常用实验室革兰氏染色培养基配制方法

革兰氏染色法,是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难区别。经染色后,阳性菌呈紫色,阴性菌呈红色,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,从而用以分类鉴定。染色原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,再用95%乙醇脱色。 革兰氏染色液用水:培养基制备用水应使用电阻率不小于30万Ωcm的蒸馏水或与其同质的水,不使用离子交换器生产的去离子水。 称量:称量时需用多功能的角匙,预防交叉污染而影响检验结果;干粉培养基易吸潮,如有条件,尽量在湿度较低的房间称取培养基。 复水:复水时不可用铜锅或铁锅,防止有离子渗入培养基中,影响微生物的生长;容器的大小需大于复水后培养......阅读全文

下呼吸道标本的细菌学检验

 1. 下呼吸道标本培养常见病原菌革兰阳性菌 革兰阴性菌金黄色葡萄球菌 脑膜炎奈瑟氏菌化脓性链球菌 流感嗜血杆菌肺炎链球菌 肠杆菌科细菌结核分支杆菌 非发酵菌白喉棒状杆菌 嗜肺军团菌假丝酵母菌 2.标本收集:2.1下呼吸道标本采集的基本要求是采集深部的痰液,具体方法有以下几种:1.自然咯痰法2.气管

革兰氏阴性菌的概况

  革兰氏阴性菌细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类含量高。当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁通透性增强,使龙胆紫极易被乙醇抽出而脱色;再度染上复染液番红的时候,便呈现红色了。

革兰氏阴性细菌的基本介绍

  革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色,然后又被染上了复染液(番红)的颜色,因此呈现红色。  以[大肠杆菌]为代表。大肠杆菌为兼气性菌种,一般生存于肠道中及厌氧的还境中。革兰氏阴性菌细胞壁的特

什么是革兰氏阴性球杆菌

为了对细菌进行分类,常用染色的方法,即将细菌涂于玻片上,用某种染料进行初染。在革兰氏染色反应呈红色的杆状或类似杆状的细菌称革兰氏阴性球杆菌,以大肠杆菌、克雷白杆菌、绿脓杆菌为代表。

革兰氏阴性菌的特性

  1、胞质膜(Cytoplasmic membrane):存在于细胞质中各膜结合细胞器中的膜,包括核膜、内质网膜、高尔基体膜、溶酶体膜、线粒体膜、叶绿体膜、过氧化物酶体膜等。  2、肽聚糖薄层,比革兰氏阳性菌要薄得多 。  3、外层膜(outer membrane),是在肽聚糖层之外的膜,内含有脂

革兰氏阳性细菌的相关介绍

  革兰氏阳性菌是能够用革兰氏染色染成深蓝或紫色的细菌,相反革兰氏阴性菌不能被染色。它们细胞壁中含有较革兰氏阳性细菌大量的肽聚糖,但经常缺乏革兰氏阴性菌所拥有的第二层膜和脂多糖层。  革兰氏阳性菌包含细菌中的一个大门——厚壁菌门(Firmicutes),包括一些著名的属,如芽孢杆菌(Bacillus

什么是革兰氏阳性菌?

  革兰氏阳性菌是一类细菌,其细胞壁结构特殊,能够抵抗革兰氏染色剂的脱色作用,因此在显微镜下呈现出紫色或蓝色。革兰氏阳性菌的细胞壁主要由多层的肽聚糖和肽聚糖间的肽链组成,这些结构使得革兰氏阳性菌的细胞壁比革兰氏阴性菌更加厚实和坚硬。  革兰氏阳性菌包括许多重要的致病菌,如葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等

肠道杆菌培养物和染色标本观察

1、革兰氏染色标本:大肠杆菌和伤寒杆菌革兰氏染色呈红色、G-杆菌,两端钝圆,中等大小。2、琼脂平板培养物(1)伊红美蓝培养基:为常用的肠道致病菌分离鉴别培养基。在该培养基上,大肠杆菌能发酵乳糖产酸,使伊红与美蓝合成紫黑色化合物,故其菌落呈紫黑色,伤寒杆菌对乳糖不分解,故其菌落呈无色或微黄色透明菌落。

肠道杆菌培养物和染色标本观察

实验步骤1、革兰氏染色标本:大肠杆菌和伤寒杆菌革兰氏染色呈红色、G-杆菌,两端钝圆,中等大小。2、琼脂平板培养物(1)伊红美蓝培养基:为常用的肠道致病菌分离鉴别培养基。在该培养基上,大肠杆菌能发酵乳糖产酸,使伊红与美蓝合成紫黑色化合物,故其菌落呈紫黑色,伤寒杆菌对乳糖不分解,故其菌落呈无色或微黄色透

如何根据细胞壁结构区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌?

