一种用于检测和定量分析细胞代谢物的HILICLCMS方法

引言 复杂生物样品通常包含大量可反映有机体代谢状态的内源性代谢物。特别是骨骼肌可根据其是快收缩肌(白色肌肉,糖酵解型)还是慢收缩肌(红色肌肉,氧化型)而表现出特征性的代谢组“指纹图谱”。例如,红色肌肉应显示一种富含线粒体代谢物(如三羧酸循环)的代谢组指纹图谱;而白色肌肉应显示富含糖酵解代谢物的代谢组指纹图谱,其线粒体代谢物的浓度大大低于红色肌肉。虽然很多这类代谢物可具有较强的极性,但这些样本通常使用反相液相色谱-质谱(RP-LC-MS)进行分析,由此而来的多是较差的保留。在本研究中,我们开发了一种用于检测和定量强极性细胞代谢物的新颖LC-MS方法。本研究采用了基于亚2微米颗粒BEH酰胺柱的亲水作用液相色谱(HILIC),并联用了杂化四极杆飞行时间质谱仪和三重四极杆质谱。 方法 这些试验借助联用了沃特世SynaptTM HDMSTM、沃特世Synapt G2 HDMS和Xevo TQ的一台UPLC系统而进行: ......阅读全文

用于检测和定量分析极性细胞代谢物的一种新颖...(二)

质谱分析 Synapt HDMS和Synapt G2 HDMS该质谱仪在正离子MSE模式下运行。所用的毛细管电压为3.0kV,源温度和去溶剂化温度分别被设定为120℃和400℃。 在MSE采集模式下,仪器交替在低、高碰撞能量状态下进行交替扫描。这样可在一次分析内同时收集所有分析物的母离子和碎片离子的

用于检测和定量分析极性细胞代谢物的一种新颖...(三)

2. 使用UPLC/Xevo-TQ联用仪器对HILIC LC-MS方法开发标准品和细胞萃取物进行定量分析 在UPLC优化过程中进行的标准品分析表明使用酸性pH的流动相缓冲液可提高对氨基酸和有机酸的分辨率、信噪比和峰对称性。图3比较了对一种包含约2µg/mL L-赖氨酸的纯氨基酸溶液所得出的两

用于检测和定量分析极性细胞代谢物的一种新颖...(四)

 图6. 使用碱性(左表)和酸性(右表)流动相在H-S和H-G组织样本中所检出化合物的浓度计算结果总合 对在碱性和酸性流动相分离中所检出的H-S和H-G组织样本中的每种化合物均计算了分析物浓度。通过比较红色比目鱼肌(S)和腓肠肌(G)组织样本中的代谢物浓度证实了在其相对浓度方面存在显著差异。 3.

用于检测和定量分析极性细胞代谢物的一种新颖...(一)

用于检测和定量分析极性细胞代谢物的一种新颖的HILIC LC-MS方法Henry Shion1、John Shockcor1、Evan Bernier2、Stephen Mcdonald2、Kirsten Hartil3、Bhavapriya Vaitheesvaran3、Haitao Lu3、Gu

一种用于检测和定量分析细胞代谢物的HILIC-LCMS方法

引言 复杂生物样品通常包含大量可反映有机体代谢状态的内源性代谢物。特别是骨骼肌可根据其是快收缩肌(白色肌肉,糖酵解型)还是慢收缩肌(红色肌肉,氧化型)而表现出特征性的代谢组“指纹图谱”。例如,红色肌肉应显示一种富含线粒体代谢物(如三羧酸循环)的代谢组指纹图谱;而白色肌肉应显示富含糖酵解代谢

凋亡细胞释放的代谢物激活巨噬细胞

  弗吉尼亚大学的一组研究人员发现,细胞凋亡过程中释放的代谢物会诱导巨噬细胞表达参与组织修复的基因,而且它们还能抑制炎症。在他们发表在《Nature》杂志上的论文中,该小组描述了他们对细胞凋亡过程的研究以及他们所了解到的情况。  细胞凋亡是机体细胞自然死亡的过程。先前的研究表明,这是一个有序的过程,

