常用实验室革兰氏染色培养基配制方法

革兰氏染色法,是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难区别。经染色后,阳性菌呈紫色,阴性菌呈红色,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,从而用以分类鉴定。染色原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,再用95%乙醇脱色。 革兰氏染色液用水:培养基制备用水应使用电阻率不小于30万Ωcm的蒸馏水或与其同质的水,不使用离子交换器生产的去离子水。 称量:称量时需用多功能的角匙,预防交叉污染而影响检验结果;干粉培养基易吸潮,如有条件,尽量在湿度较低的房间称取培养基。 复水:复水时不可用铜锅或铁锅,防止有离子渗入培养基中,影响微生物的生长;容器的大小需大于复水后培养......阅读全文

革兰氏染色法的原理、方法和意义

 1.革兰氏染色法    是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显

革兰氏染色的基本原理及方法

革兰染色法是1884年由丹麦医师Gram创立,直到现今,革兰氏染色法仍是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。 细菌先经碱性染料结晶紫染色,而后经碘液进行媒染,之后用酒精脱色,在一定条件下有的细菌媒染后的颜色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌

革兰氏阴性细菌的鉴别染色法

  革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。  细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G-)。  为观察方便,脱色后再用

有关革兰氏染色法试验的详细介绍

  染色的差异主要是由于阴性与阳性细菌细胞壁的差异所引起的。  ①革兰氏阳性细菌的细胞壁  G+细菌细胞壁具有较厚(20-80nm)而致密的肽聚糖层,多达50层,占细胞壁成分的40%~95%,它同细胞膜的外层紧密相连。有的G+细菌细胞壁中含有磷壁酸(teichoic-acid),也称胞壁质(mure

关于细菌染色技术的类型—革兰氏染色法的基本介绍

  革兰氏染色法是最常用的鉴别染色法之一。此法起始1881年,染色步骤是先用结晶紫或龙胆紫染液加于已固定好的标本上使之着色,其后加碘液作媒染剂,再用酒精脱色,最后用复红或沙黄复染。革兰氏染色的结果与培养基成分、培养条件及操作技术等有密切关系。如涂片太厚影响酒精脱色,革兰氏阴性菌则可染成革兰氏阳性菌。

微生物的染色与形态结构观察实验——革兰氏染色法

实验方法原理革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法(Gramstain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。细菌对于

革兰氏染色结果的判定标准是什么

革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色。染色后除可以看到细菌形态,细分细菌种类。革兰氏染色阳性菌包括:致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、碳疽杆菌等。革兰氏阴性菌包括:百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等

革兰氏染色法具体操作方法

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:(1)制片。取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。 要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色;涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性;火焰固定不宜过热(以玻片不烫手为宜)。 (2)初染。滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)染色1-2min,

大肠杆菌在革兰氏染色后呈什么颜色

  大肠杆菌是革兰氏阴性杆菌。革兰氏阴性细菌通过革兰氏染色可被染成红色或粉红色。因此,如果染色正确,那么通过显微镜油镜观察,可以发现大肠杆菌为红色或粉红色的杆状细菌。  大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) 革兰氏阴性短杆菌,大小0.5×1~3微米。周生鞭毛,能运动,无芽孢。能

影响革兰氏染色正确性的因素有哪些

一、影响因素1、在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。2、假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变,而出现假阴性结果;另外,细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶,也导致细胞壁通透性的改

细菌中革兰氏染色法的过程是怎样的

微生物的染色方法很多,各种方法应用的染料也不尽相同,但是一般染色都要通过制片及一套染色操作程序.1、制片在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水,用接种环进行无菌操作,挑取培养物少许,置载玻片的水滴中,与水混合做成悬液并涂成直径约1厘米的薄层,为避免因菌数过多聚成集团,不利观察个体形态,可在载玻片之一侧再加一

