子粗蛋白含量为93.0%, 提取率为94.2%, 体外消化率为97.6%。结论: 决明子是含蛋白质较高的植物种子, 其蛋白质消化率较高, 具有很好的开发前景。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
木本植物蛋白质提取实验
实验材料 树皮试剂、试剂盒 沉淀缓冲液漂洗缓冲液溶解缓冲液仪器、耗材 离心管实验步骤 3.1 提取总蛋白质 (见注释 5)( 1 ) 将去塞的 10 ml 空离心管称重。我们选用韧性好的聚碳酸酯旋盖圆底高速离心管。( 2 ) 细胞碎裂:500 mg 新鲜组织(保存在 -80°C ) 在液氮中用研钵和
木本植物蛋白质提取实验
实验材料树皮试剂、试剂盒沉淀缓冲液漂洗缓冲液溶解缓冲液仪器、耗材离心管实验步骤3.1 提取总蛋白质 (见注释 5)( 1 ) 将去塞的 10 ml 空离心管称重。我们选用韧性好的聚碳酸酯旋盖圆底高速离心管。( 2 ) 细胞碎裂:500 mg 新鲜组织(保存在 -80°C ) 在液氮中用研钵和杵捣成粉
蛋白质的提取及粗分离实验
硫酸铵盐析法 实验方法原理 分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行精细分离,得到目的蛋白。本实验以新型基因
牛乳中蛋白质的提取与鉴定
一、目的学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。二、原理牛乳和羊乳中含丰富的蛋白质,其中主要是酪蛋白。酪蛋白在羊乳罩中约占总蛋白量3/4,牛乳中约占总蛋白量的5/6。酪蛋白是一种含磷蛋白的不均一混合物。蛋白质在其等电点pH 溶液中溶解度降底。根据这个原理,将牛乳的PH调整至4.8,即酪蛋白的等电点时,酪
蛋白质的提取及粗分离实验
分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行精细分离,得到目的蛋白。本实验以新型基因重组人TNF为例阐明重组蛋白TNF的提取及初步分离。实验方法硫酸铵盐析法实验方法原理分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行
动物细胞蛋白质的提取方法
1、将高压的 PBS洗涤细胞瓶两次,弃PBS,倒置纸巾上吸干。2、加入2 ml裂解液10×permeabilization buffer 2 ml。3、放入冰箱里裂解,平放,拧紧盖子,置摇床半小时,200 转/min。4、收集裂解液至 1.5 ml EP管,分两管,12000 rpm,4 ℃离心,5
蛋白质与多肽提取分离方法1
1 分离方法采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析
牛乳中蛋白质的提取与鉴定
一、目的学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。二、原理牛乳和羊乳中含丰富的蛋白质,其中主要是酪蛋白。酪蛋白在羊乳罩中约占总蛋白量3/4,牛乳中约占总蛋白量的5/6。酪蛋白是一种含磷蛋白的不均一混合物。蛋白质在其等电点pH 溶液中溶解度降底。根据这个原理,将牛乳的PH调整至4.8,即酪蛋白的等电点时,酪
蛋白质与多肽提取分离方法2
1.1.7 灌注层析(Perfusion Chromatography,PC)PC是一种基于分子筛原理与高速流动的流动相的层析分离方法,固定相孔径大小及流动相速度直接影响分离效果。试验证明其在生产、制备过程中具有低投入、高产出的特性。目前市场上可供应的PC固定相种类较多,适合于不同分子量的多肽分离
细胞膜蛋白质提取方法
NRC Institute for Biological SciencesTriton X-114 extraction protocol (Hydrophobic protein preparation)Ressuspend cells in Solution A (dil 1/8) and ad
蛋白质与多肽提取分离方法3
1.3.4胶束电动毛细管层析(Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC)MECC的原理是在电泳液中加入表面活性剂,如SDS,使一些中性分子带相同电荷分子得以分离。特别对一些小分子肽,阴离子、阳离子表面活性剂的应用都可使之
蛋白质提取纯化的方法有哪些?
蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。图片来源于网络 根据蛋白质溶解度不同,蛋白质的分离纯化可分为盐析法和等电点沉淀法。盐析一般是指溶液中加入无机盐类而
关于乳清蛋白的工业来源
乳清蛋白是采用先进工艺从牛奶分离提取出来的珍贵蛋白质,以其纯度高、吸收率高、氨基酸组成最合理等诸多优势被推为“蛋白之王”。 乳清蛋白不但容易消化,而且还具有高生物价、高消化率、高蛋白质功效比和高利用率,是蛋白质中的精品等特点,是公认的人体优质蛋白质补充剂之一。牛奶的组成中87%是水,13%是乳固
小叶野决明的药理作用
抗菌作用 决明子醇提物对葡萄球菌、白喉杆菌、伤寒、副伤寒、大肠杆菌均有抑制作用,而水提物则无效。 抗真菌作用 决明子水浸剂(1:4)在试管中对石膏样毛癣菌、许兰黄癣菌、奥杜盎小 芽胞癣菌等皮肤真菌有不同程度抑制作用。决明子含大黄酚-9-蒽酮,体外对红色毛癣菌、须毛癣菌、犬小孢子菌、石膏样小
关于决明子国家药品标准修订草案的公示
国家药典委员会拟修订决明子国家药品标准,为确保标准的科学性、合理性和适用性,现将拟修订的决明子国家药品标准公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期为三个月。请相关单位认真研核,若有异议,请及时来函提交反馈意见,并附相关说明、实验数据和联系方式。来函需加盖公章,收文单位为“国家药典委员会办公室”,
细胞膜蛋白质提取方法蛋白质沉淀法
1.热变性及酸碱变性沉淀法 用于选择性的除去某些不耐热及在一定PH值下易变性的杂蛋白。 2.有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。3.等电点沉淀法 用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少,多与其它方法结合使用。4.非离子多聚体沉淀法
利用粗纤维测定仪控制饲料中的纤维含量
一直以来,粗纤维都被视为是不能被动物自身所分泌的消化酶消化的饲粮组成成分,因此一般认为它对动物的活动是有害的,然而近年来,人们开始使用粗纤维测定仪来开发利用饲料中的纤维含量,从而科学调配饲料产品,这也说明,纤维对于动物的生长发育并不是没有任何作用。 一方面,饲粮中粗纤维含量
克隆化基因体外合成蛋白质分析DNA蛋白质相互作用实验
体外合成的蛋白质对于测定一个克隆的基因是否编码一个特异的DNA结合蛋白, 以及分析DNA-蛋白质相互作用都是极为有用的。为了检测DNA的结合能力,可将标 记的蛋白质与特异的DNA片段共温育,用非变性丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质-DNA复 合物与游离的蛋白质分离开来。来源:《精编分子生物学实验指南》第五版
用克隆化基因在体外合成的蛋白质分析DNA蛋白质相互...
用克隆化基因在体外合成的蛋白质分析DNA-蛋白质相互作用实验实验方法原理 实验材料 含有所需结合位点的质粒DNA试剂、试剂盒 35S标记的蛋白5×结合缓冲液10 mg mL poly (dl-dC) • poly (dl-dC)或其他的大分子载体 DNA加样缓冲液45%甲醇 10%乙酸EN3HANC
玉米中的什么酸不能被人体所利用
系统评价了我国一种新型玉米品种——高油玉米。论文研究从高油玉米组织结构与化学成分,高油玉米在猪中营养价值和高油玉米在家禽中的营养价值三个方面着手,综合评价了高油玉米在猪和家禽中的氨基酸消化率,能量消化率,消化能,代谢能,高油玉米对胴体脂肪酸沉积影响及对畜禽生产性能的作用。此外还比较研究使用不同方法测
玉米中的什么酸不能被人体所利用
系统评价了我国一种新型玉米品种——高油玉米。论文研究从高油玉米组织结构与化学成分,高油玉米在猪中营养价值和高油玉米在家禽中的营养价值三个方面着手,综合评价了高油玉米在猪和家禽中的氨基酸消化率,能量消化率,消化能,代谢能,高油玉米对胴体脂肪酸沉积影响及对畜禽生产性能的作用。此外还比较研究使用不同方法测