  革兰氏染色法是一种常用的细菌分类方法,根据细菌细胞壁的结构和组成不同,可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。  革兰氏阳性菌的细胞壁主要由多层厚的肽聚糖和少量的肽聚糖组成,没有外膜。而革兰氏阴性菌的细胞壁则由一层薄的肽聚糖和一层较厚的外膜组成。  在革兰氏染色过程中,革兰氏阳性菌会被染成紫色

淋病奈瑟菌的实验室检查及其诊断

细菌的实验室检查及其它检查(1) 涂片检查:取患者尿道分泌物或宫颈分泌物,作革兰氏染色,在多形核白细胞内找到革兰氏阴性双球菌。涂片对有大量脓性分泌物的单纯淋菌性前尿道炎患者,此法阳性率在90%左右,可以初步诊断。女性宫颈分泌物中杂菌多,敏感性和特异性较差,阳性率仅为50-60%,且有假阳性,

淋病奈瑟菌实验室检查及其诊断

细菌的实验室检查及其它检查(1) 涂片检查:取患者尿道分泌物或宫颈分泌物,作革兰氏染色,在多形核白细胞内找到革兰氏阴性双球菌。涂片对有大量脓性分泌物的单纯淋菌性前尿道炎患者,此法阳性率在90%左右,可以初步诊断。女性宫颈分泌物中杂菌多,敏感性和特异性较差,阳性率仅为50-60%,且有假阳性,因此世界

医学“侦查兵”的秘密(49)

近年来,检验医学发展迅速。为了方便体外诊断产业界的同仁们了解和掌握日常检验的中英文名称、正常值参考范围和简要临床意义,我会将每天编辑推送3条相关讯息,以飨读者。 1、生殖道分泌物培养+细菌药敏实验 中文名称:生殖道分泌物培养+细菌药敏实验 英文名称:Culture for Geni

关于百日咳杆菌的基本介绍

  百日咳杆菌为卵圆形短小杆菌,大小为0.5~1.5×0.2~0.5um,属鲍特氏菌属Bordetella),无鞭毛、芽胞。革兰氏染色阴性。用甲苯胺蓝染色可见两极异染颗粒。专性需氧,初次分离培养时营养要求较高,需用马铃薯血液甘油琼脂培养基(即鲍~金氏培养基)才能生长。经37℃2~3天培养后,可见细小

脑脊液的微生物学检查

 1.显微镜检查:革兰氏染色后的显微镜检出是脑脊液微生物学检查中的第一步,这在化脓性脑膜炎时其阳性率约为60-90%.如果脑脊液中细菌数量小于1000个/μl时可出现假阴性,但可以通离心沉淀涂片来提高阳性率。有人提出用吖啶橙荧光染料染色代替革兰氏染色,可提高细菌出率。结核杆菌用ZiehlNeeiso

脑脊液的微生物学检查

 1.显微镜检查:革兰氏染色后的显微镜检出是脑脊液微生物学检查中的第一步,这在化脓性脑膜炎时其阳性率约为60-90%.如果脑脊液中细菌数量小于1000个/μl时可出现假阴性,但可以通离心沉淀涂片来提高阳性率。有人提出用吖啶橙荧光染料染色代替革兰氏染色,可提高细菌出率。结核杆菌用ZiehlNeeiso

葡萄球菌属的形态染色的简介

  葡萄球菌属(Staphylococcus)是一群革兰氏阳性球菌,因常堆聚成葡萄串状,故名。但在脓汁、乳汁、液体培养基中呈双球或短链排列。 多数为非致病菌,少数可导致疾病。葡萄球菌是最常见的化脓性球菌,是医院交叉感染的重要来源。  球形或稍呈椭圆形,直径1.0μm左右,排列成葡萄状。葡萄球菌无鞭毛

如何诊断加特纳菌性阴道炎?

  (一)妇科检查可见:  外阴充血水肿,阴道粘膜充血,有时见出血点。 分泌物颜色灰白,质地稀薄,有时呈小泡沫状,白带气味腥臭。阴道pH为5~5.5。  (二)实验室检查:  可以取阴道分泌物直接涂片,未干燥前进行显微镜检查,在成熟的阴道上皮细胞表面,由于阴道嗜血杆菌的粘附,会出现点状颗粒,细胞边缘

金黄色葡萄球菌的检验

  1主要试剂和试验方法:  1.1革兰氏染色:  1.1.1涂片、火焰固定。  1.1.2草酸铵结晶紫染1min。  草酸铵结晶紫染液的配制:  溶液A:结晶紫2g,95%酒精20mL,溶液B:草酸铵0.8g,蒸馏水80mL。将A、B溶液混合,用滤纸过滤后即可使用。  1.1.3自来水冲洗。  1

金黄色葡萄球菌的检验

 1主要试剂和试验方法:  1.1革兰氏染色:  1.1.1涂片、火焰固定。  1.1.2草酸铵结晶紫染1min。  草酸铵结晶紫染液的配制:  溶液A:结晶紫2g,95%酒精20mL,溶液B:草酸铵0.8g,蒸馏水80mL。将A、B溶液混合,用滤纸过滤后即可使用。  1.1.3自来水冲洗。  1.