革兰氏染色检查正常参考值及临床意义

中文名称:革兰氏染色检查 英文名称:Gram stain Examination 临床意义: 胸腹水、分泌物等涂片革兰氏染色检出细菌,可考虑为细菌感染。 对培养基生长细菌进行染色分类,并观察形态。

细菌形态学检查实验——革兰氏染色法

实验方法原理细菌经结晶紫初染染成蓝色。革兰氏染色阳性菌(G+)细胞壁肽聚糖层数多,且肽聚糖为空间网状结构,再经乙醇脱水,网状结构更为致密,染料复合物不易从细胞内漏出,仍为蓝色。而革兰氏染色阴性菌(G-)细胞壁脂类含量多,肽聚糖层数少,且肽聚糖为平面片层结构,易被乙醇溶解,使细胞壁通透性增高,结合的染

微生物检测中革兰氏染色相关知识点

革兰氏染色的原理细菌细胞通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而

如何区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌?

  染色反应:革兰氏阳性菌在染色过程中会保留紫色的晶紫染料,而革兰氏阴性菌则会失去紫色染料,被染成红色或粉红色。  细胞壁结构:革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,主要由多层肽聚糖和肽聚糖间的肽链组成,而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,由一层薄的肽聚糖和外膜组成。  细胞壁通透性:革兰氏阳性菌的细胞壁通透性较低,不

如何区分大肠杆菌、黑曲霉、啤酒酵母

这四种微生物分别属于原核微生物的革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌(大肠杆菌和枯草芽孢杆菌),真核微生物的单细胞酵母菌和丝状真菌(啤酒酵母和黑曲霉),从菌落形态和显微镜下的个体形态能区别开来。黑曲霉:四种比较而言,用普通的PDA培养基培养黑曲霉的菌落最大,呈圆形,菌丝蔓延迅速,初为白色,后变成鲜黄色直至黑色

骨髓培养基简化了染色体制备流程

  骨髓培养基根据间充质干细胞的生长需要,包含必需和非必需氨基酸、维生素、无机化合物、生长因子、胎牛血清以及其他补给成分。本品非常适用于培养骨髓间充质干细胞,能使人骨髓间充质干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化,能大大缩短细胞培养时间。产品严格无菌,无病毒和支原体,性能稳定。  骨髓培

尿液标本接种实验

实验方法原理尿路感染是一种比较常见的疾病,是大量微生物在尿道生长繁殖而引起的炎性病变,尤其在妇女及儿童中更为常见,临床上常采用尿细菌培养鉴定及药敏检测的方式对尿路感染进行诊断,但治疗时间长,不利于患者及时接受治疗。而尿液细菌直接涂片镜检的检测时间短且简单可行,得出结果迅速准确,根据菌体形态、染色等对

痰标本处理实验

1、一般细菌涂片检查:挑选痰液中脓性或带血部分,涂成均匀薄片,行革兰氏染色,镜检。根据其细菌形态,排列和染色性,大致可以初步推定菌属(或种)如镜见排列成葡萄状的革兰氏阳性球菌,可报告为:「找到革兰氏阳性球菌,形似葡萄球菌」;如见到爪子仁形或矛头状的尖端相背,成双排列,具有明显荚膜的革兰氏阳性球菌时,

痰标本处理实验

实验步骤1、一般细菌涂片检查:挑选痰液中脓性或带血部分,涂成均匀薄片,行革兰氏染色,镜检。根据其细菌形态,排列和染色性,大致可以初步推定菌属(或种)如镜见排列成葡萄状的革兰氏阳性球菌,可报告为:「找到革兰氏阳性球菌,形似葡萄球菌」;如见到爪子仁形或矛头状的尖端相背,成双排列,具有明显荚膜的革兰氏阳性

关于巴氏杆菌的简介

  巴氏杆菌科( Pasteurellaceae)包括巴氏杆菌属、曼氏杆菌属、里氏杆菌属、放线杆菌属和嗜血杆菌属等。其中常见的病原菌有多杀性巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、副猪嗜血杆菌以及猪传染性膜肺炎放线杆菌等。  多杀性巴氏杆菌引起多种家畜和家食巴氏杆菌病,在临床上表现为出血性败血症、传染性肺炎或局部

