HPLC基础知识教程(十三)
3．流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。 注：流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的强相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。所以在这种情况下有机胺（如三乙胺）又称为减尾剂或除尾剂。 4．流动相的脱气 HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚......阅读全文
HPLC基础知识教程（六）
1．柱的构造 色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛
VE中苯并芘的HPLC检测
苯并芘是由5个苯环构成的多环芳烃化合物，是一种强致癌物，在生产植物油的过程中可能因环境污染、原材料携带或加工时温度过高而产生。目前，维生素E的生产都是以植物油生产脱臭过程的副产物-脱臭馏分作为原料，因此苯并芘也不可避免地残留于脂溶性的维生素E产品中。为了评价维生素E中苯并芘含量是否超标，本方法
HPLC基础知识教程（四）
III．HPLC系统 HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还
HPLC基础知识教程（五）
2．泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作： ①、防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Mi
HPLC保留时间快速变化现象
1. 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
hplc级是什么意思
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
HPLC是做什么的
HPLC是高效液相色谱，英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途：高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于
HPLC日常维护有哪些步骤
高效液相色谱（HPLC）是色谱法的一种，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 高效液相色谱（HPLC）的日常维护有哪些呢？ 1.高效液相级色谱醇，
HPLC仪的结构及功能
HPLC仪一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统（色谱柱）、检测系统和数据处理与记录系统组成，具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分。其中输液泵、色谱柱和检测器是HPLC仪的关键部分 。1. 溶剂输送系统储液器：用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器
做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰，顾名思义，就是指在相同的色谱条件下，有时候出现，有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的，查询了相关文献，结合本人以往的经验，来谈谈鬼峰的成因及应对策略，主要体现在以下几个方面：1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时，由于开始时有机相比例不高，洗脱能力不强，部分杂质在便富集在色谱
HPLC基础知识教程(二)
II．基本概念和理论 一、基本概念和术语 1．色谱图和峰参数 色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elutionprofile)。 基线(baseline)——经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出
HPLC基础知识教程（八）
全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射全屏显示表格检测限(g/ml)10-1010-1310-13＜10-9g/s10-9池体积(ul)2~10~7＜1————梯度洗脱适宜适宜不宜适宜适宜细管径柱难难适宜适宜适宜样品破坏无无无有无
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话，最好还是用（水：乙腈= 9：1）先冲洗一下，如果柱子里盐不冲洗干净的话，再用小极性的流动相冲柱子时，盐就会析出，影响色谱柱寿命。要是没有盐的话，就无所谓了，用甲醇 乙腈冲洗都行，冲洗到什么程度，主要看柱压是否已经回落，稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙腈最好）中
HPLC基础知识教程(十二)
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1．键合相的性质 目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷
HPLC基础知识教程(三)
4．相平衡参数 分配系数(distributioncoefficient，K)——在一定温度下，化合物在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的浓度之比。K＝。 分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中，K有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数
液相色谱（HPLC）入门（四）
高效液相色谱分离模式总的来说，化合物的三种主要的性质可以用来产生高效液相色谱分离。它们是：· 极性· 电荷· 分子大小首先，让我们考虑极性和根据这一特性的两种主要分离模式：正相和反相色谱。基于极性的分离一个分子的结构、活性和物化性质由组成它的原子和化学键决定。在一个分子内部，决定了其特殊性质和可预测
赛默飞在HPLC－2018推出最新HPLC色谱柱－－提供更高分辨率
分析测试百科网讯 第47届高效液相分离及相关技术国际研讨会于2018年7月29日-8月2日在华盛顿举行，为了支持高效液相色谱的创新和应用，赛默飞在会上展示其最新的HPLC色谱柱产品。 “我们的客户不断面临新的分析挑战，因为他们使用用HPLC来加深对分析样品，”赛默飞色谱和质谱分析的副总裁兼总经
依利特将参加HPLC－2011－Dalian
依利特分析仪器有限公司将参加2011年10月8日至11日在大连世界博览广场览馆举办的第37 届国际高效液相色谱及相关技术会议（含仪器展览会）(HPLC 2011 Dalian)。 期间我们将向您展出大流量工业制备型高效液相色谱仪、P1201高效液相色谱仪、LU23
HPLC色谱系统的功能介绍
主要功能 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附 -解吸的分配过程，
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P
HPLC紫外灯的维护和更换
HPLC紫外灯的维护和更换 一、HPLC紫外灯的维护 对紫外灯的最根本维护就是在不进行测定时应及时关灯。具体的做法为： 1.缩短检测前的开灯时间 尽量在检测前1小时开紫外灯，具体时间根据系统的稳定时间而定。太早会缩短灯的使用寿命太晚会浪费流动相，对色谱柱也不好。
分享|HPLC的酸清洗和钝化！
HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸，暴露在实验室化学环境，与零部件制造相关的残留物，或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗，但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上，因而会降低总的性能。•磷酸清洗：通常用于从系统中除去有机杂质。可能是由于洗
良好的HPLC色谱柱使用规范
1、在使用前过滤溶剂2、完全润湿在运输中变干的色谱柱3、了解溶剂对样品的溶解性及分离的影响4、对含有保留性较强的杂质组分的样品要进行预处理5、清除柱填料的局限性：pH、温度、化学兼容性6、使用新鲜的水溶液，并考虑使用生物稳定剂（如叠氮化钠）7、定期用强极性的溶剂清洗色谱柱8、储存色谱柱时，应冲净缓冲
HPLC高压输液泵日常保养
1. 使用高纯度试剂和HPLC级纯度的溶剂；流动相使用前必须经过过滤和脱气处理。 2. 实验开始前和实验结束后，用纯甲醇冲洗整个液体流路一定时间，可避免许多麻烦发生；不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中。 3. 平时应备有泵密封垫、单向阀、泵头装置、各式接头、保险丝等配件和工具，定期更换垫圈，需要时圆
HPLC系统的酸清洗和钝化
30%磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂/洗涤剂的共同作用，可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害（特别是对日常使用低紫外波长的应用来说）。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用，但它是系统钝化前清洗的第一步。一般来说，对于阳离子的离子色谱分析或配有氧化方
第33－届HPLC－会议参展通知
第33 届HPLC 会议参展通知 HPLC2008 Kyoto The 33rd International Symposium on High Performance Liquid Phase Separations and Related Techniques 时间：2008 年1