根分生细胞核蛋白质提取实验
实验材料细胞核试剂、试剂盒Ficoll硫酸葡萄聚糖Tris-HClEDTA正辛醇仪器、耗材阿拉伯树胶高速分散搅拌器实验步骤3.1 植物材料( 1 ) 洋葱鳞茎,除去棕色干枯的外皮,用自来水清洗,将每一个正立放在加有大约 90 ml 过滤水的圆桶状玻璃容器中,这样只有底部浸没在水中(见注释 3)。水必
蛋白质提取与制备(Protein-Extraction-and-Preparation)2
三、蛋白质提取与制备具体操作方法1、原料的选择早年为了研究的方便,尽量寻找含某种蛋白质丰富的器官从中提取蛋白质。但至目前经常遇到的多是含量低的器官或组织且量也很小,如下丘脑、松果体、细胞膜或内膜等原材料,因而对提取要求更复杂一些。原料的选择主要依据实验目的定。从工业生产角度考虑,注意选含量高、来源丰
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质4
注意事项:1. DNA在中间层和有机相中时可在2~8℃保存过夜。2.DNA沉淀在75%乙醇中2~8℃可保存几个月。3.DNA在8mM NaOH溶液中4℃可放置过夜,如长期保存需用HEPES调节pH至7~8并且加EDTA至1mM,可置于4℃或-20℃长期保存。常见问题分析:得率低:A.样品匀浆和裂解的
蛋白质提取与制备(Protein-Extraction-and-Preparation)5
确定沉淀蛋白质所需硫酸铵浓度的方法将少量样品冷却到0~5℃,然后搅拌加入固体硫酸铵粉末,见蛋白质产生沉淀时,离心除去沉淀,分析上清液确定所要蛋白质的浓度,如它仍在溶液中则弃去沉淀,再加更多的硫酸铵于上清液中,直到产生蛋白质沉淀时止。以所要提取的蛋白质在溶液中的浓度对硫酸铵浓度作图,得沉淀曲线,找出蛋
蛋白质提取与制备(Protein-Extraction-and-Preparation)6
PH 值:与沉淀蛋白质或酶原理相同,结晶的溶液PH 值一般选择在被结晶的蛋白质或酶的等电点附近,以利于晶体的析出。温度:除少数情况外,通常选择低温条件进行。低温条件对蛋白质和酶不仅溶解度低且不易变性。在中性盐溶液中结晶时,温度可在0℃至室温范围内选择,在有机溶剂中结晶一般要求温度较低。晶种:不易结晶
蛋白质提取与制备(Protein-Extraction-and-Preparation)1
蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的,大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中,少数与脂类结合的蛋白质溶于乙醇、
细菌中蛋白质的提取与纯化技术
实验试剂 采用T7• Tag Affinity Purification KitT7•Tag抗体琼脂。B/W缓冲液:4.29mM Na2HPO4,1.47 mM KH2PO4,2.7 mM KCl, 0.137mM NaCl,1%吐温-20,pH7.3 洗脱缓冲液: 0.1M柠檬酸,pH2.2. 中
根分生细胞核蛋白质提取实验
实验材料 细胞核试剂、试剂盒 Ficoll硫酸葡萄聚糖Tris-HClEDTA正辛醇仪器、耗材 阿拉伯树胶高速分散搅拌器实验步骤 3.1 植物材料( 1 ) 洋葱鳞茎,除去棕色干枯的外皮,用自来水清洗,将每一个正立放在加有大约 90 ml 过滤水的圆桶状玻璃容器中,这样只有底部浸没在水中(见注释 3
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质3
DNA污染:A. 样品匀浆时加的试剂量太少。B.样品中含有有机溶剂(如乙醇,DMSO等),强缓冲液或碱性溶液。蛋白聚糖和多糖污染:沉淀RNA的过程中作以下改进可去除这些污染,步骤7中,每使用1ml TRIzol在水相中加0.25ml异丙醇和0.25ml高盐溶液(0.8M柠檬酸钠和1.2MNaCl)混