革兰氏阳性细菌的转化

一、革兰氏阳性细菌,转化过程的几个阶段: 1.细菌感受态的形成 由于分泌一种称为感受态因子的小蛋白而导致细菌感受态的形成。 2.转化因子的吸收双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合,并激活临近的核酸酶。DNA双链中的一条单链逐步降解,同时另一条单链逐步进入细胞 3.整合复合物前体的形成

革兰氏阳性细菌的转化

 一、革兰氏阳性细菌,转化过程的几个阶段: 1.细菌感受态的形成 由于分泌一种称为感受态因子的小蛋白而导致细菌感受态的形成。 2.转化因子的吸收 双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合,并激活临近的核酸酶。DNA双链中的一条单链逐步降解,同时另一条单链逐步进入细胞。 3.整合复合物前体的

什么是革兰氏阳性球菌?

  革兰氏阳性球菌(Gram-positive cocci)是一类细菌的总称,它们在显微镜下呈现出球形或近似球形的形态。这些细菌的细胞壁结构使其能够保留革兰氏染色剂,因此在革兰氏染色中呈现紫色。  革兰氏阳性球菌包括多种不同的细菌种类,其中一些是人类和其他动物的常见共生菌,但也有一些可以引起疾病。以

革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌的区别是什么?

  革兰氏染色是一种常用的细菌分类方法,可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。  革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,主要由多层肽聚糖和肽聚糖间的肽链组成,且细胞壁中含有较多的酸性物质,使得染色时能够保留紫色晶紫染料,呈现出紫色。  而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,主要由单层肽聚糖和脂多糖组成,且细胞壁中含有

尿液标本接种实验

1、涂片检查:一般细菌涂片:以无菌操作取尿 5-10 ml 放入无菌管中,经 3000 r/min 离心 30 min 后,倾去上清液,取沉渣,涂片,革兰氏染色,镜检。如发现有革兰氏阴性或阳性细菌,即可做出报告。2、尿细菌培养:临床多采用中段尿做细菌培养,应做菌落计数,培养结果才有诊断价值。(1)平

水体中大肠菌群的检测(二)

(三)平板培养试验将初发酵实验中产酸产气的后只产酸或只产气的试管中的培养物用接种环取少许,划线接种在品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基平板上,为了确保获得分离的单菌落,须注意以下事项:(1)划线间距至少相隔0.5厘米;(2)接种钉尖端要稍弯;(3)先对试管轻击并使之倾斜,以免接种针挑取到任何膜状物或

绿针假单胞菌的基本介绍

  绿针假单胞菌,形态特征为菌体为杆状,0.3μm~0.8μm×1.0μm ~1.1μm,革兰氏染色阴性,无芽孢,单极生鞭毛,能运动。  菌体为杆状,0.3μm~0.8μm×1.0μm ~1.1μm,革兰氏染色阴性,无芽孢,单极生鞭毛,能运动。在KMB培养基上培养24h后可形成1.2mm菌落,菌落可

几种常见的微生物基础实验

  本文介绍几种常见的微生物基础试验的目的、原理、内容等,以便刚刚接触微生物的同志们对试验有个基本的认识. 实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的    1、掌握配制培养基的一般方法和步骤;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法;    2、了解培养基的配制原理;了解常见灭菌、清毒

化脓性球菌的形态和培养特性

  形态  染色球形或稍呈椭圆形,直径1.0um左右,排列成葡萄状。葡萄球菌无鞭毛,不能运动。无芽胞,除少数菌株外一般不形成荚膜。易被常用的碱性染料着色,革兰氏染色为阳性。其衰老、死亡或被白细胞吞噬后,以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。  培养特性  营养要求不高,在普通培养基上生长良好,在含有