流式细胞仪定量分析细胞凋亡

流式细胞仪定量分析,细胞凋亡检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。流式细胞仪定量分析细胞凋亡,应用价值流式细胞仪检测具有以下特点:1)

流式细胞仪定量分析细胞凋亡

流式细胞仪定量分析,细胞凋亡检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。流式细胞仪定量分析细胞凋亡,应用价值流式细胞仪检测具有以下特点:1)

流式细胞仪定量分析细胞凋亡

流式细胞仪检测具有以下特点:1)、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2)、可以做许多相关性分析3)、结合被检测细胞的DNA含量的分析,可确定凋亡的细胞所处的细胞周期■检测形态学及细胞膜完整性的Hoechs-PI双染色法细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性液增加,但其程度介于正常细胞和

流式细胞仪定量分析

  (一)检测原理  细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞医学教.育网搜集整理。  (二)应用价值  流式细胞仪检测具有以下特点:  1)检测的

Cell子刊综述:干细胞研究单细胞定量分析

  了解调控细胞命运的关键分子是干细胞研究的核心问题,这需要在单细胞水平上定量分析分子和细胞行为。近年来技术进展实现了单个细胞高通量分子解析,以及持续性的非侵入式细胞行为观察。  Cell Stem Cell发布综述:“Quantitative Single-Cell Approaches to S

免疫组织(细胞)化学与定量分析(1)

如何获取与组织细胞功能相关的各种定量测量信息是免疫组织(细胞)化学的一大难题。制作免疫组织(细胞)化学标本环节较多,只要有一个环节失误就会影响实验结果,除了需要精制的药品外,还需要熟练的技术。那么,做成理想的标本后,如何进行观察才能获得尽量多的的各种定量信息,而且使这些信息能较客观的反映出来,这就是

什么是代谢物?

代谢物(metabolite)亦称中间代谢物,是指通过代谢过程产生或消耗的物质,生物大分子不包括在内。生物大分子的前体及降解产物是真正的代谢物。代谢过程中在酶作用下生成或转变的小分子化合物也称作代谢物。

代谢物的概念

代谢物(metabolite)亦称中间代谢物,是指通过代谢过程产生或消耗的物质,生物大分子不包括在内。生物大分子的前体及降解产物是真正的代谢物。代谢过程中在酶作用下生成或转变的小分子化合物也称作代谢物。

什么是代谢物?

代谢物(metabolite)亦称中间代谢物,是指通过代谢过程产生或消耗的物质,生物大分子不包括在内。生物大分子的前体及降解产物是真正的代谢物。代谢过程中在酶作用下生成或转变的小分子化合物也称作代谢物。

“宁波造”单细胞代谢物分析质谱仪获国际首台认定

  1月12日,记者从宁波华仪宁创智能科技有限公司获悉,该公司研制的单细胞代谢物分析质谱仪近日入选浙江省经济和信息化厅、浙江省财政厅印发的《2024年度浙江省首台(套)装备名单》,档次为国际首台(套)。该质谱仪可全自动完成单细胞的定位、萃取、电离、质谱分析,为单细胞代谢组学研究提供了全新的技术手段,

什么叫抗代谢物及抗代谢物的作用机理?

抗代谢物是指在微生物生长过程中常常需要一些生长因子才能正常生长,可以利用生长因子的结构类似物干扰机体的正常代谢,以达到抑制微生物生长的目的。一些与酶的正常底物或中间产物结构类似的物质,能与酶的正常底物或中间产物竞争酶活性部位使反应停止,从而阻断代谢途径。可用于抑制微生物生长,在治疗由病原微生物引起的

代谢物和细胞周期信号调控组蛋白乙酰化

  足够的营养是细胞增殖和组织发育的必要条件。细胞增殖和组织发育需要上调组蛋白乙酰化来激活基因转录。二者之间的联系,也就是:“营养物信号如何被传递到组蛋白乙酰化?”这个基础生物医学问题,长期未能得到阐明。  2021年6月17日,复旦大学赵世民团队/徐薇团队合作在Nature Metabolism杂

什么是抗代谢物?

