HPLC基础知识教程(十三)
3．流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。 注：流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的强相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。所以在这种情况下有机胺（如三乙胺）又称为减尾剂或除尾剂。 4．流动相的脱气 HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚......阅读全文
HPLC基础知识教程（八）
全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射全屏显示表格检测限(g/ml)10-1010-1310-13＜10-9g/s10-9池体积(ul)2~10~7＜1————梯度洗脱适宜适宜不宜适宜适宜细管径柱难难适宜适宜适宜样品破坏无无无有无
HPLC部分问题解答
1、除了流速外，还有哪些因素能引起压力改变? 改变流动相组成和温度;改变柱长、柱内径和填料粒度;柱突然阻塞压力升高(正常情况下其它条件不变柱压都是逐渐升高的)。2、什么是强溶剂、弱溶剂? 改变流动相的组成或溶剂溶剂强度就可以改变峰容量因子和保留时间。在一定条件下，减少保留时间或缩短分析时间的
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话，最好还是用（水：乙腈= 9：1）先冲洗一下，如果柱子里盐不冲洗干净的话，再用小极性的流动相冲柱子时，盐就会析出，影响色谱柱寿命。要是没有盐的话，就无所谓了，用甲醇 乙腈冲洗都行，冲洗到什么程度，主要看柱压是否已经回落，稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙腈最好）中
HPLC基础知识教程（十四）
V．HPLC应用 一、样品测定 1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱
HPLC日常操作注意事项
选择流动相时应注意的几个问题：尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有较强的紫外吸收，一般
HPLC保留时间快速变化现象
1. 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
关于HPLC的流动相问题
1)PH值特别重要：一般C18柱PH小于3时，容易损坏色谱柱，但是抗酸性的柱可以使用小的PH值。 2) 注意选择试剂的截止波长：如乙腈截止波长215nm、丙酮截止波长330nm、正丁烷210nm等等(具体情况请读者参阅本文的参考文献)。 3)流速：流速要适当，否则影响峰形、浪费溶剂，一般常规
hplc级是什么意思
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
HPLC的维护与使用注意
HPLC以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广及分析检测限低等优势，在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。本文就液相色谱仪在实际操作时应注意的事项及维护做了简单介绍。 主要部件介绍 输液系统 输液系统主要包括在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置。在线
HPLC仪的结构及功能
HPLC仪一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统（色谱柱）、检测系统和数据处理与记录系统组成，具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分。其中输液泵、色谱柱和检测器是HPLC仪的关键部分 。1. 溶剂输送系统储液器：用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器
HPLC基础知识教程（四）
III．HPLC系统 HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还
做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰，顾名思义，就是指在相同的色谱条件下，有时候出现，有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的，查询了相关文献，结合本人以往的经验，来谈谈鬼峰的成因及应对策略，主要体现在以下几个方面：1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时，由于开始时有机相比例不高，洗脱能力不强，部分杂质在便富集在色谱
HPLC基础知识教程（五）
2．泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作： ①、防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Mi
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话，最好还是用（水：乙腈=9：1）先冲洗一下，如果柱子里盐不冲洗干净的话，再用小极性的流动相冲柱子时，盐就会析出，影响色谱柱寿命。要是没有盐的话，就无所谓了，用甲醇乙腈冲洗都行，冲洗到什么程度，主要看柱压是否已经回落，稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙腈最好）中，避
HPLC组分的快速冻干法
分析测试百科网讯 Genevac的系列3 HT蒸发器的快速冻干功能是为了提供一种快速、高通量可以替代冷冻干燥的HPLC纯化组分的方法而开发的。 传统的蒸发去溶剂方法，例如水和乙腈，通常会因为溶剂与样品的相互作用而形成胶状或油状物质。采用系列3 HT蒸发器的LyoSpeed™快速冻干技术，使得制
hplc级是什么意思
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
液相色谱（HPLC）入门（三）
高效液相色谱量级 [分析，制备和工程]我们已经讨论了高效液相色谱如何提供分析数据，用于定性和定量样品中的化合物。然而，高效液相色谱也可以用来纯化和收集所需的每一个化合物，在流通池下游使用组分收集器。这个过程被称为制备液相[如图 K].在制备液相中，科学家可以收集每个流出色谱柱的组分[例如：在本例中，
VE中苯并芘的HPLC检测
苯并芘是由5个苯环构成的多环芳烃化合物，是一种强致癌物，在生产植物油的过程中可能因环境污染、原材料携带或加工时温度过高而产生。目前，维生素E的生产都是以植物油生产脱臭过程的副产物-脱臭馏分作为原料，因此苯并芘也不可避免地残留于脂溶性的维生素E产品中。为了评价维生素E中苯并芘含量是否超标，本方法
HPLC日常维护有哪些步骤
高效液相色谱（HPLC）是色谱法的一种，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 高效液相色谱（HPLC）的日常维护有哪些呢？ 1.高效液相级色谱醇，
HPLC基础知识教程(十二)
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1．键合相的性质 目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷
HPLC是做什么的
HPLC是高效液相色谱，英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途：高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于
HPLC的酸清洗和钝化
HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸，暴露在实验室化学环境，与零部件制造相关的残留物，或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗，但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上，因而会降低总的性能。 •磷酸清洗：通常用于从系统中除去有机杂质。可能
HPLC－System－features－stackable,－modular－design
Product News Network, March 25, 2005 Finnigan™ Surveyor Plus provides PDA detection for high-throughput sample processing environments. It feature
HPLC基础知识教程（十）
一、基质（担体） HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大，在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩，溶剂或溶质容易渗入有机基质中，导致填料颗粒膨胀，结果减少
离子色谱和HPLC的区别
从色谱原理上分类，离子色谱属液相色谱的一种，但由于离子色谱与普通高效液相色谱在结构和分析对象上有一些差异，一般作为独立的一个色谱大类考虑。离子色谱与高效液相色谱的差别主要体现在仪器结构和应用范围两个方面。 1)在仪器结构方面：离子色谱和高效液相色谱均有溶剂输送系统、进样系统、检测系统和信号记录
HPLC常见故障排除小贴士
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。 鉴于HPLC在全行业运用越来越广泛，因此每一个实验室分析人员都应该熟练掌握并应用HPLC，对于一些常见的故障分析应该做到游刃有余，才能在运行故障的时候即使解决问题，提高工作效率。
水质对－HPLC－分析的影响
简介： 优化的高效液相色谱法分析需要高纯度溶剂和试剂。同时，在流动相准备阶段，色谱柱中盐和有机溶剂的选择十分谨慎，所以水质是非常重要的。在洗脱液中，中痕量有机物的存在可能会导致长期不好的结果。随着时间推移，柱效可能会阻塞，导致分辨率降低，峰拖尾。大量实验表明，水中的有机物可能极大地影响液相色谱
液相色谱（HPLC）入门（五）
正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中，茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末； 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极
HPLC基础知识教程(十三)
3．流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分
液相色谱（HPLC）入门（一）
什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料，粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