为什么油镜的放大倍数比普通物镜大

微生物实验中细菌在染色前需要固定的原因:一:杀死细胞,是染料易于着色。二:使细菌附着于玻片上,不易被水冲掉。在固定时,是要慢慢晾干,如果得确要加快速度,可以处于酒精灯火焰上部远处稍微烘几下,切忌烘得玻片升温,否则有可能会破坏细菌生命形态细菌的革兰氏染色与显微观察一、 实验原理革兰氏染色原理:细菌对于

金黄色葡萄球菌检验的操作步骤介绍

  1.增菌:取 1:10 稀释的样品 10mL 接种到 90mL SCDLP 液体培养基中,置 36℃±1℃培养箱,培养 24h±2h。  注:如无此培养基也可用 7.5%氯化钠肉汤。  2.分离:自上述增菌培养液中,取 1—2 接种环,划线接种在 Baird Parker 平板培养基,如无此培养

实验动物细菌学监测标准操作规程

主体内容:1. 标本的采集正常动物细菌检测主要检查呼吸道和肠道,分别取气管分泌物及肠内容物做细菌培养检查。对于发病动物,采取其病变组织和脏器做细菌学检查。2. 细菌的培养细菌是单细胞的原核生物,绝大部分都可以在人工培养基上进行繁殖,只有少数例外,如泰泽病原体需在活细胞中繁殖。不同细菌种类所要求的最适

病原菌的鉴别实验

实验方法原理 1.致病性葡萄球菌耐盐,在高盐培养基上能生长;2. 致病性葡萄球菌能发酵甘露醇。3. 当颗粒性抗原(如:细菌)与特异性抗体结合后,在有电解质存在的环境下,抗原抗体可凝集成肉眼可见的块状物。仪器、耗材 脓液标本增菌液高盐琼脂培养基甘露醇发酵培养基革兰氏染液NS抗金黄色葡萄球菌抗体玻片接种

病原菌的鉴别实验

实验方法原理1.致病性葡萄球菌耐盐,在高盐培养基上能生长;2. 致病性葡萄球菌能发酵甘露醇。3. 当颗粒性抗原(如:细菌)与特异性抗体结合后,在有电解质存在的环境下,抗原抗体可凝集成肉眼可见的块状物。仪器、耗材脓液标本增菌液高盐琼脂培养基甘露醇发酵培养基革兰氏染液NS抗金黄色葡萄球菌抗体玻片接种环酒

溶血性链球菌的相关内容介绍

  溶血性链球菌又称沙培林,对热和化学清毒剂均敏感,常引起扁桃体、咽部、中耳等感染。亦为肾盂肾炎、产褥热、猩红热的病原体。  链球菌呈球形或椭圆形,直径0.6-1.0μm,呈链状排列,长短不一,从4-8个至20-30个菌细胞组成不等,链的长短与细菌的种类及生长环境有关。  形态与染色  在液体培养基

微生物盲样检测过程分析

一、明确盲样检测目标;首先要清楚检测哪类微生物:1、根据病原菌的致病部位:肠道致病菌、呼吸道致病菌等。2、何类产品的微生物:食品中微生物、化妆品中微生物、水质中微生物等。 二、审核盲样性状:根据盲样性状制订检测方案,如:液体、固体、附着于载体上、产品(食品、化妆品、水等)。混合菌(一般为1~3株菌,

微生物盲样检测过程分析!

一、明确盲样检测目标;首先要清楚检测哪类微生物:1、根据病原菌的致病部位:肠道致病菌、呼吸道致病菌等。2、何类产品的微生物:食品中微生物、化妆品中微生物、水质中微生物等。 二、审核盲样性状:根据盲样性状制订检测方案,如:液体、固体、附着于载体上、产品(食品、化妆品、水等)。混合菌(一般为1~3株菌,

常见的革兰氏阴性菌介绍

常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌及霍乱弧菌等及脑膜炎双球菌等。

关于革兰氏阳性细菌的分类介绍

  放线菌是另一大类革兰氏阳性菌,根据DNA中鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的含量,放线菌被称为高G+C革兰氏阳性菌,而厚壁菌被称为低G+C革兰氏阳性菌。如果细胞的第二层膜是衍生特征,这两类革兰氏阳性菌可能是细菌基部的分支,否则它们可能组成关系相对较近的单系群。它们被认为可能是古细菌和真核生物的祖先,因