抗代谢物(Anti一metabolite )又称代谢拮抗物(Metabolic Antagonism ),是一种人工合成的或生物体内天然存在的化学物质,其化学结构与生活过程中一些天然存在的必需代谢物类似,如将这种物质纳入体内,抗代谢物可与必需代谢物(metabolite  )发生特异性的拮抗(对抗)

抗代谢物的概念

抗代谢物(Anti一metabolite )又称代谢拮抗物(Metabolic Antagonism),是一种人工合成的或生物体内天然存在的化学物质,其化学结构与生活过程中一些天然存在的必需代谢物类似,如将这种物质纳入体内,抗代谢物可与必需代谢物(metabolite )发生特异性的拮抗(对抗)作用

次生代谢物的概念

植物次生代谢产生的一类种类繁多、含量一般较少的有机化合物。又称次生代谢物。主要分为含氮有机物、萜类化合物和酚类化合物三大类,如色素、生物碱、萜类、抗生素等。它们与初生代谢物除产生途径不同外,在分布和功能上也有差异。次生物质的分布有局限性,仅出现在一定的物种、器官、组织或细胞中。在功能上,有些次生物质

什么是抗代谢物?

抗代谢物(Anti一metabolite)又称代谢拮抗物(Metabolic Antagonism   ),是一种人工合成的或生物体内天然存在的化学物质,其化学结构与生活过程中一些天然存在的必需代谢物类似,如将这种物质纳入体内,抗代谢物可与必需代谢物(metabolite )发生特异性的拮抗(对抗)

什么是初生代谢物?

中文名称初生代谢物英文名称primary metabolite定  义维持细胞生命活动所必需基本代谢物。如糖类、脂质、蛋白质及核酸等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代谢(二级学科)

初生代谢物的概念

中文名称初生代谢物英文名称primary metabolite定  义维持细胞生命活动所必需基本代谢物。如糖类、脂质、蛋白质及核酸等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代谢(二级学科)

代谢物组的定义

中文名称代谢物组英文名称metabolome定  义细胞内在某一特定生理和发育阶段的所有小分子量的代谢物质。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)

《Nature》-小酌怡情大错特错!酒精代谢物诱使干细胞突变!

  关于酒精的危害,《Nature》今天发表的这篇文章会再度刷新你的认知。  这篇文章中研究人员阐明了乙醛(一种内源性和醇衍生代谢物)会引起的DNA损伤和突变现象。这种损伤导致DNA双链断裂,这些细胞中DNA损伤的积累促进了细胞自身的降解,而这种损伤的引起的错误修复会引发恶性肿瘤。  酒精的消耗导致

动态细胞荧成像定量分析系统技术指标

  动态细胞荧成像定量分析系统是一种用于生物学、临床医学、预防医学与公共卫生学、药学领域的分析仪器,于2006年9月30日启用。  技术指标  动态荧光比率成像定量分析系统: (1)高速动态连续可调波长荧光光源包含:  A) 计算机控制高速连续可调波长单色仪  B) 连续可调双侧狭缝  C) 计算机

什么是分解代谢物?

中文名称分解代谢物英文名称catabolite定  义通过分解代谢而产生的降解产物。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代谢(二级学科)

代谢物浓度酶法测定

传统的代谢物酶法测定分为终点法和动力学法。酶的作用有特异性,成分复杂的血清等体液样品往往不需进行预处理,简化了实验程序。酶的本质是蛋白质,没有毒性,这样就避免了环境污染。酶促反应的条件温和,制成试剂盒可适用于自动分析。1.代谢物酶促终点法测定在代谢物酶促反应中,随着时间的延续,待测物浓度逐渐减少,产

什么是植物次生代谢物?

植物次生代谢产生的一类种类繁多、含量一般较少的有机化合物。又称次生代谢物。主要分为含氮有机物、萜类化合物和酚类化合物三大类,如色素、生物碱、萜类、抗生素等。它们与初生代谢物除产生途径不同外,在分布和功能上也有差异。次生物质的分布有局限性,仅出现在一定的物种、器官、组织或细胞中。在功能上,有些次生物质